微(wei)生物(wu)菌(jun)種(zhong)冷(leng)凍保(bao)存法(fa)

    冷(leng)凍保(bao)存法(fa)：適(shi)用(yong)於(yu)抗凍力強的(de)微(wei)生物(wu)。這(zhe)些(xie)微(wei)生物(wu)可在其(qi)菌(jun)體(ti)細(xi)胞外遭受凍結(jie)的情(qing)況(kuang)下(xia)而不(bu)受損(sun)傷(shang)，而(er)對其(qi)它(ta)大(da)多(duo)數微(wei)生物(wu)而(er)言(yan)，無論(lun)在(zai)細(xi)胞外凍結(jie)還(hai)是(shi)在細(xi)胞內(nei)凍結(jie)，都會(hui)對菌體造(zao)成損(sun)傷(shang)，因(yin)此(ci)當采(cai)用(yong)這(zhe)種(zhong)保(bao)藏方(fang)法(fa)時(shi)，應(ying)註意以下(xia)幾點(dian)，

① 要(yao)選擇適(shi)於(yu)冷(leng)凍幹燥(zao)的(de)菌齡細(xi)胞；

② 要選擇適(shi)宜的培(pei)養(yang)基，因(yin)為某些微(wei)生物(wu)對(dui)冷(leng)凍的(de)抵(di)抗力，常隨(sui)培(pei)養(yang)基成分(fen)的變化而(er)顯(xian)示(shi)出巨(ju)大差異；

③ 要選(xuan)擇合(he)適(shi)的(de)菌(jun)液(ye)濃(nong)度(du)，通常菌液(ye)濃(nong)度(du)越(yue)高，生存(cun)率(lv)越(yue)高，保存(cun)期(qi)也越(yue)長(chang)；

④ 在菌(jun)液(ye)內(nei)不(bu)添(tian)加(jia)電(dian)解質(zhi)（如(ru)食鹽等）；

⑤ 可在菌(jun)液(ye)內(nei)添(tian)加(jia)甘油等保(bao)護劑(ji)，以(yi)防止在(zai)冷(leng)凍過(guo)程(cheng)中出現菌(jun)體(ti)大(da)量死(si)亡的(de)現象(xiang)。同樣，也可添(tian)加(jia)各種(zhong)糖(tang)類(lei)、去纖維(wei)血(xue)液(ye)和脫脂牛(niu)乳等具(ju)有(you)良好(hao)保(bao)護效果(guo)的(de)溶劑(ji)，但對有(you)些(xie)微(wei)生物(wu)而(er)言(yan)，不(bu)加保(bao)護劑(ji)時(shi)更(geng)有(you)效。

⑥ 原(yuan)則上應盡快(kuai)進(jin)行(xing)冷(leng)凍處(chu)理，但當加入(ru)保護(hu)劑(ji)時(shi)，可靜置壹段時(shi)間(jian)後(hou)再(zai)進(jin)行(xing)處(chu)理(li)。

⑦ 就動物(wu)細(xi)胞而言(yan)，應在(zai)－20℃範圍(wei)內(nei)以℃/min左(zuo)右的(de)速度緩(huan)慢(man)降溫，此(ci)後必(bi)須(xu)盡(jin)快(kuai)降(jiang)到貯藏溫度；而對絕(jue)大多數微(wei)生物(wu)而(er)言(yan)，則不(bu)必(bi)如(ru)此(ci)，如(ru)結(jie)構較(jiao)為復雜的原(yuan)蟲(chong)則可在－35℃範圍(wei)內(nei)進(jin)行(xing)緩(huan)慢(man)降溫，而噬菌體(ti)則必(bi)需(xu)采(cai)用(yong)上述(shu)的(de)二(er)階段(duan)法(fa)進(jin)行(xing)冷(leng)凍；

⑧ 若(ruo)進(jin)行(xing)保(bao)存(cun)，則貯藏溫度越(yue)低(di)越(yue)好(hao)；

⑨ 取用冷(leng)凍保(bao)存的菌種(zhong)時(shi)，應(ying)采(cai)取(qu)速(su)融(rong)措(cuo)施(shi)，即(ji)在(zai)35～40℃溫水中輕(qing)輕振(zhen)蕩(dang)使(shi)之(zhi)迅速(su)融解。而就厭(yan)氧(yang)菌來(lai)說，則應選擇(ze)靜(jing)置融化(hua)的措(cuo)施(shi)。當(dang)冷(leng)凍菌(jun)融化後，應盡量(liang)避(bi)免再(zai)次(ci)冷(leng)凍，否則菌體的(de)存(cun)活率將(jiang)顯著(zhu)下(xia)降。細(xi)胞