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          向培養基細(xi)胞裏(li)面(mian)加入(ru)生(sheng)長(chang)因子的(de)方(fang)法(fa)討(tao)論

          更新(xin)時間:2014-08-19 點擊量(liang):5102

          向培養基細(xi)胞裏(li)面(mian)加入(ru)生(sheng)長(chang)因子的(de)方(fang)法(fa)討(tao)論

            生(sheng)長(chang)因子絕(jue)大(da)多(duo)數哺乳(ru)類(lei)胚胎神(shen)經元(yuan)有(you)嚴(yan)格的(de)營(ying)養要(yao)求(qiu),若(ruo)不能提供適宜的(de)生(sheng)長(chang)因子或合適(shi)的(de)因(yin)子組分,將會(hui)使絕(jue)大(da)多(duo)數神(shen)經元(yuan)在(zai)體外培養的(de)數天中死亡(wang)。解決(jue)這(zhe)壹(yi)問題(ti)有(you)兩(liang)條(tiao)思路,壹(yi)是讓培養基細(xi)胞提供自己的(de)營(ying)養因子,二是在培養基中加(jia)入(ru)純的(de)生(sheng)長(chang)因子。如果細(xi)胞混(hun)合物能在高密度(du)時生(sheng)長(chang),所(suo)需的(de)生(sheng)長(chang)因子便會(hui)積(ji)累(lei)到可觀(guan)的(de)數值(zhi),尤(you)其當培養基很少(shao)變化時。若某(mou)種(zhong)細(xi)胞混(hun)合物生(sheng)長(chang)時有很少(shao)的(de)營(ying)養需求(qiu),可保(bao)持培養基在(zai)壹(yi)段時間裏(li)不(bu)作(zuo)任何(he)變動,以使營養(生(sheng)長(chang))因子積累(lei),而(er)zui後促(cu)使所(suo)需要(yao)的(de)細(xi)胞類型(xing)能夠生(sheng)長(chang)。但是,這(zhe)種對營(ying)養(生(sheng)長(chang))因子自身倚賴性亦(yi)有弊(bi)端(duan),因為(wei)通常在(zai)混(hun)合細胞群(qun)體(ti)中細(xi)胞很難有(you)同(tong)比(bi)例增(zeng)殖(zhi),某(mou)些(xie)細(xi)胞會(hui)因(yin)生(sheng)長(chang)條(tiao)件的(de)貧(pin)乏而受(shou)限(xian)制。另(ling)外(wai),這(zhe)種方(fang)法(fa)只(zhi)能進行(xing)相當(dang)高密度(du)的(de)細(xi)胞培養。因為(wei)培養基的(de)條(tiao)件在(zai)細胞的(de)較(jiao)低密(mi)度時變的(de)不(bu)夠有效。不(bu)過(guo)某(mou)些(xie)時候純化(hua)神(shen)經元(yuan)群(qun)體(ti)的(de)低(di)密(mi)度(du)培養可用(yong)條(tiao)件培養基(經過(guo)了(le)高密度培養)進行(xing),或在(zai)膠質上(shang)生(sheng)長(chang)的(de)神(shen)經元(yuan)所(suo)用(yong)過(guo)的(de)培養基來(lai)支(zhi)持。

            滿(man)足(zu)神(shen)經元(yuan)營(ying)養需求(qiu)的(de)第(di)二條(tiao)途徑是向(xiang)培養基中加(jia)入(ru)生(sheng)長(chang)因子。通常用(yong)於(yu)組(zu)培的(de)通用(yong)適(shi)宜因子是神(shen)經生(sheng)長(chang)因子NGF。不過(guo),只(zhi)有少(shao)數對這(zhe)種蛋(dan)白(bai)質有反應的(de)細(xi)胞類型(xing)的(de)細(xi)胞才能生(sheng)長(chang)。

          含(han)225ml LB肉(rou)湯均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)李斯特氏(shi)菌(jun)制樣和(he)前(qian)增(zeng)菌(jun)培養(GB 標(biao)準(zhun))
          LB Broth
          萘啶酮酸 5.0mg/支(zhi)*5 每支(zhi)添加(jia)於(yu)225ml HBJ005中制(zhi)成(cheng)LB肉(rou)湯
          Nalidixic Acid
          吖啶黃(huang)素 3.0mg/支(zhi)*5 培養基每(mei)支(zhi)添加(jia)於(yu)225ml HBJ005中制(zhi)成(cheng)LB肉(rou)湯
          Acridine Flavin
          含(han)225ml FB增(zeng)菌(jun)液(ye)均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)李氏(shi)菌(jun)前增(zeng)菌(jun)培養(SN 標(biao)準(zhun))
          FB Broth
          FB(Half-Fraser)添加劑(A、B) 2ml/支(zhi)*40 每支(zhi)添加(jia)到225ml HBJ006中
          FB additive(A、B)
          含(han)225ml GN增(zeng)菌(jun)液(ye)均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)誌(zhi)賀氏(shi)菌(jun)前增(zeng)菌(jun)培養
          GN Enrichment Broth
          含(han)00ml GN增(zeng)菌(jun)液(ye)均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)誌(zhi)賀氏(shi)菌(jun)前增(zeng)菌(jun)培養
          GN Enrichment Broth
          含(han)225ml誌(zhi)賀氏(shi)菌(jun)増菌(jun)肉(rou)湯均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)誌(zhi)賀氏(shi)菌(jun)前增(zeng)菌(jun)培養
          Shigella Enrichment Broth
          新生(sheng)黴(mei)素 ml/支(zhi)*5 每支(zhi)添加(jia)於(yu)225ml HBJ8663中
          Novobiocin
          培養基含(han)225ml 7.5%氯化(hua)鈉肉(rou)湯均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)金(jin)葡(pu)菌(jun)前增(zeng)菌(jun)培養
          7.5% NaCl Broth
          含(han)50ml 7.5%氯化(hua)鈉肉(rou)湯均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)金(jin)葡(pu)菌(jun)增(zeng)菌(jun)培養
          7.5% NaCl Broth
          含(han)225ml 0%氯化(hua)鈉胰酪腖大(da)豆(dou)肉(rou)湯均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)金(jin)葡(pu)菌(jun)前增(zeng)菌(jun)培養
          0% NaCl Trypticase Soy Broth
          含(han)225ml布氏(shi)肉(rou)湯均質袋 0個(ge)/包 用(yong)於(yu)空(kong)腸(chang)彎(wan)曲菌(jun)的(de)前(qian)增(zeng)菌(jun)
          Brucella Broth

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