國產(chan)ELISA試劑(ji)盒克隆(long)化(hua)的(de)方法軟瓊(qiong)脂(zhi)平板法(fa)分(fen)析

國產(chan)ELISA試劑(ji)盒克隆(long)化(hua)的(de)方法軟瓊(qiong)脂(zhi)平板法(fa)分(fen)析

．國產(chan)ELISA試劑(ji)盒配2.5%的(de)瓊脂糖30ml，水浴溶化(hua)後，移入45℃水浴中。

2．將7ml*DMEM液和3ml0倍(bei)濃度的(de)DMEM液混(hun)合，置45℃水浴預(yu)熱(re)。

3．將(jiang)瓊(qiong)脂(zhi)糖與DMEM液(ye)混(hun)合，即(ji)為(wei)含0.5%瓊(qiong)脂(zhi)糖的(de)*DMEM液，並加75×08脾細(xi)胞(bao)。

4．每(mei)塊平皿加0ml，於(yu)室溫(wen)中凝固。

5．DMEM中的(de)細(xi)胞(bao)與DMEM—瓊(qiong)脂(zhi):混(hun)合，將(jiang)細(xi)胞(bao)瓊(qiong)脂混(hun)合物(wu)2ml鋪(pu)於(yu)凝(ning)固的(de)平板上(shang)，使其(qi)全(quan)部覆(fu)蓋(gai)。

6．放(fang)入(ru)CO2箱(xiang)飽(bao)和濕度(du)，37℃培(pei)養(yang)0天(tian)。

7．用(yong)PBS配制0.6%瓊脂(zhi)糖，於(yu)沸(fei)水浴溶解後，置45℃，在(zai)保(bao)溫(wen)情(qing)況下取壹試管(guan)，國產(chan)ELISA試劑(ji)盒迅速加入0.ml25%羊(yang)紅(hong)血(xue)球，0.2ml豚(tun)鼠補(bu)體，2.7ml0.6%瓊(qiong)脂(zhi)糖。

8．用(yong)3ml瓊脂糖—羊紅(hong)血(xue)球混(hun)合液(ye)覆(fu)蓋(gai)克隆(long)。於(yu)37℃CO2箱(xiang)孵(fu)育(yu)h~2h。從克隆(long)上(shang)部溶解羊紅(hong)血(xue)球的(de)溶血範圍，可(ke)篩(shai)選(xuan)抗(kang)羊(yang)紅(hong)血(xue)球Ig。