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          人(ren)神(shen)經激肽BELISA 檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒內容(rong)及其(qi)配(pei)制

          更(geng)新時(shi)間(jian):2016-12-08 點擊量:1035

             人(ren)神(shen)經激肽B ELISA 檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒內容(rong)及其(qi)配(pei)制  

          elisa試(shi)劑盒,腫(zhong)瘤壞死(si)因子(zi)elisa試(shi)劑盒,人(ren)類白(bai)介抗(kang)原B27,細(xi)胞生長(chang)因子(zi)試(shi)劑盒,提供(gong)免(mian)費代測(ce)服務(wu),保證(zheng)實驗結(jie)果(guo)客觀真實性(xing)。我公(gong)司(si)對試(shi)劑盒質量(liang)00%保證(zheng),若存(cun)在質量(liang)問(wen)題,我們(men)無條(tiao)件包退(tui)換(huan) 試(shi)驗原理:    NK B試(shi)劑盒是固(gu)相夾(jia)心(xin)法酶聯免(mian)疫吸(xi)附實驗(ELISA).已(yi)知(zhi)NK B濃度的(de)標準品(pin)、未(wei)知(zhi)濃度的(de)樣(yang)品(pin)加入微(wei)孔(kong)酶(mei)標(biao)板(ban)內進行檢(jian)測(ce)。先(xian)將(jiang)NK B和標(biao)記(ji)的(de)抗體同時溫(wen)育。洗(xi)滌後(hou),加(jia)入親(qin)和素(su)標(biao)記(ji)過(guo)的(de)HRP。再(zai)經過(guo)溫育和洗(xi)滌(di),去(qu)除(chu)未(wei)結合(he)的(de)酶結合(he)物,然(ran)後(hou)加(jia)入底(di)物A、B,和酶(mei)結(jie)合(he)物同時作(zuo)用。產(chan)生顏(yan)色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深淺和樣(yang)品(pin)中(zhong)NK B的(de)濃度呈(cheng)比(bi)例(li)關系(xi)。  安全性(xing)避免直接接(jie)觸(chu)終(zhong)止液(ye)和底(di)物(wu)A、B。壹(yi)旦接(jie)觸(chu)到這些(xie)液(ye)體,請(qing)盡快用(yong)水(shui)沖洗(xi)。實驗中(zhong)不要(yao)吃喝、抽(chou)煙或(huo)使用化(hua)妝品(pin)。不要(yao)用嘴吸(xi)取(qu)試(shi)劑盒裏的(de)任何成份。操(cao)作(zuo)註(zhu)意事項(xiang)試(shi)劑應(ying)按標簽說明(ming)書(shu)儲存(cun),使用前(qian)恢復(fu)到室(shi)溫(wen)。稀(xi)稀過(guo)後(hou)的(de)標準品(pin)應丟(diu)棄,不可保存(cun)。實驗中(zhong)不用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應立(li)即放(fang)回包裝(zhuang)袋(dai)中(zhong),密封(feng)保存(cun),以免變(bian)質(zhi)。不(bu)用的(de)其它試(shi)劑應(ying)包裝(zhuang)好或(huo)蓋(gai)好。不(bu)同批號的(de)試(shi)劑不(bu)要(yao)混用(yong)。保質(zhi)前(qian)使用。使用壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou)以免交叉(cha)汙(wu)染,吸(xi)取(qu)終(zhong)止液(ye)和底(di)物(wu)A、B液(ye)時,避免使用帶金屬部分(fen)的(de)加樣(yang)器。使用幹(gan)凈的(de)塑料容(rong)器配(pei)置洗(xi)滌液(ye)。使用前(qian)充分(fen)混(hun)勻試(shi)劑盒裏的(de)各種成份及樣(yang)品(pin)。洗滌(di)酶(mei)標(biao)板(ban)時應(ying)充分(fen)拍(pai)幹(gan),不(bu)要(yao)將(jiang)吸(xi)水(shui)紙(zhi)直(zhi)接(jie)放(fang)入酶(mei)標反應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水(shui)。底物A應揮發,避免長時間(jian)打開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物(wu)B對(dui)光(guang)敏感(gan),避免長時間(jian)暴(bao)露(lu)於(yu)光下(xia)。避免用手接(jie)觸(chu),有毒(du)。實驗完(wan)成(cheng)後(hou)應(ying)立(li)即讀取(qu)OD值。加(jia)入試(shi)劑的(de)順序應壹(yi)致(zhi),以保證(zheng)所有反(fan)應(ying)板(ban)孔(kong)溫(wen)育的(de)時間(jian)壹(yi)樣(yang)。按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標明(ming)的(de)時間(jian)、加液(ye)的(de)量及順序進行溫(wen)育操(cao)作(zuo)。樣(yang)品(pin)收(shou)集、處(chu)理及保存(cun)方(fang)法血清(qing)-----操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)避免任何細(xi)胞刺(ci)激。使用不(bu)含熱(re)原和內(nei)毒(du)素(su)的(de)試(shi)管。收(shou)集血液(ye)後(hou),000×g離心(xin)0分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清(qing)和紅(hong)細(xi)胞迅速(su)小心(xin)地(di)分(fen)離。血漿(jiang)-----EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽(yan)、肝(gan)素(su)血漿(jiang)可用於(yu)檢(jian)測(ce)。000×g離心(xin)30分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)。細(xi)胞上清液(ye)---000×g離心(xin)0分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和聚合(he)物。保存(cun)------如果(guo)樣(yang)品(pin)不立(li)即使用,應(ying)將(jiang)其分(fen)成(cheng)小部分(fen)-70 ℃保存(cun),避免反復(fu)冷凍。盡可能的(de)不要(yao)使用溶血或(huo)高血脂血。如果(guo)血清(qing)中(zhong)大量顆(ke)粒(li),檢(jian)測(ce)前(qian)先(xian)離心(xin)或(huo)過(guo)濾。不(bu)要(yao)在37℃或更(geng)高的(de)溫度加熱(re)解(jie)凍。應(ying)在室溫(wen)下(xia)解(jie)凍並(bing)確保樣(yang)品(pin)均勻地充分(fen)解(jie)凍。 操(cao)作(zuo)步驟(zhou)使用前(qian),將(jiang)所有試(shi)劑充(chong)分(fen)混(hun)勻。不(bu)要(yao)使液(ye)體產(chan)生大量的(de)泡沫(mo),以免加(jia)樣(yang)時(shi)加(jia)入大量的(de)氣泡,產(chan)生加(jia)樣(yang)上的(de)誤(wu)差。根(gen)據(ju)待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)數量(liang)加(jia)上標準(zhun)品(pin)的(de)數量決定所需的(de)板(ban)條(tiao)數。每(mei)個標(biao)準品(pin)和空(kong)白(bai)孔(kong)建(jian)議(yi)做(zuo)復(fu)孔(kong)。每(mei)個(ge)樣(yang)品(pin)根(gen)據(ju)自(zi)己的(de)數量來(lai)定,能使用復(fu)孔(kong)的(de)盡量做復(fu)孔(kong)。加(jia)入稀(xi)釋好後(hou)的(de)標準品(pin)50ul於(yu)反應(ying)孔(kong)、加(jia)入待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)50ul於(yu)反應(ying)孔(kong)內(nei)。立(li)即加入50ul的(de)標記的(de)抗體。蓋上膜板(ban),輕輕(qing)振蕩混勻(yun),37℃溫育小時。甩去(qu)孔(kong)內(nei)液(ye)體,每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液(ye),振蕩30秒,甩去(qu)洗滌(di)液(ye),用吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重復(fu)此(ci)操(cao)作(zuo)3次。如果(guo)用洗板(ban)機洗(xi)滌,洗(xi)滌次數增(zeng)加壹(yi)次(ci)。每(mei)孔(kong)加(jia)入80ul的(de)親(qin)和鏈(lian)酶素-HRP,輕輕振蕩混勻(yun),37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。甩去(qu)孔(kong)內(nei)液(ye)體,每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液(ye),振蕩30秒,甩去(qu)洗滌(di)液(ye),用吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重復(fu)此(ci)操(cao)作(zuo)3次。如果(guo)用洗板(ban)機洗(xi)滌,洗(xi)滌次數增(zeng)加壹(yi)次(ci)。每(mei)孔(kong)加(jia)入底(di)物A、B各50ul,輕(qing)輕振蕩混勻(yun),37℃溫育0分(fen)鐘(zhong)。避免光照(zhao)。取(qu)出酶標(biao)板(ban),迅速(su)加入50ul終(zhong)止液(ye),加入終(zhong)止液(ye)後(hou)應(ying)立(li)即測(ce)定結果(guo)。在450nm波長(chang)處(chu)測(ce)定各孔(kong)的(de)OD值。 6號標準(zhun)品(pin)以上的(de)結果(guo)為(wei)非(fei)線性(xing)的(de),根(gen)據(ju)此(ci)標準(zhun)曲(qu)線無法得到(dao)的(de)結果(guo)。試(shi)劑盒性(xing)能. 靈(ling)敏(min)度:zui小的(de)檢(jian)測(ce)濃度小於(yu)號標準(zhun)品(pin)。稀釋(shi)度(du)的(de)線性(xing)。樣(yang)品(pin)線性(xing)回歸與(yu)預期濃度相關系(xi)數(shu)R值為(wei)0.990。2. 特(te)異(yi)性(xing):不與(yu)其(qi)它細(xi)胞因子(zi)反應(ying)。3. 重復(fu)性(xing):板(ban)內、板(ban)間(jian)變(bian)異(yi)系(xi)數(shu)均小於(yu)0%。結 果(guo) 判(pan) 斷(duan) 與(yu) 分(fen) 析、儀(yi)器值:於(yu)波長(chang)450nm的(de)酶標儀上讀取(qu)各孔(kong)的(de)OD值2、以吸(xi)光(guang)度OD值為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)(Y),相應(ying)的(de)NK B標準品(pin)濃度為(wei)橫坐(zuo)標(X),做(zuo)得相應(ying)的(de)曲(qu)線,樣(yang)品(pin)的(de)NK B含量可根(gen)據(ju)其(qi)OD值由標準(zhun)曲(qu)線換(huan)算(suan)出相應(ying)的(de)濃度。3、檢(jian)測(ce)值範圍(wei):0-240nmol/L

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