當前位置:首頁 > 技(ji)術(shu)文(wen)章(zhang) > 細胞適應(ying)無(wu)血清(qing)培養(yang)基(ji)過程的(de)註意(yi)事項研(yan)究
在細胞適應(ying)無(wu)血清(qing)培養(yang)基(ji)過程中,不(bu)要(yao)讓(rang)細(xi)胞生(sheng)長過度。這(zhe)將增(zeng)加(jia)選擇亞(ya)群的可能(neng)性。需要(yao)註意(yi),與有血(xue)清(qing)培養(yang)基(ji)相比(bi),大(da)部分SFM包含非(fei)常(chang)少的(de)蛋(dan)白質(zhi),因(yin)而(er)更(geng)易(yi)於受外(wai)界(jie)因(yin)素的影(ying)響(xiang)。
細(xi)胞培養(yang)適應(ying)替代血清(qing):培養(yang)基(ji)許(xu)多細(xi)胞利用連續適應(ying)方法(fa)能(neng)很(hen)好(hao)的適應(ying),用包含FBS的(de)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)和包含(han)有替代血清(qing)的培(pei)養(yang)基(ji)∶(v∶v)的混合(he)培養(yang)基(ji)培養(yang)細(xi)胞。通(tong)過下列(lie)的(de)混合(he)培養(yang)基(ji)的方式,連續幾(ji)代減(jian)少當前培養(yang)基(ji)的量(liang):∶2,∶4,∶6和00%替代培養(yang)基(ji)。每次(ci)適應(ying)改變(bian)血清(qing)比(bi)例(li)時(shi),傳代細胞2到(dao)3次(ci)。
培(pei)養(yang)可(ke)以直接(jie)從FBS轉(zhuan)換(huan)到(dao)替代血清(qing)。壹開始就(jiu)使用相同(tong)於FBS的濃(nong)度的(de)替代物或(huo)血(xue)清(qing),生(sheng)長的延(yan)遲可能(neng)會發生(sheng),4允(yun)許(xu)進(jin)行2到(dao)3次(ci)的(de)傳代,使生(sheng)長率恢復到(dao)以前的水(shui)平(ping)。
特別需(xu)要(yao)強調的(de)是(shi):培(pei)養(yang)基(ji)配制(zhi)無(wu)血清(qing)培養(yang)液必須使用高質量(liang)的水(shui),如石英玻(bo)璃蒸(zheng)餾(liu)器經三次(ci)蒸(zheng)餾或(huo)超純(chun)水(shui)凈(jing)化裝(zhuang)置制(zhi)備的(de)水(shui)。因(yin)為無(wu)血清(qing)培養(yang)基(ji)缺乏(fa)了血(xue)清(qing)中天然(ran)成(cheng)分中和毒素、保護(hu)細胞的大(da)分子,既(ji)便水(shui)中的有毒物(wu)質(zhi)含量(liang)甚微(wei),也可(ke)能(neng)對(dui)細(xi)胞產生(sheng)致死性(xing)損(sun)害。這是(shi)無(wu)血清(qing)培養(yang)能(neng)否(fou)成功的關(guan)鍵因(yin)素之(zhi)壹。
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