免(mian)疫測定中(zhong)的幹(gan)擾(rao)機(ji)制(zhi)

    HA 的(de)產(chan)生(sheng)機(ji)制(zhi)至今還(hai)不(bu)能(neng)闡明(ming)，目(mu)前(qian)所使用的(de)免 疫試劑(ji)抗(kang)體(ti)大(da)多(duo)源(yuan)於(yu)實(shi)驗動(dong)物(wu)，因此(ci)，體(ti)內(nei)含(han)HA 的(de)患(huan)者在做(zuo)血(xue)清(qing)免疫檢測時，HA 可(ke)與(yu)試劑(ji)抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)而導致(zhi)幹擾(rao)。HA 通常(chang)與(yu)試(shi)劑(ji)抗(kang)體(ti)的(de)Fc 區(qu)表位(wei)或者F(ab’)2 區(qu)域的(de)決(jue)定簇結(jie)合(he)。目(mu)前(qian)*的HA 在免疫測定中(zhong)的幹(gan)擾(rao)機(ji)制(zhi)主(zhu)要發生(sheng)在夾(jia)心(xin)免疫測定法(fa)和競爭免疫測定法(fa)中(zhong)。  

HA在夾(jia)心(xin)免疫測定法(fa)中(zhong)的幹(gan)擾(rao)機(ji)制(zhi)

    ELISA夾(jia)心(xin)法(fa)測定中(zhong)，HA與試(shi)劑(ji)抗(kang)體(ti)（捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)和標記抗(kang)體(ti)）的(de)結(jie)合(he)，可(ke)通(tong)過Fc-Fc 和Fab-Fab兩(liang)種(zhong)結合(he)方式幹(gan)擾(rao)測定。正(zheng)常情況下，在(zai)ELISA 夾(jia)心(xin)法(fa)中(zhong)，待測抗原(yuan)同(tong)時與(yu)捕獲抗體(ti)和標記抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)，形成(cheng)了(le)固(gu)相捕獲抗(kang)體(ti)-待(dai)測抗原(yuan)-標(biao)記(ji)抗體(ti)的(de)復(fu)合(he)物(wu)。在(zai)以Fc-Fc 的方式(shi)結(jie)合(he)的機(ji)制(zhi)中(zhong)，HA的Fc 端結(jie)合(he)到捕獲(huo)抗體(ti)的(de)Fc 段(duan)上(shang)，而(er)HA的Fab 區(qu)域則(ze)結合(he)到標記(ji)抗體(ti)的(de)Fab 區(qu)域上(shang)，導致假(jia)陽性結(jie)果。在(zai)以Fab-Fab 結(jie)合(he)方式的(de)機(ji)制(zhi)可(ke)引(yin)起假(jia)陽性或(huo)假(jia)陰(yin)性的(de)結果(guo)，如(ru)HA的(de)Fab區(qu)域通(tong)過分(fen)別(bie)結合(he)捕獲抗(kang)體(ti)的(de)Fab區(qu)域和標記抗(kang)體(ti)的(de)Fab 區(qu)域，阻擋(dang)捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)和標記抗(kang)體(ti)與(yu)待(dai)測抗原(yuan)的(de)結(jie)合(he)，從而導(dao)致假(jia)陰(yin)性；HA的(de)F(ab’)2 通過(guo)同(tong)時結(jie)合(he)捕獲抗(kang)體(ti)的(de)Fab區(qu)域和標記抗(kang)體(ti)的(de)Fab區(qu)域，形(xing)成(cheng)固(gu)相捕獲抗(kang)體(ti)-HA-標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物(wu)，如(ru)果(guo)標(biao)本(ben)中(zhong)無(wu)待測抗原(yuan)，HA就引起假(jia)陽性的(de)結果(guo)。

HA在競爭免疫測定法(fa)中(zhong)的幹(gan)擾(rao)機(ji)制(zhi)

    在(zai)免疫競爭法(fa)測定中(zhong)，HA幹擾(rao)也可(ke)造(zao)成(cheng)假(jia)陽性或(huo)假(jia)陰(yin)性。在(zai)正(zheng)常的競爭性免(mian)疫反應中(zhong)，待測抗原(yuan)與(yu)標(biao)記抗原(yuan)競爭的結合(he)到連接(jie)在(zai)載體(ti)上(shang)的(de)捕(bu)獲(huo)抗體(ti)，形(xing)成(cheng)正(zheng)常的反應復合(he)物(wu)。但是如(ru)果(guo)反應體(ti)系(xi)中(zhong)存在(zai)HA，測定結果(guo)將可(ke)能(neng)出(chu)現(xian)假(jia)陽性或(huo)假(jia)陰(yin)性的(de)現象。造成(cheng)假(jia)陰(yin)性結(jie)果的(de)機(ji)制(zhi)：HA通(tong)過同(tong)時結(jie)合(he)捕獲抗(kang)體(ti)和標記抗(kang)原(yuan)，形成(cheng)異(yi)常的反應復合(he)物(wu)，幹(gan)擾(rao)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)檢測抗原(yuan)，消(xiao)耗(hao)可(ke)結(jie)合(he)待測抗原(yuan)的(de)捕(bu)獲抗體(ti)，從(cong)而(er)導(dao)致(zhi)假(jia)陰(yin)性。造(zao)成(cheng)假(jia)陽性結(jie)果的(de)機(ji)制(zhi)：HA直(zhi)接(jie)結(jie)合(he)捕獲抗(kang)體(ti)與(yu)抗(kang)原(yuan)結(jie)合(he)的部位(wei)，形成(cheng)異(yi)常的復合(he)物(wu)，占據捕(bu)獲抗體(ti)結(jie)合(he)待測抗原(yuan)或(huo)標(biao)記抗原(yuan)的結合(he)空間，消耗(hao)可(ke)結(jie)合(he)待測抗原(yuan)或(huo)標(biao)記抗原(yuan)的捕獲抗體(ti)，導(dao)致(zhi)假(jia)陽性。

3-位(wei)點免(mian)疫檢測法(fa)中(zhong)的幹(gan)擾(rao)機(ji)制(zhi)

    該幹擾(rao)存在(zai)於(yu)肌(ji)鈣(gai)蛋(dan)白I的免疫檢測中(zhong)。所謂(wei)的(de)3-位點是試劑(ji)盒(he)中(zhong)含有(you)針對肌鈣蛋白(bai)I分(fen)子(zi)上3個(ge)不(bu)同(tong)抗(kang)原(yuan)決(jue)定簇的(de)3種(zhong)抗體(ti)，肌(ji)鈣(gai)蛋(dan)白(bai)I可(ke)以(yi)同(tong)時結(jie)合(he)2個捕獲(huo)抗體(ti)與(yu)個(ge)示蹤抗(kang)體(ti)或(huo)者(zhe)個(ge)捕(bu)獲抗體(ti)與(yu)2個(ge)示蹤抗(kang)體(ti)，使(shi)特(te)異(yi)性和靈敏度(du)大(da)大(da)提高(gao)，後(hou)者可(ke)使(shi)反應的靈敏度(du)進(jin)壹步增(zeng)高(gao)。由(you)於(yu)肌(ji)鈣(gai)蛋(dan)白I 3-位點免(mian)疫測定增加了壹種(zhong)捕獲抗(kang)體(ti)或(huo)者(zhe)標(biao)記(ji)抗體(ti)，這(zhe)也同(tong)時提高(gao)了(le)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)或(huo)者(zhe)標(biao)記(ji)抗體(ti)與(yu)HA結(jie)合(he)的機(ji)率，從(cong)而(er)導致(zhi)肌(ji)鈣蛋(dan)白(bai)I 3-位點免(mian)疫測定比(bi)肌鈣蛋白I 雙位(wei)點免(mian)疫測定更(geng)加容易(yi)受到HA的幹(gan)擾(rao)，結合(he)的部位(wei)與上述兩(liang)種(zhong)機(ji)制(zhi)相似。