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PBS的(de)清(qing)洗方(fang)式選擇(ze)、次數(shu)和(he)時間(jian)的(de)選擇(ze)?
()單(dan)獨沖(chong)洗(xi),防止交叉反應造(zao)成汙(wu)染。
臨(lin)床上每天(tian)檢(jian)測(ce)的(de)病例很(hen)多,所用的(de)抗(kang)體(ti)種類及(ji)項目(mu)也(ye)多,如果在加(jia)入(ru)壹抗(kang)孵育完後(hou),將它們(men)在壹(yi)個缸(gang)內(nei)洗,這(zhe)樣就會(hui)造(zao)成交叉汙染,影(ying)響(xiang)zui後的(de)結果。正確的(de)做法(fa)是(shi)單獨地(di)進(jin)行沖(chong)洗,沖洗的(de)PBS為(wei)壹(yi)次性,保(bao)證(zheng)切(qie)片(pian)沒有相互(hu)交叉汙染的(de)機會(hui)。
(2)溫柔(rou)沖(chong)洗,防止切(qie)片(pian)的(de)脫落(luo)。
沖洗(xi)切片(pian),取(qu)出切片(pian),將PBS從上輕(qing)輕(qing)地沖洗(xi),讓PBS自上而(er)下流(liu)下來(lai),不(bu)要拿(na)起切(qie)片(pian)將PBS對準(zhun)切片(pian)沖(chong)洗,這樣由於(yu)沖(chong)出的(de)PBS有壹(yi)定的(de)沖擊(ji)力,很容(rong)易使(shi)切片(pian)周(zhou)邊引起松(song)動,導(dao)致切(qie)片(pian)的(de)脫落(luo)。
(3)沖洗(xi)的(de)時間(jian)要(yao)足(zu)夠(gou),才能(neng)*洗(xi)去結合的(de)物質(zhi)。
沖洗(xi)切片(pian)有(you)人提(ti)出用微振蕩器振染,振下未(wei)結合的(de)各種(zhong)物,使(shi)之不(bu)產生背(bei)景(jing),此種(zhong)做法(fa)壹(yi)是(shi)浪(lang)費時間(jian),二是(shi)很容(rong)易導(dao)致(zhi)切(qie)片(pian)的(de)脫落(luo)。切片(pian)的(de)沖洗(xi)據實(shi)踐認(ren)為(wei),用壹小(xiao)燒杯柔(rou)和(he)地於切片(pian)上沖(chong)洗(xi),就能*沖(chong)洗去未(wei)結合的(de)物質(zhi),無(wu)需(xu)附(fu)加其(qi)它(ta)條(tiao)件(jian),沖洗(xi)好(hao)於(yu)切片(pian)上再(zai)註(zhu)入PBS,持續(xu)2分鐘左右就*足(zu)夠(gou)了。抗(kang)體(ti)
(4)PBS的(de)PH和離子(zi)強度(du)的(de)使(shi)用和要(yao)求(qiu)。
中性及(ji)弱(ruo)鹼性條(tiao)件(jian)(PH7-8)有利(li)於(yu)免(mian)疫(yi)復(fu)合物的(de)形(xing)成,而(er)酸(suan)性條(tiao)件(jian)則有(you)利(li)於(yu)分解;低離子(zi)強度(du)有(you)利於(yu)免(mian)疫(yi)復(fu)合物的(de)形(xing)成,而(er)高離子(zi)強度(du)則(ze)有利(li)於分解。
(5)常用試(shi)劑(ji)的(de)配制和使(shi)用。
在免(mian)疫(yi)組(zu)織化學的(de)染色(se)過(guo)程(cheng)中,用得zui多的(de)試(shi)劑(ji)就是(shi)緩(huan)沖(chong)液(ye),因為(wei)切(qie)片(pian)在(zai)整(zheng)個染(ran)色(se)中,抗(kang)體(ti)的(de)加、換、切片(pian)的(de)沖洗(xi),DAB的(de)配制都離不(bu)開緩(huan)沖(chong)液(ye)。可見緩(huan)沖(chong)液(ye)在整(zheng)個染(ran)色(se)中都起至關鍵(jian)的(de)作用,緩(huan)沖(chong)液(ye)的(de)過酸(suan)或偏(pian)堿,都將影(ying)響(xiang)染色(se)的(de)結果。
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