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溫敏突變(bian)株在(zai)發酵工(gong)業(ye)中(zhong)的(de)應(ying)用
①溫敏突變(bian)株在(zai)發酵的(de)應(ying)用(yong) 發酵中增(zeng)加(jia)產(chan)量(liang)的關(guan)鍵(jian),決定(ding)於(yu)細胞膜的滲(shen)透(tou)性(xing)。選(xuan)育細胞膜結(jie)構(gou)或(huo)功(gong)能(neng)缺損的(de)溫敏突變(bian)株,可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)調節溫度來控(kong)制(zhi)細胞瞠的滲(shen)透(tou)性(xing),促使大(da)量(liang)外泄。
②溫敏突變(bian)株在(zai)發酵中(zhong)的(de)應(ying)用 以(yi)cl化合(he)物(wu)為*碳源(yuan)的微生(sheng)物(wu),合成(cheng)細胞組分(fen)是(shi)通(tong)過(guo)途(tu)徑(jing)來實(shi)現的(de)。可(ke)以(yi)看出(chu),要提高(gao)產(chan)量(liang)關(guan)鍵(jian)在(zai)於(yu)阻(zu)斷降解途(tu)徑(jing)。在過(guo)程中(zhong)曾(zeng)采用壹(yi)些抑制(zhi)劑,提高(gao)了(le)的轉(zhuan)化率(lv),即當產(chan)生(sheng)菌(jun)生長(chang)到(dao)壹(yi)定(ding)階段,加(jia)入(ru)8壹(yi)羥(qiang)基喹(kui)啉(lin)、2.2壹(yi)聯(lian)吡(bi)啶(ding)、CO 2+或(huo)Ni 2+等,以(yi)抑制(zhi)殘余(yu)的(de)降(jiang)解(jie)活(huo)力(li)。但這種外加(jia)藥物(wu)的方法(fa)用(yong)於(yu)工(gong)業(ye)並不(bu)是(shi)理(li)想方法(fa)。選(xuan)育降(jiang)解(jie)酶(mei)溫敏突變(bian)株,在(zai)許可溫度下,產(chan)生(sheng)菌(jun)具有(you)正(zheng)常(chang)的(de)降解(jie)活(huo)力(li),能(neng)利(li)用(yong)甲(jia)醇生長(chang)繁殖。當溫度上升(sheng)到(dao)非許可範(fan)圍時,產(chan)生(sheng)菌(jun)失去(qu)降(jiang)解(jie)作(zuo)用,因而能(neng)大(da)量(liang)分(fen)泌(mi)。
(3)溫敏突變(bian)株在(zai)微生物(wu)單細胞蛋白中(zhong)的(de)應(ying)用 單(dan)細胞蛋白的(de)菌(jun)種,除含(han)有(you)高(gao)蛋白質特性(xing)外,還要(yao)具有(you)兩(liang)個特點(dian):①生長(chang)迅毫(hao).底物(wu)利(li)用(yong)率(lv)高(gao);②菌(jun)體(ti)細胞壁易破碎、容(rong)易(yi)自(zi)溶,且(qie)細胞易於(yu)沈(chen)降,便(bian)於(yu)分(fen)離(li)純化.有(you)益於(yu)動(dong)物(wu)消(xiao)化利(li)用(yong)。
對(dui)於(yu)單(dan)細胞蛋白的(de)菌(jun)種,現已(yi)篩(shai)選(xuan)到(dao)壹(yi)些具有(you)特色(se)的溫度敏感突變(bian)株。例(li)如DNA復制(zhi)缺(que)損(sun)的TS突變(bian)株,在(zai)許可溫度下培養(yang)時菌(jun)體(ti)形態和(he)生(sheng)長(chang)都(dou)正(zheng)常(chang),但(dan)當溫度上升(sheng)到(dao)非許可溫度培養(yang)時,細胞形態開(kai)始(shi)發(fa)生變(bian)化(hua)。細胞伸(shen)長(chang),從母(mu)細胞上長(chang)出(chu)的芽(ya)也(ye)變(bian)長(chang),且不(bu)脫(tuo)落(luo).繼(ji)續(xu)培(pei)養(yang),細胞和芽(ya)凝聚成(cheng)叢(cong)狀(zhuang),易於(yu)凝集沈降(jiang)。又如易(yi)於(yu)自(zi)溶的TS突變(bian)株,在(zai)許可溫(溫)度下(xia)培(pei)養(yang)時,生長(chang)正常(chang)。當(dang)細胞生長(chang)繁殖達(da)到(dao)zui大(da)量(liang)時,調節溫度到(dao)非許可狀(zhuang)態,繼(ji)續(xu)培(pei)養(yang).菌(jun)體(ti)細胞發生自(zi)溶(rong),此(ci)時釋(shi)放到(dao)細胞外的蛋(dan)白(bai)質(zhi)含(han)量(liang)占細胞總蛋(dan)白(bai)質的30%,而親(qin)株僅2%。另(ling)外(wai),篩選(xuan)蛋(dan)氨(an)酸(suan)含(han)量(liang)高(gao)的TS突變(bian)株,能(neng)提高(gao)單細胞蛋白的(de)營(ying)養(yang)價值(zhi)。
TS突變(bian)株用(yong)於(yu)工(gong)業(ye)發(fa)酵(jiao)的(de)前景十分(fen)誘(you)人。例如篩(shai)選(xuan)三(san)羧酸(suan)循環(huan)缺(que)陷溫敏突變(bian)株,透(tou)過(guo)溫度控制阻斷三羧酸(suan)循環(huan),提(ti)高(gao)檸檬酸(suan)等有(you)機酸(suan)產(chan)量(liang)。
篩選(xuan)合(he)成(cheng)代謝酶(mei)缺(que)失(shi)的溫敏突變(bian)株對(dui)發(fa)酵(jiao)工(gong)業(ye)特別(bie)有(you)利(li)。這種溫敏突變(bian)株在(zai)許可溫度下培養(yang)時酶(mei)活(huo)力(li)正常(chang).不(bu)需(xu)要(yao)添加(jia)生長(chang)因子。當菌(jun)體(ti)生(sheng)長(chang)到(dao)壹(yi)定(ding)階段,將(jiang)溫度升(sheng)高(gao)到(dao)非許可條(tiao)件下(xia),此(ci)時合成(cheng)代謝酶(mei)活(huo)力(li)下降或(huo)*消(xiao)失,不(bu)能(neng)合成終產(chan)物(wu),使反饋(kui)調節被(bei)解除(chu),因此(ci)中(zhong)間產(chan)物(wu)能(neng)不(bu)斷地被(bei)合成(cheng)和(he)積累。細胞
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