當前(qian)位置:首(shou)頁 > 技術文(wen)章(zhang) > 小鼠(shu)血(xue)管(guan)緊(jin)張素(su)Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測試劑盒(he)試劑操(cao)作
試劑操(cao)作:規(gui)範(fan)與細節
試劑平衡:試劑盒(he)從(cong)冷藏(zang)環(huan)境中取(qu)出後,應在(zai)室(shi)溫平衡15-30分(fen)鐘(zhong)後方可使(shi)用。
洗滌液配(pei)置:用(yong)蒸(zheng)餾水1:20稀釋(shi)(示例(li):1ml濃(nong)縮(suo)洗滌液加(jia)入19ml的(de)蒸(zheng)餾水)。
標準品配(pei)制:取(qu)7個1.5ml離(li)心管(guan),分(fen)別標註1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank。從至(zhi)七(qi)管(guan)中分(fen)別加入標準品/樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液200ul。在(zai)管(guan)中加(jia)入標準品溶(rong)液200ul,置於(yu)漩渦混(hun)合(he)器上混勻後用加(jia)樣器(qi)吸出200ul,移至(zhi)第(di)二(er)管(guan)。
加樣(yang)規範(fan):各(ge)步(bu)加(jia)樣(yang)均應使(shi)用加樣器,並經(jing)常校對其準確性,以(yi)避免(mian)試驗誤(wu)差(cha)。壹次(ci)加(jia)樣時間(jian)控制在5分(fen)鐘(zhong)內(nei),如(ru)標本數(shu)量多(duo),推薦(jian)使(shi)用排(pai)槍加樣。
封(feng)板膜使(shi)用:封(feng)板膜只(zhi)限(xian)壹次(ci)性(xing)使(shi)用,以避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。
底物(wu)保(bao)存(cun):底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)。
在(zai)完(wan)成標準品梯度(du)稀(xi)釋(shi)後,需特別註意標準曲(qu)線建立(li)的(de)精確性。建議(yi)采(cai)用(yong)雙復孔檢測模(mo)式(shi),每(mei)次(ci)加(jia)樣前(qian)需輕(qing)柔渦旋(xuan)混勻3秒(miao),避(bi)免(mian)產(chan)生(sheng)氣(qi)泡(pao)影(ying)響(xiang)吸(xi)光(guang)度(du)讀(du)數(shu)。對於(yu)低(di)濃(nong)度(du)樣(yang)本(如(ru)1/64管(guan)),建議(yi)延(yan)長(chang)離(li)心時(shi)間至(zhi)5分(fen)鐘(zhong)(1000×g)以提(ti)高(gao)沈(chen)澱回(hui)收(shou)率。
實(shi)際(ji)操作中(zhong)需(xu)監控三個關(guan)鍵(jian)控(kong)制(zhi)點:壹是(shi)移液(ye)器(qi)槍頭需浸入液(ye)面(mian)下2mm再緩(huan)慢(man)釋(shi)放,防止(zhi)液(ye)體(ti)掛壁(bi);二是(shi)酶(mei)標板讀(du)數(shu)前(qian)需用(yong)無塵(chen)紙(zhi)輕(qing)拭(shi)底(di)部(bu)光(guang)路區(qu)域;三(san)是(shi)當室溫低(di)於(yu)20℃時,應將底物(wu)預熱(re)至(zhi)37℃後再使(shi)用。特殊樣(yang)本(如(ru)溶血(xue)或脂(zhi)血(xue)標本)需進(jin)行10倍(bei)稀(xi)釋(shi)後重(zhong)新檢測,並在(zai)報(bao)告中(zhong)註明修(xiu)正(zheng)系(xi)數(shu)。
建議(yi)每(mei)批次(ci)實(shi)驗設(she)置質(zhi)控血(xue)清(qing),其回(hui)收(shou)率應控(kong)制(zhi)在(zai)95%-105%之間。若(ruo)發現(xian)標準曲(qu)線R²值(zhi)<0.99,需檢查以下環(huan)節:稀(xi)釋(shi)槍頭是(shi)否(fou)帶(dai)殘(can)留液(ye)體(ti)、酶(mei)標板孔是(shi)否(fou)存(cun)有交(jiao)叉(cha)汙染(ran)、溫育時(shi)間(jian)是(shi)否(fou)準確。對於(yu)臨(lin)界(jie)值(zhi)樣本,推薦(jian)采(cai)用(yong)原(yuan)倍(bei)和1:2稀釋(shi)雙孔復測取(qu)均(jun)值(zhi)。
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