免(mian)疫(yi)組(zu)化實驗操(cao)作(zuo)

. 抗(kang)體(ti)稀(xi)釋

應(ying)遵(zun)循“現用(yong)現配"的(de)原(yuan)則，對於PBS稀(xi)釋的(de)抗(kang)體(ti)壹定(ding)要當(dang)天使用。

2. 背景(jing)高(gao)

在(zai)抗體(ti)濃度、反(fan)應(ying)時間、反應(ying)溫(wen)度等(deng)合適的(de)條(tiao)件(jian)下，如(ru)果背景(jing)依舊(jiu)高(gao)，可(ke)采用(yong)含‰ Tween20的PBS洗，特(te)別是(shi)在(zai)顯色(se)之前(qian)要(yao)多(duo)洗。

3. 返(fan)藍

在(zai)蘇木(mu)素復染後(hou)，可(ke)用堿(jian)性(xing)緩(huan)沖(chong)液（如PBS）或(huo)Na2HPO4的飽(bao)和溶(rong)液返藍。

4. 顯色(se)

壹定(ding)要在(zai)顯微鏡下觀(guan)察，註意(yi)控制背景(jing)。

在(zai)整個(ge)操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中，切片千(qian)萬不(bu)能幹(gan)燥(zao)，否則會(hui)有(you)非特(te)異性染色(se)。抗體(ti)

5.拍(pai)照(zhao)

免(mian)疫(yi)組(zu)化切片壹般(ban)染(ran)色(se)不(bu)太(tai)深(shen)，因此拍(pai)攝(she)出(chu)的照(zhao)片(pian)顏(yan)色(se)較淺，就讓它淺。拍攝出(chu)的照(zhao)片(pian)中空白部位應(ying)盡(jin)可(ke)能呈現純(chun)白(bai)色(se)。測量(liang)其(qi)灰(hui)度應(ying)在(zai)250左(zuo)右。如果呈現淡(dan)藍色(se)，壹般(ban)是(shi)相(xiang)機(ji)自(zi)動(dong)白(bai)平衡在(zai)起作(zuo)用(yong)。另(ling)外(wai)壹個因素是(shi)顯微鏡燈光電(dian)壓不(bu)正確(que)。要使(shi)燈光本(ben)身(shen)的色(se)溫正(zheng)確(que)。既(ji)不(bu)偏黃，也(ye)不(bu)偏藍。