ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)各個(ge)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)的註(zhu)意要(yao)點(dian)

ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)各個(ge)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)的註(zhu)意要(yao)點(dian)
在(zai)使(shi)用(yong)前與室溫(wen)平(ping)衡，再進(jin)行測定。在(zai)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)壹般有兩(liang)次(ci)抗原(yuan)抗(kang)體(ti)反應，即(ji)加(jia)標(biao)本和(he)加酶(mei)結(jie)合物後(hou)。抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)反應的(de)完成需(xu)要(yao)有壹定的(de)溫(wen)度和(he)時間，這壹保溫(wen)過程(cheng)稱為(wei)溫(wen)育（incubation），有人(ren)稱之(zhi)為(wei)孵育，在ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)似(si)不恰當(dang)。
ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)屬固(gu)相免(mian)疫(yi)測定，抗(kang)原(yuan)、抗(kang)體(ti)的(de)結(jie)合只(zhi)在固(gu)相表面上發(fa)生(sheng)。以抗體(ti)包(bao)被的夾心法(fa)為例(li)，加(jia)入板孔中(zhong)的(de)標(biao)本(ben)，其(qi)中(zhong)的(de)抗(kang)原(yuan)並不是(shi)都(dou)有均(jun)等(deng)的和(he)固(gu)相抗結(jie)合的(de)機會，只(zhi)有zui貼(tie)近(jin)孔壁(bi)的(de)壹層溶(rong)液中(zhong)的(de)抗(kang)原(yuan)直(zhi)接(jie)與抗(kang)體(ti)接(jie)觸(chu)。
如果對試(shi)劑(ji)準備(bei)不太(tai)註(zhu)意，在實驗(yan)時將(jiang)試(shi)劑(ji)從(cong)冰箱中(zhong)拿(na)出(chu)來(lai)即(ji)用(yong)，而忽(hu)略了(le)這(zhe)種(zhong)做法有可(ke)能(neng)影(ying)響(xiang)後(hou)面(mian)溫(wen)育時間不夠(gou)的(de)問題影(ying)響(xiang)後(hou)面(mian)的操(cao)作(zuo)。測(ce)定(ding)中(zhong)試(shi)劑(ji)的(de)準備(bei)zui為關(guan)鍵的是(shi)，在實驗(yan)開始前，將試(shi)劑(ji)盒(he)先從冰箱中(zhong)拿(na)出(chu)來(lai)，在室溫(wen)下放(fang)置(zhi)20min以上後(hou)，以使試(shi)劑(ji)盒(he) 
2. 當(dang)混合蛋白溶(rong)液時(shi)應盡(jin)量輕(qing)緩(huan)，避(bi)免(mian)起泡。
3. 洗(xi)滌過程(cheng)非常(chang)重(zhong)要(yao)，不充(chong)分(fen)的洗(xi)滌易造(zao)成(cheng)假陽(yang)性(xing)。
4. 壹次加(jia)樣(yang)時間控(kong)制在5分(fen)鐘內，如標本數量(liang)多，使用(yong)排(pai)槍加樣(yang)。
5. 請(qing)每(mei)次測(ce)定的同(tong)時(shi)做標準曲(qu)線，做復孔(kong)。
6. 如標本中(zhong)待測(ce)物質(zhi)含量(liang)過高(gao)，請(qing)先(xian)稀(xi)釋後(hou)再測(ce)定(ding)。
7. 在配(pei)制標準品、檢測(ce)溶液工(gong)作(zuo)液時(shi)，請(qing)以相應的(de)稀(xi)釋液配(pei)制，ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)不能混淆。
8. 底物請(qing)避(bi)光(guang)保存(cun)。
9、控(kong)制好(hao)每(mei)壹步的(de)操(cao)作(zuo)時(shi)間。