​ELISA試(shi)劑盒(he)使用(yong)原(yuan)理(li)

?ELISA試(shi)劑盒(he)使用(yong)原(yuan)理(li)
本(ben)試(shi)劑盒(he)應(ying)用(yong)雙(shuang)抗體(ti)夾心法測(ce)定標本(ben)中(zhong)大鼠細(xi)胞間(jian)粘(zhan)附分(fen)子 (ICAM-)水平。用(yong)純(chun)化的大鼠(shu)細胞間(jian)粘(zhan)附分(fen)子 (ICAM-)抗(kang)體(ti)包被(bei)微(wei)孔板(ban)，制(zhi)成(cheng)固相抗體(ti)，往包(bao)被(bei)單抗(kang)的微孔(kong)中依(yi)次(ci)加入細胞間(jian)粘(zhan)附分(fen)子 (ICAM-)，再(zai)與(yu) HRP 標(biao)記的細胞間(jian)粘(zhan)附分(fen)子 (ICAM-)抗(kang)體(ti)結合(he)，形(xing)成(cheng)抗(kang)體(ti)-抗(kang)原(yuan)-酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物(wu)，經(jing)過*洗滌(di)後(hou)加底物(wu) TMB 顯(xian)色(se)。TMB 在(zai) HRP 酶(mei)的催化(hua)下轉化成(cheng)藍色(se)，並在(zai)酸的作用(yong)下轉化成(cheng)zui終的黃色(se)。顏(yan)色(se)的深淺和(he)樣(yang)品(pin)中的細胞間(jian)粘(zhan)附分(fen)子 (ICAM-)呈正(zheng)相關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai) 450nm 波長下測(ce)定吸光(guang)度（OD 值(zhi)），通(tong)過標(biao)準曲線(xian)計(ji)算樣(yang)品(pin)中大(da)鼠細胞間(jian)粘(zhan)附分(fen)子 (ICAM-)濃(nong)度(du)。
?ELISA試(shi)劑盒(he)使用(yong)原(yuan)理(li)是抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體的固相化及(ji)抗原(yuan)或抗(kang)體的酶(mei)標(biao)記。結合(he)在(zai)固(gu)相載體(ti)表(biao)面(mian)的抗原(yuan)或抗(kang)體仍(reng)保持其(qi)免(mian)疫學活性，酶(mei)標(biao)記的抗原(yuan)或抗(kang)體既(ji)保留其(qi)免(mian)疫學活性，又保留酶(mei)的活性。在(zai)測(ce)定時，受檢(jian)標(biao)本(ben)（測(ce)定其中(zhong)的抗體(ti)或抗(kang)原(yuan)）與(yu)固相載體(ti)表(biao)面(mian)的抗原(yuan)或抗(kang)體起反應(ying)。用(yong)洗滌(di)的方法(fa)使固(gu)相載體(ti)上形成(cheng)的抗原(yuan)抗(kang)體(ti)復合(he)物(wu)與(yu)液(ye)體中的?ELISA試(shi)劑盒(he)使用(yong)原(yuan)理(li)其(qi)他物(wu)質(zhi)分(fen)開(kai)。再(zai)加入酶(mei)標(biao)記的抗原(yuan)或抗(kang)體，也(ye)通(tong)過反(fan)應(ying)而結合(he)在(zai)固(gu)相載體(ti)上。此(ci)時固(gu)相上的酶(mei)量與(yu)標本(ben)中受檢(jian)物(wu)質(zhi)的量呈壹(yi)定的比例。加入酶(mei)反(fan)應(ying)的底物(wu)後，底物(wu)被酶(mei)催(cui)化(hua)成(cheng)為(wei)有色(se)產(chan)物(wu)，產物(wu)的量與(yu)標本(ben)中受檢(jian)物(wu)質(zhi)的量直接相關，故可(ke)根據(ju)呈色(se)的深淺進(jin)行(xing)定性或定量分(fen)析。由(you)於(yu)酶(mei)的催化(hua)效率很高，間接地(di)放(fang)大了(le)免疫反應(ying)的結果，使(shi)測(ce)定方法(fa)達到(dao)很(hen)高的敏感(gan)度。