谷(gu)研(yan)試(shi)劑(ji)-臨床(chuang)研究所(suo)考慮的(de)因(yin)素(su)

臨(lin)床(chuang)前實驗(yan)對試劑(ji)的特(te)異性(xing)、敏感(gan)性(xing)等(deng)指(zhi)標(biao)進(jin)行(xing)了評(ping)價，雖然臨床(chuang)前的樣(yang)品有壹(yi)定(ding)的代(dai)表(biao)性(xing)，但其(qi)樣(yang)品是經(jing)過選(xuan)擇的，其量(liang)畢(bi)竟(jing)有限(xian)，並不(bu)能*代(dai)表實(shi)際(ji)應(ying)用中樣品的情況，因(yin)此，在試(shi)劑(ji)註冊(ce)以(yi)前，必須進(jin)行臨床(chuang)評(ping)價。通(tong)過臨(lin)床(chuang)評(ping)價，可(ke)以預(yu)測(ce)試(shi)劑(ji)在實(shi)際應(ying)用中可能遇到(dao)的(de)問(wen)題，以(yi)便在試(shi)劑(ji)說明書中提(ti)醒(xing)用戶註意，而(er)且通過臨(lin)床(chuang)評(ping)價也(ye)可以(yi)對臨床(chuang)前所(suo)制定(ding)的(de)各項(xiang)指(zhi)標(biao)(如(ru)試(shi)劑(ji)的臨(lin)界值等(deng))進(jin)行(xing)修(xiu)正(zheng)。
壹(yi)、臨(lin)床(chuang)研究單位
臨(lin)床(chuang)評(ping)價應(ying)至(zhi)少(shao)在(zai)三(san)個(ge)省(sheng)級以上(shang)單位進(jin)行，而(er)且這三個單位應(ying)代(dai)表(biao)被(bei)檢(jian)測物(wu)的(de)不(bu)同(tong)流行(xing)區(qu)域，分(fen)別(bie)為(wei)被(bei)檢(jian)測物(wu)的(de)高、中、低(di)的流(liu)行(xing)區(qu)。如果(guo)試(shi)劑(ji)所(suo)用的儀器為(wei)常(chang)用儀器，三(san)個(ge)臨(lin)床(chuang)單位使用不(bu)同(tong)品牌或(huo)不(bu)同(tong)型號的儀(yi)器。在(zai)實(shi)施臨(lin)床(chuang)考核以前，組(zu)織(zhi)者(zhe)應(ying)對將(jiang)實(shi)施l臨(lin)床(chuang)考核單位的(de)檢(jian)測能(neng)力、所(suo)用儀器設(she)備、人(ren)員的熟練(lian)操(cao)作(zuo)能(neng)力進行評(ping)價，而(er)且這種評(ping)價應(ying)在(zai)盲法(fa)的(de)情況下(xia)進(jin)行。組(zu)織(zhi)者(zhe)應(ying)向(xiang)各考核單位提(ti)供(gong)同(tong)樣的(de)盲樣(yang)，如(ru)果評(ping)價的(de)試劑(ji)為定(ding)性(xing)試劑(ji)，盲樣(yang)應(ying)包括(kuo)評(ping)價試(shi)劑(ji)特異性(xing)、敏感(gan)性(xing)和性(xing)的樣(yang)品；如果(guo)評(ping)價試(shi)劑(ji)為定(ding)量(liang)試(shi)劑(ji)，除包括(kuo)以上(shang)樣品外，還應(ying)包括(kuo)線性(xing)和量(liang)值樣品。所(suo)有參與(yu)考核單位應(ying)將(jiang)檢(jian)測樣(yang)品的原(yuan)始(shi)數據提(ti)供(gong)給組(zu)織(zhi)者(zhe)，組(zu)織(zhi)者(zhe)對檢(jian)測結(jie)果(guo)進行分(fen)析，符合要(yao)求者方能參與(yu)臨床(chuang)考核。
二(er)、對照(zhao)試劑(ji)以及(ji)對照(zhao)方法(fa)的(de)選(xuan)擇(ze)
目前需要(yao)評(ping)價的(de)診斷(duan)試劑(ji)主要(yao)分(fen)為(wei)兩類(lei)，壹(yi)類(lei)是*新的(de)診斷(duan)試劑(ji)，臨床(chuang)上(shang)還沒(mei)有同(tong)類(lei)試劑(ji)，對這類(lei)試劑(ji)的評(ping)價相(xiang)對比(bi)較困(kun)難(nan)，其(qi)檢(jian)測的(de)準(zhun)確與(yu)否主要(yao)通(tong)過分(fen)析與(yu)臨床(chuang)診斷(duan)的符合情況而進(jin)行(xing)判斷(duan)，因(yin)此，對這類(lei)試劑(ji)進行(xing)I臨床(chuang)研究所(suo)用的對照(zhao)方法(fa)主(zhu)要(yao)是(shi)通(tong)過觀察(cha)臨(lin)床(chuang)癥(zheng)狀(zhuang)以及(ji)實驗(yan)室的(de)相(xiang)應(ying)檢(jian)測，根(gen)據(ju)疾病(bing)的診(zhen)斷(duan)標準(zhun)而進行診斷(duan)，分析試劑(ji)檢(jian)測結(jie)果(guo)與(yu)臨床(chuang)診斷(duan)的相(xiang)關(guan)性(xing)。對壹(yi)些(xie)結(jie)果(guo)不(bu)壹(yi)致(zhi)的患者(zhe)還可(ke)以對其進(jin)行追(zhui)蹤隨訪(fang)，了解其疾(ji)病的(de)進程(cheng)以(yi)及(ji)預(yu)後(hou)，比(bi)較zui終(zhong)的(de)相(xiang)關(guan)性(xing)。而且對某(mou)些被(bei)測物(wu)來(lai)講(jiang)，已有(you)相(xiang)關(guan)的診(zhen)斷(duan)試劑(ji)而沒(mei)有相(xiang)同(tong)的試(shi)劑(ji)，也(ye)可以(yi)用相(xiang)關(guan)的診(zhen)斷(duan)試劑(ji)進行(xing)分析和比(bi)較。另(ling)壹(yi)類(lei)試劑(ji)是已有(you)同(tong)類(lei)產品的試(shi)劑(ji)，或(huo)者(zhe)是(shi)*仿(fang)制已有(you)的(de)產品，或(huo)者(zhe)是(shi)對已上(shang)市產品進行(xing)了原(yuan)材料(liao)、工(gong)藝(yi)、反(fan)應(ying)程(cheng)序(xu)等(deng)改進，甚(shen)至(zhi)於改變了試劑(ji)的反(fan)應(ying)原(yuan)理，但(dan)被(bei)測物(wu)是(shi)相(xiang)同(tong)的。對這類(lei)試劑(ji)的評(ping)價，可(ke)采(cai)用已上(shang)市的(de)同(tong)類(lei)產品。但同(tong)類(lei)產品可能(neng)很多(duo)，如何選擇(ze)參比(bi)試劑(ji)以及(ji)選擇(ze)的(de)參比(bi)試劑(ji)是否(fou)合適，對zui終(zhong)的(de)研究結(jie)果(guo)具(ju)有(you)壹(yi)定(ding)的影(ying)響作用。所(suo)用的參比(bi)試劑(ji)應(ying)該是(shi)在醫(yi)療(liao)機(ji)構廣泛接(jie)受的(de)、產生結(jie)果(guo)zui為準(zhun)確的試劑(ji)，即其(qi)檢(jian)測結(jie)果(guo)與(yu)患者(zhe)的(de)實際(ji)狀(zhuang)態高度壹(yi)致(zhi)。但在(zai)實(shi)際(ji)選擇(ze)時應(ying)該註(zhu)意，並不(bu)是用的實驗(yan)室越(yue)多(duo)以及(ji)用的時間(jian)越(yue)長的試劑(ji)，其檢(jian)測結(jie)果(guo)zui為準(zhun)確。而且對原(yuan)材料(liao)、工(gong)藝(yi)、反(fan)應(ying)程(cheng)序(xu)等(deng)的(de)改進，或(huo)者(zhe)試(shi)劑(ji)的反(fan)應(ying)原(yuan)理改變的試劑(ji)，應(ying)該選(xuan)擇未(wei)改變的相(xiang)應(ying)試(shi)劑(ji)作為(wei)參比(bi)試劑(ji)，以便更(geng)好(hao)地(di)分(fen)析其改變以後的優勢或(huo)不(bu)足。例如(ru)，試(shi)劑(ji)的原(yuan)材料(liao)發(fa)生改變，由原(yuan)來(lai)的(de)裂(lie)解(jie)抗原(yuan)改為基因(yin)工(gong)程(cheng)抗(kang)原(yuan)，評(ping)價時也(ye)應(ying)該用非基因(yin)工(gong)程(cheng)原(yuan)料(liao)制(zhi)備的(de)試劑(ji)進行(xing)評(ping)價，以(yi)分析其差異。
三、樣品的選(xuan)擇
臨(lin)床(chuang)樣品是研(yan)究診斷(duan)試劑(ji)的重(zhong)要(yao)因(yin)素(su)，樣(yang)品選擇(ze)合適與(yu)否將(jiang)明顯影(ying)響試劑(ji)的評(ping)價結(jie)果(guo)，為客觀、科(ke)學地(di)評(ping)價試(shi)劑(ji)，在選(xuan)擇樣品時應(ying)考慮以(yi)下(xia)幾(ji)個方面(mian)。①臨(lin)床(chuang)評(ping)價樣(yang)品，至(zhi)少(shao)大部(bu)分評(ping)價用樣品應(ying)來(lai)自(zi)於自(zi)然人(ren)群(qun)，尚(shang)未(wei)用同(tong)類(lei)試劑(ji)進行(xing)篩查(zha)。因(yin)為(wei)任何試劑(ji)的檢(jian)測結(jie)果(guo)都(dou)可(ke)能有壹(yi)定(ding)的不(bu)正確(que)性(xing)，若(ruo)已用此試劑(ji)進行(xing)篩選，則其誤差已帶(dai)人(ren)樣品，會(hui)影(ying)響評(ping)價試(shi)劑(ji)的客觀性(xing)。例如(ru)，在(zai)評(ping)價某(mou)試劑(ji)的敏感(gan)性(xing)時，僅(jin)采(cai)用低(di)敏感(gan)性(xing)試劑(ji)所(suo)篩查(zha)出(chu)來(lai)的(de)陽性(xing)樣品；或(huo)者(zhe)在(zai)評(ping)價某(mou)試劑(ji)的特(te)異性(xing)時，僅(jin)選(xuan)擇高特異性(xing)試劑(ji)所(suo)篩查(zha)出(chu)來(lai)的(de)假(jia)陽性(xing)樣品等(deng)，都(dou)不(bu)能客觀地(di)反(fan)映試劑(ji)的技術指(zhi)標(biao)。②要(yao)根(gen)據(ju)試劑(ji)適應(ying)證的範圍(wei)選擇(ze)人(ren)群(qun)。例如(ru)，用於獻血(xue)員篩選的試(shi)劑(ji)，將(jiang)主(zhu)要(yao)選(xuan)擇(ze)獻血(xue)員人(ren)群(qun)；用於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)的試(shi)劑(ji)將(jiang)主(zhu)要(yao)選(xuan)擇(ze)臨床(chuang)患者(zhe)；用於健(jian)康普(pu)查(zha)的(de)將(jiang)選(xuan)擇(ze)健(jian)康人(ren)群(qun)等(deng)。但(dan)試(shi)劑(ji)的適應(ying)證往往針對多(duo)種人(ren)群(qun)，選擇(ze)人(ren)群(qun)時要(yao)盡(jin)可(ke)能地(di)覆(fu)蓋適應(ying)證範圍(wei)。③選擇(ze)不(bu)同(tong)地(di)區(qu)的樣(yang)品，我國地(di)域(yu)寬廣，是(shi)壹(yi)個(ge)多(duo)民(min)族(zu)的(de)國家(jia)，不(bu)同(tong)地(di)區(qu)被(bei)測物(wu)流(liu)行(xing)率(lv)不(bu)同(tong)，而且不(bu)同(tong)地(di)區(qu)被(bei)測物(wu)表(biao)型(xing)或(huo)含(han)量(liang)等(deng)也(ye)可能(neng)不(bu)同(tong)。對微生(sheng)物(wu)來(lai)講(jiang)，在(zai)這方面(mian)的(de)影(ying)響更(geng)為明顯，因(yin)為(wei)在(zai)我國不(bu)同(tong)地(di)區(qu)，不(bu)同(tong)微生(sheng)物(wu)的(de)基因(yin)型(xing)、基因(yin)亞型(xing)、血清(qing)型都(dou)有(you)可能不(bu)同(tong)，而且其差別可(ke)能(neng)影響試劑(ji)的檢(jian)測效(xiao)果(guo)。④不(bu)同(tong)疾病(bing)時期(qi)的樣品，不(bu)同(tong)時期(qi)被(bei)測物(wu)的(de)狀(zhuang)態是不(bu)同(tong)的，的(de)樣(yang)品應(ying)該是(shi)動態變化(hua)的(de)系(xi)列(lie)樣(yang)品，即從樣品中沒(mei)有被(bei)測物(wu)到(dao)出(chu)現被(bei)測物(wu)，再(zai)到(dao)量(liang)的(de)動態變化(hua)以(yi)及(ji)消失或(huo)長久持續下(xia)去(qu)。但在實際(ji)工(gong)作(zuo)中很難(nan)獲(huo)得這類(lei)樣品，為了(le)能反(fan)映試劑(ji)檢(jian)測疾(ji)病(bing)不(bu)同(tong)時期(qi)的被(bei)測物(wu)情況，選擇(ze)樣(yang)品時可(ke)選(xuan)擇處於疾(ji)病(bing)不(bu)同(tong)時期(qi)的不(bu)同(tong)患者(zhe)的(de)樣品，其樣(yang)品將(jiang)包括(kuo)強陽性(xing)、弱(ruo)陽性(xing)以及(ji)陰性(xing)等(deng)。⑤盡(jin)可(ke)能選擇(ze)新鮮(xian)樣(yang)品對試劑(ji)進行(xing)評(ping)價。若(ruo)樣品不(bu)是新鮮(xian)采(cai)集的話，應(ying)分(fen)裝(zhuang)保(bao)存(cun)，盡(jin)量(liang)保(bao)證不(bu)同(tong)試劑(ji)所(suo)檢(jian)測樣(yang)品的狀(zhuang)態是相(xiang)似的，避免再(zai)次凍融(rong)後(hou)用另(ling)壹(yi)試(shi)劑(ji)檢(jian)測。
選(xuan)擇(ze)合適的(de)樣(yang)品是客觀評(ping)價試(shi)劑(ji)質量(liang)的(de)重要(yao)因(yin)素(su)，不(bu)同(tong)的臨(lin)床(chuang)樣品對試劑(ji)的評(ping)價結(jie)果(guo)是不(bu)同(tong)的。臨(lin)床(chuang)樣品的選(xuan)擇應(ying)具(ju)有(you)壹(yi)定(ding)的代(dai)表(biao)性(xing)，否則(ze)會(hui)影(ying)響對試劑(ji)的質(zhi)量(liang)進(jin)行正確(que)評(ping)價。如(ru)在對註冊(ce)前的7家(jia)HIV-／2抗體快速檢(jian)測試(shi)劑(ji)進行(xing)臨床(chuang)評(ping)價時，共檢(jian)測了(le)三(san)類(lei)樣品，其中(zhong)，HIV-抗體強陽性(xing)樣品300份、健(jian)康獻血(xue)員樣品440份，以(yi)及(ji)高危(wei)人(ren)群(qun)樣品264份(李(li)秀(xiu)華(hua)等(deng)，2006a)。結(jie)果(guo)顯示(shi)，檢(jian)測300份HIV-抗(kang)體強陽性(xing)樣品時均(jun)為(wei)陽性(xing)，未發(fa)現漏檢(jian)現象(xiang)。檢(jian)測440份健(jian)康獻血(xue)員樣品時，大部(bu)分試(shi)劑(ji)均(jun)檢(jian)測為(wei)陰(yin)性(xing)，只有(you)個(ge)別(bie)試(shi)劑(ji)出現了(le)假(jia)陽性(xing)的現象(xiang)，試劑(ji)的特(te)異性(xing)為97．7％～00％。檢(jian)測高危(wei)人(ren)群(qun)樣品時，試(shi)劑(ji)的特(te)異性(xing)除個別試劑(ji)較低(di)(僅為(wei)59．5％)外(wai)，大部(bu)分試(shi)劑(ji)的特(te)異性(xing)在95％以(yi)上(shang)。但試(shi)劑(ji)的敏感(gan)性(xing)相(xiang)差明顯，為(wei)77．2％～95．％(表(biao)7．)。在264份高危(wei)人(ren)群(qun)樣品中，有(you)63份樣(yang)品為HIV抗(kang)體陽性(xing)。對陽性(xing)樣品的強弱(ruo)進(jin)行分析，並以(yi)S／CO值表示(shi)(表7．2)，大部(bu)分樣(yang)品的S／CO值為0．0～2．0，為(wei)中等(deng)強度，而且也(ye)有弱(ruo)陽性(xing)和強陽性(xing)樣品，具(ju)有(you)很好(hao)的(de)代表型，因(yin)此，反(fan)映出了(le)試(shi)劑(ji)靈敏度的差異。不(bu)同(tong)試劑(ji)的漏檢(jian)情況不(bu)同(tong)。例如(ru)，試(shi)劑(ji)和4漏檢(jian)的樣(yang)品均(jun)為(wei)弱(ruo)陽性(xing)樣品，說明是由於靈敏度原(yuan)因(yin)造成(cheng)的(de)漏檢(jian)；而其(qi)他(ta)試劑(ji)在不(bu)同(tong)強度的樣(yang)品中均(jun)存(cun)在(zai)漏檢(jian)，說明試劑(ji)不(bu)僅存(cun)在靈敏度偏(pian)低(di)的問(wen)題，而(er)且也(ye)可能(neng)存在試劑(ji)模式(shi)、HOOK效應(ying)等(deng)。以(yi)上(shang)結(jie)果(guo)顯示(shi)，不(bu)同(tong)樣品對試劑(ji)質量(liang)評(ping)價的(de)結(jie)果(guo)是不(bu)壹(yi)樣(yang)的，壹(yi)個(ge)好(hao)的(de)、有代表性(xing)的樣(yang)品庫能(neng)夠真(zhen)實(shi)、客觀地(di)反(fan)映試劑(ji)的技術指(zhi)標(biao)，而且也(ye)能通(tong)過對漏檢(jian)樣品特性(xing)的分(fen)析，了解(jie)試(shi)劑(ji)存在(zai)的缺陷，為(wei)試劑(ji)質量(liang)的(de)提高提供(gong)實驗(yan)數據(ju)。
由於樣(yang)品處理(li)不(bu)同(tong)，此過程(cheng)中(zhong)的(de)添(tian)加物(wu)和樣品的不(bu)同(tong)狀(zhuang)態等(deng)對試劑(ji)的檢(jian)測結(jie)果(guo)可能產生影響，而且試劑(ji)不(bu)僅適應(ying)於正(zheng)常(chang)人(ren)群(qun)，也(ye)適應(ying)於壹(yi)些(xie)特殊(shu)人(ren)群(qun)，尤其是(shi)某(mou)些特(te)殊疾(ji)病的(de)人(ren)群(qun)，因(yin)為(wei)其(qi)代(dai)謝(xie)異常(chang)，可(ke)能(neng)會(hui)產生影響被(bei)測物(wu)檢(jian)測結(jie)果(guo)的代謝(xie)產物(wu)。因(yin)此，在試(shi)劑(ji)的臨(lin)床(chuang)評(ping)價中(zhong)，應(ying)充(chong)分(fen)考慮以(yi)下(xia)特(te)殊樣品。①樣品的狀(zhuang)態、樣品儲存條(tiao)件(jian)、凍融(rong)次數(shu)和融(rong)血(xue)等(deng)。②樣(yang)品處理(li)過程(cheng)中(zhong)的(de)添(tian)加物(wu)，如(ru)不(bu)同(tong)抗凝(ning)劑(ji)是否(fou)影響試劑(ji)的檢(jian)測結(jie)果(guo)，尤其對PCR類(lei)試劑(ji)可能(neng)存在不(bu)同(tong)的影(ying)響。③異常(chang)代(dai)謝(xie)產物(wu)，如(ru)高免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白樣品、高血紅(hong)蛋(dan)白、高脂(zhi)樣(yang)品、高疸(dan)紅(hong)素(su)樣(yang)品、陽性(xing)樣品、免疫(yi)系統(tong)疾(ji)病和孕(yun)婦(fu)的(de)樣(yang)品等(deng)。④其(qi)他(ta)病(bing)毒(du)抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體陽性(xing)樣品，抗體陽性(xing)的樣(yang)品可能(neng)對間(jian)接(jie)法(fa)檢(jian)測抗(kang)體的試(shi)劑(ji)存在(zai)壹(yi)定(ding)的影(ying)響，而與(yu)被(bei)測物(wu)存(cun)在(zai)同(tong)源(yuan)性(xing)的抗(kang)原(yuan)可能(neng)影(ying)響抗原(yuan)試劑(ji)的檢(jian)測結(jie)果(guo)。如果有(you)些因(yin)素(su)影(ying)響試劑(ji)的檢(jian)測結(jie)果(guo)，則應(ying)該在(zai)試劑(ji)說明書中說(shuo)明，以便引起使用者的註意(yi)，正(zheng)確(que)地(di)解(jie)釋結(jie)果(guo)。
四、樣(yang)品數量(liang)的(de)確定
臨(lin)床(chuang)研究所(suo)用的樣品數量(liang)主(zhu)要(yao)是(shi)由被(bei)測物(wu)的(de)流(liu)行(xing)率(lv)所(suo)決定(ding)的(de)，應(ying)該根(gen)據(ju)統(tong)計學(xue)的基本原(yuan)理選(xuan)擇(ze)適當的樣本量(liang)。圖(tu)7．對檢(jian)測不(bu)同(tong)樣本數量(liang)所(suo)獲得的檢(jian)測值與(yu)預(yu)期(qi)值的關(guan)系進(jin)行(xing)了(le)分(fen)析。從表中(zhong)也(ye)可以(yi)看到(dao)，樣(yang)本量(liang)過小(xiao)，所(suo)得到(dao)的(de)指(zhi)標不(bu)穩定(ding)，用以推斷(duan)總(zong)體的精(jing)密度和準(zhun)確度差，檢(jian)驗(yan)的功效低(di)，應(ying)有(you)的(de)差別不(bu)能顯示(shi)出(chu)來(lai)，難(nan)以(yi)獲得正確的研(yan)究結(jie)果(guo)，結(jie)論(lun)也(ye)缺乏充(chong)分的(de)依據(ju)。樣本量(liang)越(yue)大，參數的估計越(yue)，統(tong)計的(de)結(jie)果(guo)越(yue)有(you)效，越(yue)能(neng)反(fan)映試劑(ji)在實(shi)際檢(jian)測中(zhong)的(de)技術指(zhi)標(biao)，但也(ye)會(hui)增(zeng)加(jia)實(shi)際工作的(de)困(kun)難(nan)。
除了考慮統(tong)計因(yin)素(su)以(yi)外(wai)，試(shi)劑(ji)審批(pi)或(huo)評(ping)價部(bu)門(men)也(ye)往往對臨床(chuang)研究的診(zhen)斷(duan)試劑(ji)規定(ding)檢(jian)測樣(yang)本的zui低(di)數量(liang)。例如(ru)，我國規定(ding)三(san)類(lei)試劑(ji)檢(jian)測的(de)總(zong)樣本數至(zhi)少(shao)000例，用於血(xue)液(ye)篩(shai)查(zha)試(shi)劑(ji)檢(jian)測的(de)總(zong)樣本數至(zhi)少(shao)0 000例(體外診(zhen)斷(duan)試劑(ji)的技術指(zhi)導(dao)原(yuan)則，國家(jia)食品藥品監督(du)管(guan)理(li)局(ju))。但不(bu)同(tong)試劑(ji)以及(ji)同(tong)壹(yi)試(shi)劑(ji)不(bu)同(tong)適應(ying)證等(deng)，所(suo)需檢(jian)測的(de)樣(yang)本數可能(neng)不(bu)同(tong)，要(yao)在(zai)滿足法(fa)規(gui)要(yao)求的情況下(xia)，選(xuan)擇合適的(de)樣(yang)本數，以便得出準(zhun)確的結(jie)果(guo)。
美國FDA對HIV抗體快速檢(jian)測試(shi)劑(ji)臨床(chuang)研究也(ye)有樣(yang)本數量(liang)的(de)要(yao)求，而且zui近也(ye)做了(le)壹(yi)些(xie)調整。這裏所(suo)指的(de)快(kuai)速檢(jian)測試(shi)劑(ji)是檢(jian)測靜(jing)脈(mai)全(quan)血、手(shou)指全(quan)血、口腔液(ye)體以及(ji)血清(qing)和血漿(jiang)樣品的試(shi)劑(ji)，而且主要(yao)是(shi)用於對HIV流行(xing)情況不(bu)清(qing)楚人(ren)群(qun)的新鮮(xian)樣(yang)品進行(xing)的檢(jian)測。對試劑(ji)靈敏度進行(xing)評(ping)價時，原(yuan)來(lai)要(yao)求至(zhi)少(shao)檢(jian)測000例HIV感(gan)染者(zhe)樣(yang)品以及(ji)500例高危(wei)人(ren)群(qun)中的(de)陽性(xing)樣品。但現在(zai)FDA要(yao)求企(qi)業(ye)可以(yi)根(gen)據(ju)統(tong)計學(xue)的要(yao)求設計樣(yang)品的規(gui)模，但(dan)至(zhi)少(shao)檢(jian)測500份新鮮(xian)的(de)樣(yang)品，檢(jian)測近期(qi)陽轉(zhuan)患者(zhe)的(de)樣品，FDA強烈建議(yi)至(zhi)少(shao)檢(jian)測000份高危(wei)人(ren)群(qun)樣品分析其靈敏度。對特異性(xing)研究，FDA原(yuan)來(lai)要(yao)求至(zhi)少(shao)檢(jian)測6000例HIV低(di)危(wei)人(ren)群(qun)的新鮮(xian)樣(yang)品，現在(zai)要(yao)求企(qi)業(ye)可根(gen)據(ju)統(tong)計學(xue)的要(yao)求確定(ding)樣(yang)品數量(liang)，但(dan)高危(wei)人(ren)群(qun)和低(di)危(wei)人(ren)群(qun)的新鮮(xian)樣(yang)品至(zhi)少(shao)各(ge)有(you)500份，而(er)FDA強烈建議(yi)應(ying)各(ge)000份。要(yao)求該類(lei)試劑(ji)的特(te)異性(xing)和敏感(gan)性(xing)的95％可(ke)信限(xian)的下(xia)限(xian)至(zhi)少(shao)達(da)到(dao)98％。
歐洲對用於血(xue)液(ye)篩(shai)查(zha)的(de)HIV-／2抗體檢(jian)測試(shi)劑(ji)的臨(lin)床(chuang)研究要(yao)求是：在(zai)評(ping)價試(shi)劑(ji)敏感(gan)性(xing)時，至(zhi)少(shao)檢(jian)測400份HIV-抗(kang)體陽性(xing)和200份HIV-2抗(kang)體陽性(xing)的樣(yang)品，而且在HIV-l抗體陽性(xing)樣品中要(yao)至(zhi)少(shao)包括(kuo)40份非(fei)B亞型(xing)的樣(yang)品，每(mei)壹(yi)個(ge)亞型(xing)至(zhi)少(shao)有(you)3份樣(yang)品；要(yao)至(zhi)少(shao)檢(jian)測20份陽轉(zhuan)血清(qing)。在分(fen)析試劑(ji)特異性(xing)時，至(zhi)少(shao)檢(jian)測5000份未(wei)經(jing)篩(shai)選(xuan)的(de)獻血(xue)員樣品、200份住(zhu)院患者(zhe)的(de)樣品(非HIV感(gan)染者(zhe))，以(yi)及(ji)00份可(ke)能(neng)引起交叉反(fan)應(ying)的(de)樣(yang)品，如類(lei)風濕(shi)因(yin)子(zi)陽性(xing)樣品、其他(ta)病毒(du)抗體陽性(xing)樣品以及(ji)孕(yun)婦(fu)樣(yang)品等(deng)。
五(wu)、檢(jian)測程(cheng)序(xu)以(yi)及(ji)不(bu)壹(yi)致(zhi)樣品的分(fen)析
在評(ping)價試(shi)劑(ji)時為(wei)排(pai)除壹(yi)些(xie)幹擾(rao)因(yin)素(su)，參比(bi)試劑(ji)以及(ji)考核試劑(ji)應(ying)該在(zai)壹(yi)致(zhi)的條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行檢(jian)測。例如(ru)，在(zai)同(tong)壹(yi)實(shi)驗(yan)室由同(tong)壹(yi)實(shi)驗(yan)技術人(ren)員使用相(xiang)同(tong)的加(jia)樣(yang)儀(yi)器以(yi)及(ji)同(tong)樣的(de)處(chu)理(li)設施，甚(shen)至(zhi)於在(zai)同(tong)壹(yi)天對樣品進行(xing)平行(xing)檢(jian)測，所(suo)有操(cao)作(zuo)將(jiang)按(an)每(mei)壹(yi)種(zhong)試劑(ji)說明書嚴(yan)格進(jin)行，而(er)且實驗(yan)人(ren)員不(bu)知道(dao)樣(yang)品中被(bei)測物(wu)的(de)實(shi)際(ji)狀(zhuang)態，即盲法(fa)檢(jian)測。
結(jie)果(guo)不(bu)壹(yi)致(zhi)的樣(yang)品由同(tong)壹(yi)實(shi)驗(yan)人(ren)員按同(tong)樣的(de)方法(fa)進(jin)行(xing)檢(jian)測，避(bi)免(mian)由於技術操(cao)作(zuo)所(suo)產生的實(shi)驗(yan)錯誤(wu)。若(ruo)還不(bu)壹(yi)致(zhi)，則由不(bu)同(tong)的實(shi)驗(yan)人(ren)員或(huo)實(shi)驗(yan)室用同(tong)樣的(de)試(shi)劑(ji)以及(ji)實驗(yan)條(tiao)件(jian)進行(xing)檢(jian)測，但(dan)他(ta)們不(bu)知道(dao)以(yi)前的檢(jian)測結(jie)果(guo)。盡(jin)量(liang)避(bi)免技術人(ren)員或(huo)實(shi)驗(yan)室因(yin)素(su)產生的錯(cuo)誤。若(ruo)仍然不(bu)壹(yi)致(zhi)，則應(ying)用其他試劑(ji)進壹(yi)步核對，明確該樣(yang)品的狀(zhuang)態。