ELISA試劑盒步(bu)驟操(cao)作嚴(yan)格控(kong)制(zhi)

ELISA試劑盒步(bu)驟操(cao)作嚴(yan)格控(kong)制(zhi)
 

    在(zai)ELISA試劑盒檢測(ce)實(shi)驗中，包被原(yuan)的(de)性(xing)質很(hen)重要，蛋白(bai)濃度(du)，是否降(jiang)解，這(zhe)關(guan)系(xi)到(dao)妳(ni)做(zuo)出的抗體(ti)可(ke)不可(ke)以被其(qi)識(shi)別(bie)，所(suo)以保(bao)留(liu)抗原(yuan)很(hen)重要，做(zuo)重組(zu)蛋白(bai)時，要在(zai)冰浴下緩慢融(rong)化(hua)就是(shi)這(zhe)個道(dao)理(li)。就是(shi)讓大量(liang)不相關(guan)的(de)蛋白(bai)質充(chong)填(tian)這(zhe)些曠(kuang)地空(kong)閑(xian)，從而(er)排(pai)斥ELISA試劑盒後的(de)步(bu)驟中幹(gan)擾物質的(de)再(zai)吸(xi)附。但有時因(yin)為(wei)試驗的(de)需要，包被原(yuan)的(de)特殊(shu)性(xing)也(ye)可(ke)能(neng)采(cai)用中性(xing)的緩(huan)沖溶(rong)液(ye)來(lai)包。

操(cao)作技巧(qiao)：

.加酶(mei)試劑後用吸(xi)水(shui)紙(zhi)在(zai)酶(mei)標(biao)板(ban)表面(mian)輕拭吸(xi)幹(gan)。

2.合(he)理(li)安(an)排(pai)檢測(ce)量(liang)，以免反應(ying)板(ban)過(guo)多(duo)造成洗板(ban)等(deng)待時間(jian)長。

3.吸(xi)取液(ye)體(ti)時，要用量(liang)程(cheng)和(he)需(xu)要量(liang)接近的(de)槍(qiang)去吸(xi)，減少誤(wu)差。

4.要盡(jin)量(liang)做(zuo)雙(shuang)孔實驗(yan)，這(zhe)樣才既能(neng)保(bao)證數據的(de)準確(que)性(xing)，ELISA試劑盒又能(neng)反映(ying)出試劑盒的精(jing)密度(du)。

5.樣品稀(xi)釋(shi)液(ye)應(ying)用加液(ye)器(qi)加註，並經常(chang)校(xiao)對(dui)其(qi)準(zhun)確(que)性(xing)。

6.為(wei)防止樣品(pin)蒸(zheng)發，試驗時將(jiang)反應(ying)板(ban)放於(yu)鋪(pu)有濕布(bu)的密閉盒內，酶標(biao)板(ban)加上(shang)蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜(mo)。

7.未(wei)使(shi)用完(wan)的(de)酶標(biao)板(ban)或(huo)者試劑，請(qing)於(yu)2-8℃保(bao)存。辣根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)標(biao)記(ji)抗人IgG工作液(ye)請(qing)依(yi)據所(suo)需的量(liang)配(pei)置(zhi)使(shi)用。請(qing)勿(wu)重復(fu)使用已稀(xi)釋(shi)過(guo)的辣根過(guo)氧化(hua)物酶(mei)標(biao)記(ji)抗人IgG工作液(ye)。

8.ELISA試劑盒實驗中，加樣(yang)後及時放人孵箱，標(biao)本較(jiao)多(duo)時，要分(fen)批操(cao)作。防止孵育時間(jian)人為(wei)延(yan)長，導(dao)致(zhi)非(fei)特異性(xing)結(jie)合(he)緊(jin)附(fu)於(yu)反(fan)應(ying)孔周圍，難以清洗*。

9.剩余(yu)樣品(pin)及廢棄物應(ying)經2℃高壓蒸(zheng)汽滅(mie)菌(jun)30分(fen)鐘，或(huo)用5.0g/L次(ci)氯酸鈉(na)等(deng)消毒劑處(chu)理(li)30分鐘後廢(fei)棄(qi)。

0.ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加(jia)滿(man)液(ye)體(ti)，防止孔口有遊離(li)酶不能(neng)洗凈。