蘇木素(su)復染時(shi)間和(he)PBS 的(de)清(qing)洗方(fang)式的(de)選(xuan)擇

蘇(su)木素(su)復染時(shi)間的(de)把(ba)握(wo)？
 
.蘇木素(su)復染時(shi)間要看(kan)當時(shi)的室溫、溶液的(de)新(xin)舊(jiu)、目(mu)標抗(kang)原的定位(wei)等(deng)情況，壹般數(shu)秒-數(shu)分(fen)鐘(zhong)。不過這(zhe)個如果(guo)染色(se)不理想(xiang)可以補(bu)救的。即：染色(se)深則(ze)分(fen)化(hua)時間稍長(chang)些(xie)即可；染色(se)淺則再(zai)置於(yu)蘇木素(su)中(zhong)染色(se)即可。抗(kang)體
 
2.鹽(yan)酸(suan)酒(jiu)精是(shi)分(fen)化(hua)，氨(an)水是(shi)返(fan)蘭(lan)。作用不同。片子(zi)復染完(wan)後流(liu)水振洗(xi)，然(ran)後置於(yu)鹽(yan)酸(suan)酒(jiu)精中(zhong)數秒(miao)（動(dong)作壹(yi)定(ding)要快(kuai)）後(hou)拿出(chu)流(liu)水振洗(xi)，在放(fang)入(ru)氨(an)水中(zhong)返(fan)蘭(lan)即可。
 
3.如(ru)果(guo)分(fen)化(hua)的顏(yan)色(se)過淺，可以復(fu)置於(yu)蘇木素(su)中(zhong)染色(se)。
 
PBS 的清(qing)洗方(fang)式選(xuan)擇、次數和(he)時間的選(xuan)擇？
 
.單獨(du)沖(chong)洗(xi)，防(fang)止交(jiao)叉(cha)反應造(zao)成汙染。
 
臨(lin)床上(shang)每天檢測(ce)的病例很多(duo)，所用的抗(kang)體種(zhong)類(lei)及項目(mu)也多(duo)，如(ru)果(guo)在加(jia)入(ru)壹抗(kang)孵育完(wan)後，將(jiang)它(ta)們在壹(yi)個缸內(nei)洗，這(zhe)樣就會(hui)造(zao)成交叉(cha)汙染，影(ying)響zui後的(de)結(jie)果(guo)。正(zheng)確的(de)做(zuo)法是(shi)單獨(du)地進行沖(chong)洗(xi)，沖洗的(de) PBS 為(wei)壹次性，保(bao)證(zheng)切(qie)片沒有相(xiang)互交叉(cha)汙染的(de)機(ji)會(hui)。
 
2.溫柔沖(chong)洗，防(fang)止切(qie)片的(de)脫(tuo)落。
 
沖洗(xi)切(qie)片，取(qu)出(chu)切(qie)片，將(jiang) PBS 從(cong)上(shang)輕(qing)輕(qing)地沖(chong)洗(xi)，讓 PBS 自上(shang)而下(xia)流(liu)下(xia)來，不要拿(na)起(qi)切(qie)片將(jiang) PBS 對(dui)準切(qie)片沖(chong)洗，這(zhe)樣由(you)於(yu)沖出(chu)的 PBS 有壹(yi)定的沖擊力(li)，很容易(yi)使(shi)切(qie)片周(zhou)邊引起(qi)松(song)動(dong)，導(dao)致切(qie)片的(de)脫(tuo)落。
 
3.沖洗(xi)的(de)時(shi)間(jian)要足夠，才(cai)能*洗去結(jie)合的物(wu)質。
 
沖(chong)洗切(qie)片有人(ren)提(ti)出(chu)用微振蕩(dang)器(qi)振染，振下(xia)未(wei)結(jie)合的各種(zhong)物(wu)，使(shi)之(zhi)不產生背(bei)景，此種(zhong)做(zuo)法壹(yi)是(shi)浪(lang)費(fei)時(shi)間(jian)，二(er)是(shi)很容易(yi)導(dao)致切(qie)片的(de)脫(tuo)落。切(qie)片的(de)沖洗據實(shi)踐認(ren)為(wei)，用壹小燒杯柔和(he)地於(yu)切(qie)片上(shang)沖洗(xi)，就能*沖洗(xi)去未(wei)結(jie)合的物(wu)質，無(wu)需附(fu)加(jia)其(qi)它(ta)條(tiao)件，沖洗(xi)好(hao)於(yu)切(qie)片上(shang)再(zai)註(zhu)入(ru) PBS，持(chi)續 2 min 左右(you)就*足夠了。
 
4.PBS 的(de) pH 和(he)離(li)子(zi)強度(du)的使(shi)用和要求(qiu)。
 
劉彥仿(fang)指出(chu)：中(zhong)性及弱鹼(jian)性條(tiao)件（pH7-8）有利(li)於(yu)免疫復(fu)合物(wu)的形成，而酸(suan)性條(tiao)件則有利(li)於(yu)分(fen)解(jie)；低離(li)子(zi)強度(du)有利(li)於(yu)免疫復(fu)合物(wu)的形成，而高離(li)子(zi)強度(du)則有利(li)於(yu)分(fen)解(jie)。我們目前(qian)常用的 PBS 的(de) pH 在 7.4-7.6 ，濃度是(shi) 0.0 M，根據(ju)本(ben)室十(shi)幾(ji)年(nian)來的使(shi)用情況，認為(wei)該(gai)溶液價(jia)格(ge)便宜配(pei)制方(fang)面(mian)，使(shi)用效果(guo)好(hao)。
 
5.常(chang)用試(shi)劑的(de)配(pei)制和使(shi)用。
 
在免(mian)疫組(zu)織(zhi)化(hua)學(xue)的染色(se)過程(cheng)中(zhong)，用得zui多(duo)的(de)試(shi)劑就是(shi)緩(huan)沖(chong)液，因為(wei)切(qie)片在整(zheng)個染色(se)中(zhong)，抗(kang)體的加(jia)、換(huan)、切(qie)片的(de)沖洗，DAB 的配(pei)制都離(li)不開緩(huan)沖(chong)液。可見緩(huan)沖(chong)液在整(zheng)個染色(se)中(zhong)都起(qi)至關(guan)鍵的(de)作用，緩(huan)沖(chong)液的(de)過酸或偏堿(jian)，都將(jiang)影(ying)響染色(se)的結(jie)果(guo)。