無(wu)菌操(cao)作技(ji)術

無(wu)菌操(cao)作技(ji)術（細胞培養(yang)） 

. 實(shi)驗(yan)進(jin)行(xing)前，無(wu)菌室(shi)及無(wu)菌操(cao)作臺(tai)（laminar flow） 以(yi)紫外(wai)燈照(zhao)射30-60 分(fen)鐘(zhong)滅(mie)菌(jun)，以(yi)70 % ethanol 擦(ca)拭無(wu)菌操(cao)作臺(tai)面(mian)，並開(kai)啟(qi)無(wu)菌操(cao)作臺(tai)風(feng)扇(shan)運(yun)轉0 分(fen)鐘(zhong)後(hou)，才開(kai)始(shi)實驗操(cao)作。每次操(cao)作只處(chu)理壹(yi)株細(xi)胞株，且即使(shi)培養(yang)基(ji)相(xiang)同亦不共享培(pei)養(yang)基(ji)，以(yi)避免(mian)失(shi)誤混(hun)淆或細胞(bao)間(jian)汙(wu)染。實驗(yan)完(wan)畢(bi)後(hou)，將(jiang)實(shi)驗(yan)物(wu)品(pin)帶(dai)出(chu)工作臺(tai)，以(yi)70 % ethanol 擦(ca)拭無(wu)菌操(cao)作臺(tai)面(mian)。操作間(jian)隔應讓無(wu)菌操(cao)作臺(tai)運(yun)轉0分(fen)鐘(zhong)以(yi)上(shang)後(hou)，再進(jin)行(xing)下壹(yi)個(ge)細(xi)胞(bao)株(zhu)的操(cao)作。

2. 無(wu)菌操(cao)作工(gong)作區(qu)域應保(bao)持(chi)清(qing)潔及寬(kuan)敞(chang)，必(bi)要物(wu)品(pin)，例如試管架(jia)、吸管、吸取器或吸管盒等可(ke)以暫(zan)時放置，其(qi)它(ta)實驗用(yong)品(pin)用(yong)完(wan)即應(ying)移(yi)出(chu)，以利(li)於氣(qi)流(liu)之(zhi)流(liu)通(tong)。實(shi)驗(yan)用(yong)品(pin)以(yi)70 % ethanol 擦(ca)拭後(hou)才帶(dai)入(ru)無(wu)菌操(cao)作臺(tai)內(nei)。實驗(yan)操(cao)作應(ying)在(zai)臺面(mian)的無(wu)菌區(qu)域，勿在(zai)邊(bian)緣(yuan)的(de)非無(wu)菌區(qu)域操
作。

3. 小(xiao)心(xin)取用(yong)無(wu)菌的(de)實驗(yan)物(wu)品(pin)，避(bi)免(mian)造(zao)成(cheng)汙(wu)染。勿碰(peng)觸(chu)吸管尖頭(tou)部(bu)或容(rong)器(qi)瓶口(kou)，亦不(bu)要在(zai)打(da)開(kai)的(de)容(rong)器(qi)正上(shang)方(fang)操作實(shi)驗(yan)。容(rong)器(qi)打(da)開(kai)後(hou)，以手夾(jia)住(zhu)瓶(ping)蓋並(bing)握(wo)住(zhu)瓶(ping)身，傾(qing)斜(xie)約(yue)45° 角取用(yong)，盡(jin)量(liang)勿將(jiang)瓶(ping)蓋蓋口(kou)朝上(shang)放置桌(zhuo)面(mian)。

4. 工作人員(yuan)應(ying)註(zhu)意(yi)自身的(de)安(an)全(quan)，須(xu)穿戴實(shi)驗(yan)衣及手套後(hou)才進(jin)行(xing)實驗(yan)。對於來(lai)自人類或是病毒感(gan)染的細(xi)胞(bao)株應特別小(xiao)心(xin)操作，並(bing)選(xuan)擇適當等級的無(wu)菌操(cao)作臺(tai)（至(zhi)少Class II）。操(cao)作過(guo)程中(zhong)，應避(bi)免(mian)引起(qi)aerosol 的產(chan)生(sheng)，小(xiao)心(xin)毒性藥(yao)品(pin)，例如DMSO 及TPA 等，並(bing)避(bi)免(mian)尖(jian)銳(rui)針(zhen)頭(tou)的(de)傷害(hai)等。

5. 定期檢(jian)測(ce)下列(lie)項(xiang)目：

5.. CO2 鋼瓶(ping)的(de)CO2 壓力(li)

5.2. CO2 培(pei)養箱的(de)CO2 濃(nong)度(du)、溫(wen)度(du)、及(ji)水盤(pan)是(shi)否有(you)汙(wu)染（水盤(pan)的(de)水用(yong)無(wu)菌水，每周更(geng)換）。

5.3. 無(wu)菌操(cao)作臺(tai)內(nei)的airflow 壓力(li)，定期更換紫外(wai)線燈管及HEPA 過濾(lv)膜，預濾(lv)網（300小(xiao)時/預濾(lv)網，3000 小(xiao)時/HEPA）。

6. 水槽(cao)可(ke)添(tian)加(jia)消毒劑(ji)（Zephrin :750），定期更換水槽(cao)的水。細(xi)胞(bao)