當(dang)前位(wei)置:首(shou)頁(ye) > 技術文(wen)章(zhang) > ELISA研(yan)究組蛋(dan)白修飾(shi)和(he)甲(jia)基化的(de)新(xin)技術
在這兩(liang)項(xiang)ELISA試劑(ji)盒(he)研(yan)究(jiu)中,澳大利(li)亞(ya)悉(xi)尼(ni)嘉(jia)萬(wan)研究(jiu)所(Garvan Institute)的Sue Clark及其同(tong)事(shi)以(yi)及荷(he)蘭(lan)內(nei)梅亨大學(Radboud University)的Hendrik Stunnenberg及其同(tong)事(shi)對染(ran)色質(zhi)免(mian)疫沈澱且(qie)經(jing)過(guo)亞硫(liu)酸(suan)氫鹽處理(li)的(de)DNA進行測序。利(li)用(yong)相(xiang)同(tong)的(de)DNA來(lai)評估(gu)胞嘧啶(ding)和(he)組蛋(dan)白標記(ji),從(cong)而(er)克(ke)服(fu)了(le)不(bu)同(tong)批(pi)次細胞之(zhi)間(jian)的(de)異(yi)質(zhi)性問(wen)題,並能對標(biao)記(ji)之(zhi)間(jian)的(de)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)作(zuo)出更(geng)直接(jie)的(de)評估(gu)。通過(guo)ChIP來(lai)靶(ba)定(ding)基因組(zu)的特定(ding)區域(yu),也(ye)能避免(mian)全(quan)基因組(zu)亞硫酸氫鹽測序帶來(lai)的(de)高額(e)費用(yong)。
為了(le)讓(rang)這種(zhong)方法(fa)行之(zhi)有效(xiao),研究小(xiao)組(zu)需(xu)要優化他(ta)們的亞(ya)硫(liu)酸氫鹽處理(li)步(bu)驟,以(yi)便(bian)接受(shou)免(mian)疫沈澱所產生(sheng)的(de)少(shao)量DNA。Clark談(tan)道(dao):“主(zhu)要的(de)改進是讓(rang)亞硫(liu)酸(suan)氫鹽處理(li)沒(mei)那麽(me)劇烈,並能處理(li)75到(dao)00 ng DNA。"他(ta)們的方法(fa)很相(xiang)似,並使(shi)得(de)幾乎(hu)00%的(de)未修(xiu)飾胞嘧啶(ding)發(fa)生(sheng)轉(zhuan)化(hua)。
兩個小(xiao)組(zu)都(dou)利(li)用(yong)這種(zhong)技術研究(jiu)了(le)組(zu)蛋(dan)白H3第(di)27位(wei)賴氨(an)酸上(shang)*基化(H3K27me3)與(yu)DNA甲(jia)基化之(zhi)間(jian)的(de)串(chuan)擾(rao)(cross-talk)。過去(qu)的研究表明,這兩(liang)種(zhong)標記(ji)在CpG島(dao)上(shang)是互相(xiang)排(pai)斥(chi)的(de)。壹種理論(lun)假(jia)設(she),DNA甲(jia)基化是壹種(zhong)更(geng)為*的(de)標(biao)記(ji),它取(qu)代了(le)幹(gan)細(xi)胞分(fen)化(hua)期(qi)間(jian)的(de)H3K27me3。Stunnenberg小(xiao)組(zu)的研究結果(guo)證(zheng)實(shi)了(le)這種(zhong)對抗(kang),而(er)Clark小(xiao)組(zu)則(ze)認(ren)為DNA甲(jia)基化和(he)H3K27me3並不(bu)總(zong)是相(xiang)互(hu)排(pai)斥(chi),可以(yi)基因組(zu)區域(yu)依賴的(de)方式(shi)共(gong)存(cun)。他們采用(yong)了(le)不(bu)同(tong)的(de)細胞系(xi),這可能解釋(shi)了(le)他(ta)們的不(bu)同(tong)結果(guo)。
據Clark 介(jie)紹(shao),BisChiP-seq方法(fa)可與(yu)富(fu)集目標ELISA試劑(ji)盒(he)DNA的(de)任何方法(fa)共同(tong)使(shi)用(yong),且(qie)結果(guo)是鏈特(te)異的(de),提(ti)供了(le)等(deng)位(wei)基因的(de)分(fen)辨(bian)率(lv)。Clark下壹步(bu)考慮研(yan)究其他(ta)組(zu)蛋(dan)白標記(ji)及基因組(zu)結合(he)因子,以(yi)便(bian)了(le)解它們與(yu)DNA甲(jia)基化組(zu)的直接關(guan)系(xi)。
00300-20000 對照品(pin) 含量測定(ding) 50mg
0030-9990 阿司(si)咪(mi)唑(zuo) 對照品(pin) 含量測定(ding) 50mg
00302-20000 對照品(pin) 含量測定(ding) 50mg
00304-200502 對照品(pin) 含量測定(ding) 00mg
00305-200502 對照品(pin) 含量測定(ding) 00mg
00306-20020 枸櫞(yuan)酸氯(lv)己定(ding) 對照品(pin) 鑒(jian)別(bie) 50mg
00307-20020 對照品(pin) 含量測定(ding) 50mg
00309-20000 氫 對照品(pin) 含量測定(ding) 50mg
ELISA試劑(ji)盒(he)0030-20020 對照品(pin) 含量測定(ding) 50mg
003-20020 3,5-二氨(an)基-6-氯吡(bi)嗪(qin)-2-羧酸(suan)甲(jia)酯(zhi) 對照品(pin) 檢查(zha) 50mg
032-000 苯(ben)噻啶 對照品(pin) 檢查(zha) 50mg
0033-20030 對照品(pin) 檢查(zha) 50mg
0034-200402 對照品(pin) 含量測定(ding) 00mg
0035-20000 對照品(pin) 檢查(zha) 50mg
0036-200402 E-異(yi)構體 對照品(pin) 檢查(zha) 30mg
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