免(mian)疫(yi)細(xi)胞(bao)化學(xue)粘(zhan)附(fu)劑(ji)

粘(zhan)附(fu)劑(ji)

在免(mian)疫(yi)細(xi)胞(bao)化學(xue)工作(zuo)中，由(you)於(yu)標本（如(ru)切(qie)片(pian)）的(de)脫落常(chang)影響工作(zuo)的質(zhi)量(liang)的(de)速度，故(gu)粘(zhan)附(fu)劑(ji)的(de)選(xuan)擇(ze)和使(shi)用就(jiu)顯(xian)得較為(wei)重要(yao)。

、鉻礬(fan)明膠液(ye)

試(shi)劑(ji)：鉻礬(fan)　　　　　　　     　0.5 g

  明膠（Gelatine）　　　     5 g

  　 H2O　　　　　　　　　 ~000 ml

方法(fa)：在000 ml的(de)燒(shao)杯或燒瓶(ping)中(zhong)，以500～800 ml H2O加溫(wen)溶(rong)解明膠，待(dai)其(qi)*溶(rong)解後，再加入(ru)鉻礬(fan)。註意溫(wen)度過(guo)高(gao)易使明(ming)膠燒(shao)糊(hu)，包被玻(bo)片(pian)時控(kong)制(zhi)水溫(wen)在70 ℃。如(ru)有(you)明(ming)顯(xian)殘渣，過濾(lv)後(hou)使(shi)用。

2、甲醛(quan)-明(ming)膠液(ye)

試(shi)劑(ji)：40%甲(jia)醛(quan)　　　　　　2.5 ml

    　明膠　　　　　　　　0.5 g

   蒸(zheng)餾(liu)水　　　　　　　至00 ml

配制方法(fa)：用(yong)少許蒸(zheng)餾(liu)水（約(yue)80 ml）加熱溶(rong)解明膠，待(dai)*溶(rong)化後，加入(ru)甲醛(quan)，zui後(hou)補充蒸(zheng)餾(liu)水至00 ml混勻即可。細(xi)胞(bao)

3、多聚賴(lai)氨(an)酸(suan)（Poly-L-Lycine,PLL）

試(shi)劑：多聚賴(lai)氧酸(suan)　　　　　 5 g

    　　蒸(zheng)餾(liu)水　　　　　　 ~000 ml

配制方法(fa)：稱(cheng)取PLL，溶(rong)於(yu)H2O，充分混合即可，此液(ye)濃(nong)度為(wei)0.5%，可適當稀(xi)釋配成(cheng)0.0～0.5%濃度。4 ℃保(bao)存(cun)，也(ye)可-20 ℃備用(yong)。PLL可反復(fu)冰凍，效(xiao)果無(wu)明(ming)顯(xian)影響，工作(zuo)液(ye)常(chang)再稀(xi)釋0～50倍(bei)。

4、Vectabond試(shi)劑　　該試(shi)劑是(shi)Vector公司新(xin)進推(tui)出(chu)的壹種(zhong)新(xin)型玻(bo)片(pian)粘(zhan)附(fu)劑(ji)。該(gai)試(shi)劑與壹(yi)般的粘(zhan)附(fu)劑(ji)不(bu)同，它是(shi)通過(guo)對(dui)玻(bo)璃表面起(qi)化學(xue)修飾(shi)作用(yong)，改變其(qi)表(biao)面的(de)化學(xue)物(wu)理(li)特(te)性，使組(zu)織(zhi)切(qie)片(pian)牢(lao)固(gu)地貼於(yu)玻(bo)璃片(pian)上(shang)，貼上(shang)後(hou)不(bu)易脫落，保(bao)留時間(jian)較久(jiu)。壹(yi)個試(shi)劑(ji)盒（7 ml）可配成(cheng)350 ml工作(zuo)液(ye)（用(yong)丙(bing)酮(tong)配）。處理(li)載(zai)玻(bo)片(pian)前（事先酸(suan)處理(li)），用(yong)染(ran)色(se)缸(gang)裝好(hao)各(ge)種(zhong)液(ye)體，按下列(lie)程序(xu)進行：

幹(gan)凈載(zai)玻(bo)片(pian)→丙(bing)酮(tong)5 min→Vectabond試(shi)劑(ji)工作(zuo)液(ye)（7 ml Vectabond+ 350 ml丙(bing)酮(tong)）：將(jiang)載(zai)玻(bo)片(pian)用(yong)鑷(nie)子夾(jia)住浸(jin)入(ru)Vectabond試劑(ji)～2次(ci)→dH2O，2×5 min→幹燥(zao)（37 ℃過夜(ye)）→用鋁(lv)箔(bo)包好，室溫(wen)存(cun)放備用(yong)。細(xi)胞(bao)

註意：避免(mian)汙染(ran)（塵(chen)埃(ai)等）；綜上(shang)述方法(fa)處理(li)的(de)載片(pian)壹(yi)般(ban)可存放半年(nian)以上。