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目(mu)前幾種常用(yong)免(mian)疫(yi)組(zu)化方法(fa)簡(jian)單介紹
)免(mian)疫(yi)熒(ying)光(guang)方法(fa)
是(shi)zui早建(jian)立(li)的(de)免(mian)疫(yi)組(zu)織(zhi)化學技術。它(ta)利(li)用(yong)抗原抗體(ti)特(te)異性(xing)結(jie)合的(de)原理,先將(jiang)已知抗體(ti)標上熒(ying)光(guang)素,以(yi)此作(zuo)為(wei)探(tan)針(zhen)檢(jian)查(zha)細胞或組織(zhi)內(nei)的(de)相應抗原,在熒(ying)光(guang)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察。當抗原抗體(ti)復合物中(zhong)的(de)熒(ying)光(guang)素受(shou)激(ji)發光(guang)的(de)照(zhao)射(she)後(hou)即(ji)會(hui)發出(chu)壹(yi)定波(bo)長(chang)的(de)熒(ying)光(guang),從而(er)可確定組織中(zhong)某(mou)種抗原的(de)定位(wei),進(jin)而還可(ke)進(jin)行(xing)定(ding)量分析(xi)。由於(yu)免(mian)疫(yi)熒(ying)光(guang)技術(shu)特(te)異性(xing)強、靈(ling)敏度(du)高、快速(su)簡(jian)便(bian),所(suo)以(yi)在臨床(chuang)病理診(zhen)斷、檢驗中(zhong)應用(yong)較(jiao)廣。
2)免(mian)疫(yi)酶標方法(fa)
免(mian)疫(yi)酶標方法(fa)是(shi)繼(ji)免(mian)疫(yi)熒(ying)光(guang)後(hou),於(yu) 60 年代(dai)發展起(qi)來(lai)的(de)技術。基(ji)本原理是先以(yi)酶標記的(de)抗體(ti)與(yu)組織(zhi)或細胞作(zuo)用(yong),然(ran)後(hou)加(jia)入(ru)酶的(de)底物,生(sheng)成有(you)色(se)的(de)不溶性(xing)產(chan)物或具(ju)有(you)壹(yi)定電(dian)子(zi)密(mi)度的(de)顆粒,通過光(guang)鏡或電鏡(jing),對細胞表(biao)面和(he)細胞內(nei)的(de)各(ge)種抗原成分進(jin)行(xing)定(ding)位(wei)研(yan)究。免(mian)疫(yi)酶標技(ji)術是(shi)目(mu)前zui常用(yong)的(de)技術。 本(ben)方法(fa)與(yu)免(mian)疫(yi)熒(ying)光(guang)技術(shu)相比的(de)主要優(you)點是:定位(wei)準(zhun)確,對比度好,染(ran)色(se)標本(ben)可(ke)保(bao)存,適(shi)合於(yu)光(guang)、電鏡(jing)研(yan)究等。 免(mian)疫(yi)酶標方法(fa)的(de)發展非(fei)常(chang)迅(xun)速(su),已經衍生(sheng)出(chu)了多種標記方法(fa),且(qie)隨著方法(fa)的(de)不斷改進(jin)和創新,其(qi)特(te)異性(xing)和(he)靈(ling)敏度(du)都在不斷提高,使(shi)用(yong)也(ye)越來(lai)越方便。目(mu)前在病(bing)理(li)診(zhen)斷中(zhong)廣為(wei)使(shi)用(yong)的(de)有(you) ABC 法(fa)、SP 三(san)步(bu)法(fa)、即(ji)用(yong)型(xing)二步(bu)法(fa)檢(jian)測(ce)系(xi)統(tong)等。
3)免(mian)疫(yi)膠(jiao)體(ti)金技術
免(mian)疫(yi)膠(jiao)體(ti)金技術是(shi)以(yi)膠體(ti)金這(zhe)樣(yang)壹(yi)種特(te)殊的(de)金屬顆粒作(zuo)為(wei)標記物。膠體(ti)金是指(zhi)金的(de)水溶(rong)膠(jiao),它能(neng)迅(xun)速(su)而(er)穩(wen)定地(di)吸(xi)附蛋(dan)白(bai),對蛋白(bai)的(de)生(sheng)物學活性(xing)則(ze)沒有(you)明顯(xian)的(de)影響(xiang)。因(yin)此,用(yong)膠(jiao)體(ti)金標記壹(yi)抗、二抗或其(qi)他能(neng)特(te)異性(xing)結(jie)合免(mian)疫(yi)球蛋白(bai)的(de)分子(如(ru)葡(pu)萄球菌(jun) A 蛋白(bai))等作(zuo)為(wei)探(tan)針(zhen),就(jiu)能(neng)對組織或細胞內(nei)的(de)抗原進(jin)行(xing)定(ding)性、定位(wei),甚(shen)至(zhi)定(ding)量(liang)研(yan)究。由於(yu)膠體(ti)金有(you)不同(tong)大小的(de)顆粒,且(qie)膠(jiao)體(ti)金的(de)電子密(mi)度高,所(suo)以(yi)免(mian)疫(yi)膠(jiao)體(ti)金技術特(te)別適(shi)合於(yu)免(mian)疫(yi)電(dian)鏡(jing)的(de)單標記或多標(biao)記定(ding)位(wei)研(yan)究。由於(yu)膠體(ti)金本身呈(cheng)淡至(zhi)深(shen)紅色(se),因(yin)此也(ye)適(shi)合進(jin)行(xing)光(guang)鏡觀(guan)察。如應用(yong)銀(yin)加(jia)強的(de)免(mian)疫(yi)金(jin)銀(yin)法(fa)則(ze)更便(bian)於(yu)光(guang)鏡觀(guan)察。
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