冰凍幹(gan)燥技術

    冰凍幹(gan)燥就是(shi)使(shi)蛋(dan)白樣(yang)品(pin)液在(zai)預先(xian)冰凍的(de)狀態下(xia)，用抽(chou)真空的(de)方(fang)法，不(bu)經液(ye)態，直(zhi)接(jie)升(sheng)華(hua)，除(chu)去其(qi)中(zhong)所(suo)含水(shui)分(fen)，並使(shi)樣(yang)品(pin)蛋白成為幹燥制劑的(de)過(guo)程(cheng)。在(zai)免疫(yi)酶技術中(zhong)，所(suo)用的血清、酶等在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)容(rong)易變(bian)性腐(fu)敗(bai)，制成幹燥制劑後(hou)可長(chang)時(shi)間地在(zai)室溫或(huo)冰箱（4℃）內(nei)保存(cun)而(er)不(bu)失(shi)活，並且(qie)便於(yu)攜帶。ELISA試劑盒(he)

    之(zhi)所(suo)以(yi)要(yao)在(zai)冰凍是(shi)因為被幹燥樣品(pin)所(suo)含水(shui)分(fen)或(huo)溶(rong)劑(ji)由(you)於(yu)周(zhou)圍空氣壓力(li)的(de)減(jian)少而(er)增(zeng)加蒸(zheng)發速度，並且(qie)真空度愈高，溶(rong)液(ye)沸點(dian)越低，蒸(zheng)發越(yue)快。

冰凍真空幹(gan)燥(zao)與(yu)真空幹(gan)燥(zao)和(he)噴(pen)霧幹燥(zao)相比(bi)，在(zai)實驗(yan)中(zhong)應(ying)用得更(geng)多更(geng)普(pu)遍(bian)。

   ． 冰凍幹(gan)燥血清的程(cheng)序(xu)

 （） 先(xian)將(jiang)適(shi)量血清傾倒在(zai)適當(dang)大(da)小(xiao)的(de)培(pei)養皿中(zhong)（樣(yang)品(pin)液厚度在(zai)cm以(yi)下(xia)），在(zai)低溫—20℃以(yi)下(xia)）下(xia)冰凍成固態。

 （2） 在(zai)冰凍幹(gan)燥裝置中(zhong)，分(fen)別(bie)放(fang)置固體(ti)氫(qing)氧(yang)化鈉(na)和(he)五氧(yang)化二磷(lin)，真空幹(gan)燥(zao)器(qi)上(shang)端(duan)抽(chou)氣管通(tong)過(guo)五(wu)氧(yang)化二磷(lin)幹燥(zao)管與(yu)真空泵(beng)相連。ELISA試劑盒(he)

 （3） 將(jiang)冰凍血清塊(kuai)連(lian)同(tong)培(pei)養皿放(fang)進真空幹(gan)燥(zao)器(qi)內(nei)，立(li)即封閉幹燥器(qi)（事(shi)先(xian)在(zai)蓋(gai)沿塗(tu)上凡士林），開動(dong)油(you)泵(beng)，壹般(ban)經5－0h後(hou)，即可得冰凍幹(gan)燥制劑。

 （4） 冰凍幹(gan)燥完(wan)畢(bi)。首先逐漸打開幹(gan)燥器(qi)頂(ding)蓋(gai)玻(bo)璃閥(fa)，慢(man)慢(man)放(fang)氣，待整個(ge)系(xi)統中(zhong)壓力(li)上(shang)升(sheng)到(dao)大(da)氣壓後(hou)，取下(xia)樣品(pin)幹燥容器(qi)，zui後(hou)關(guan)閉真空油(you)泵(beng)。

   2.討(tao)論

 （）冰凍幹(gan)燥的效果(guo)，取決(jue)於(yu)真空泵(beng)的(de)真空度與(yu)口徑合適(shi)的管(guan)道。真空油(you)泵(beng)選用(yong)抽(chou)空容(rong)量大(da)的(de)，所(suo)有接管應(ying)力求(qiu)粗短。

 （2）樣(yang)品(pin)如果(guo)是(shi)溶(rong)液(ye)，則(ze)是水溶(rong)液(ye)，以(yi)避(bi)免有(you)機(ji)溶(rong)劑(ji)降(jiang)低冰點(dian)，進入(ru)泵內(nei)。濃度要(yao)適中(zhong)，不(bu)低於(yu).5%。

 （3）樣(yang)品(pin)如用(yong)緩(huan)沖液作(zuo)為溶(rong)劑(ji)，用(yong)有揮(hui)發性的，例如碳(tan)酸(suan)鹽或(huo)醋(cu)酸(suan)鹽緩(huan)沖液;若是非(fei)揮(hui)發性的，則要(yao)考(kao)慮pH和(he)鹽濃度對樣品(pin)的影(ying)響(xiang)。例(li)如用(yong)pH7.0磷(lin)酸鹽緩(huan)沖液，由(you)於(yu)冰凍幹(gan)燥時(shi)Na2鹽比(bi)Na鹽先結晶，pH降(jiang)至(zhi)約3.5，對樣(yang)品(pin)有害(hai)。在(zai)樣品(pin)液中(zhong)加入(ru)少量的(de)明膠、乳(ru)糖(tang)或(huo)葡(pu)萄糖(tang)等(deng)，有利(li)於保存(cun)活性。

 （4）樣品(pin)預凍(dong)時(shi)先(xian)放(fang)在(zai)普(pu)通(tong)冰箱冷(leng)至(zhi)0℃後(hou)，迅速移(yi)入(ru)壹20℃以(yi)下(xia)的冰箱驟(zhou)冷(leng)凍(dong)結。

 （5）在(zai)抽(chou)真空時(shi)，樣(yang)品(pin)萬壹融(rong)化，必(bi)須重(zhong)新(xin)預凍(dong)，並要(yao)檢查(zha)原(yuan)因(yin)。

 （6）抽(chou)真空約(yue)30min，如盛有預凍(dong)樣(yang)品(pin)的容器(qi)結霜，表(biao)明運轉(zhuan)良好(hao)。由(you)於(yu)樣(yang)品(pin)中(zhong)水(shui)分(fen)的(de)升華(hua)，溫度降低，樣(yang)品(pin)自然處於冰凍狀(zhuang)態，不必(bi)在(zai)幹燥(zao)器(qi)外(wai)邊(bian)采取冷(leng)卻(que)措(cuo)施(shi)。

 （7）幹燥制(zhi)劑裝(zhuang)於(yu)小(xiao)瓶(ping)，用(yong)蠟(la)封口，貯(zhu)於(yu)普(pu)通(tong)冰箱。ELISA試劑盒(he)