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          如何用Elisay試劑(ji)盒檢測抗(kang)原(yuan)

          更新(xin)時(shi)間(jian):2016-06-23 點擊量:1700

          ELISA試劑(ji)盒是酶(mei)聯接免(mian)疫(yi)吸(xi)附(fu)劑(ji)測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的(de)簡(jian)稱。它是繼免疫(yi)熒(ying)光和放射(she)免(mian)疫(yi)技(ji)術(shu)之(zhi)後發展起來的(de)壹種免(mian)疫(yi)酶(mei)技(ji)術(shu)。此(ci)項技術自70年(nian)代(dai)初問(wen)世以(yi)來,發展十(shi)分迅(xun)速(su),目(mu)前(qian)已被廣(guang)泛用(yong)於(yu)生物學(xue)和醫學(xue)科(ke)學(xue)的(de)許(xu)多領(ling)域(yu)。


          ELISA試劑(ji)盒用於(yu)檢測未知(zhi)抗(kang)原(yuan)的(de)雙抗(kang)體夾心(xin)法(fa):
          . 包被:用(yong)0.05M PH9.牰(牰)碳酸鹽包被緩(huan)沖液將抗(kang)體稀(xi)釋(shi)至(zhi)蛋白(bai)質(zhi)含(han)量(liang)為~0μg/ml。在每個聚(ju)苯乙烯(xi)板(ban)的反(fan)應孔(kong)中加0.ml,4℃過(guo)夜。次日,棄去(qu)孔內(nei)溶液(ye),用(yong)洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘(zhong)。(簡(jian)稱洗滌,下(xia)同)。
          2. 加樣:加壹定稀(xi)釋(shi)的(de)待檢樣品0.ml於(yu)上(shang)述(shu)已(yi)包被之(zhi)反(fan)應孔(kong)中,置(zhi)37℃孵育(yu)小時(shi)。然後洗滌。(同時(shi)做(zuo)空白(bai)孔(kong),陰性對照孔(kong)及(ji)陽性(xing)對照(zhao)孔(kong))。
          3. 加酶(mei)標抗(kang)體:於各反應(ying)孔(kong)中,加入(ru)新(xin)鮮稀(xi)釋(shi)的(de)酶(mei)標抗(kang)體(經滴(di)定(ding)後的(de)稀(xi)釋(shi)度)0.ml。37℃孵育(yu)0.5~小時(shi),洗滌。
          4. 加底物液(ye)顯色:於(yu)各反應(ying)孔(kong)中加入(ru)臨(lin)時(shi)配(pei)制(zhi)的(de)TMB底(di)物溶(rong)液0.ml,37℃0~30分(fen)鐘(zhong)。
          5. 終(zhong)止反應:於(yu)各反應(ying)孔(kong)中加入(ru)2M硫(liu)酸0.05ml。
          6. ELISA試劑(ji)盒結(jie)果(guo)判定(ding):可(ke)於(yu)白(bai)色背(bei)景(jing)上(shang),直接用(yong)肉(rou)眼(yan)觀(guan)察結(jie)果(guo):反應(ying)孔內(nei)顏(yan)色越(yue)深,陽性(xing)程(cheng)度越強,陰性反應(ying)為(wei)無(wu)色或極淺(qian),依(yi)據(ju)所(suo)呈(cheng)顏(yan)色的(de)深淺(qian),以“+”、“-”號表(biao)示(shi)。也可(ke)測O·D值:在ELISA檢測儀上(shang),於(yu)450nm(若以(yi)ABTS顯色,則(ze)40nm)處(chu),以(yi)空白(bai)對(dui)照孔調零後測各孔O·D值,若大於規定(ding)的陰性(xing)對照(zhao)OD值的2.倍(bei),即為陽性(xing)。

          豬白介(jie)素2(IL-2)ELISA 試劑(ji)盒 96T/48T 試劑(ji)盒 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)
          豬白介(jie)素受(shou)體(ti)拮抗(kang)劑(ji)(ILRa)ELISA 試劑(ji)盒 96T/48T 試劑(ji)盒 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)
          豬白介(jie)素β (IL-β)ELISA 試劑(ji)盒 96T/48T 試劑(ji)盒 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)
          豬白介(jie)素α(IL-α)ELISA 試劑(ji)盒 96T/48T 試劑(ji)盒 組(zu)裝(zhuang)/原(yuan)裝(zhuang)
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