國(guo)產ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)制備(bei)標(biao)準化(hua)

國(guo)產ELISA試(shi)劑(ji)盒在(zai)實(shi)驗條(tiao)件（包(bao)括試(shi)劑(ji)）較難(nan)保證(zheng)恒定(ding)的(de)情況下(xia)，這種判斷(duan)法較(jiao)為(wei)合適(shi)。在得(de)出(chu)標(biao)本（S）和(he)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)（N）的(de)A值後(hou)，計(ji)算S/N值。也(ye)有(you)寫作P/N的(de)，這裏的(de)P不(bu)代(dai)表(biao)陽(yang)性(xing)（positive），而(er)是(shi)病（patient）的(de)縮(suo)寫，不應(ying)誤解(jie)。為(wei)避免混淆，更(geng)宜(yi)用(yong)S/N表(biao)示(shi)。在早(zao)期的(de)間(jian)接(jie)法ELISA試(shi)劑(ji)盒中(zhong)，有(you)些作者定(ding)出S/N為(wei)陽(yang)性(xing)標(biao)準，現(xian)多為(wei)各(ge)種測定(ding)所沿用(yong)。
實(shi)際上(shang)每壹測(ce)定(ding)系統應該(gai)用實驗(yan)求(qiu)出(chu)各(ge)自的(de)S/N的(de)閾(yu)值。更(geng)應註(zhu)意(yi)的(de)是(shi)，N所代表(biao)的(de)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)是(shi)不含受檢物質(zhi)的(de)人(ren)血(xue)清。有(you)的(de)試(shi)劑(ji)盒中(zhong)所(suo)設陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)為(wei)不含蛋白(bai)質(zhi)或蛋白(bai)質(zhi)含量(liang)較底(di)的(de)緩(huan)沖(chong)液(ye)，以致反(fan)應後(hou)產生(sheng)的(de)本底(di)可(ke)能(neng)較(jiao)正常(chang)人(ren)血(xue)清的(de)本底(di)低得(de)多。陽(yang)性(xing)判定(ding)值（cut-off value）壹般為(wei)陰性(xing)對(dui)照(zhao)A值加上(shang)壹個(ge)特(te)定(ding)的(de)常(chang)數(shu)，以此作為(wei)判斷(duan)結果(guo)陽(yang)性(xing)或陰性(xing)的(de)標(biao)準。ELISA試(shi)劑(ji)盒用(yong)此(ci)法判斷(duan)結果(guo)要(yao)求(qiu)實(shi)驗(yan)條件十(shi)分恒定(ding)，陽(yang)性(xing)和(he)陰(yin)性(xing)的(de)對(dui)照(zhao)品應符合壹定(ding)的(de)規格，須(xu)配(pei)用(yong)精密的(de)儀(yi)器(qi)，並(bing)嚴格按(an)規定(ding)操(cao)作。陽(yang)性(xing)判定(ding)值公(gong)式中(zhong)的(de)常(chang)數(shu)是(shi)在這特(te)定(ding)的(de)系統中通過(guo)對(dui)大(da)量(liang)標(biao)本的(de)實(shi)驗(yan)檢測(ce)而(er)得(de)到(dao)的(de)。
現(xian)舉(ju)某種檢測(ce)HBsAg的(de)試(shi)劑(ji)盒為(wei)例(li)。國(guo)產ELISA試(shi)劑(ji)盒中(zhong)的(de)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)品為(wei)不含HBsAg的(de)復(fu)鈣人(ren)血(xue)漿，陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)品HBsAg的(de)含量(liang)標(biao)明為(wei)P=9±2ng/ml。每次試(shi)驗(yan)設2個(ge)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)和(he)3個(ge)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)。測(ce)得(de)A值後(hou)，先計(ji)算(suan)陰性(xing)對(dui)照(zhao)A值的(de)平(ping)均(jun)數(shu)（NCX）和陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)A值的(de)平(ping)均(jun)數(shu)（PCX），兩個(ge)平(ping)均(jun)數(shu)的(de)差(cha)（P-N）必須大(da)於壹個(ge)特(te)定(ding)的(de)數(shu)值（例(li)0.400），試(shi)驗(yan)才有效。3個(ge)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)A值均(jun)應(ying)≥0.5×NCX，並(bing)≤.5×NCX，如其中之(zhi)壹超(chao)出此(ci)範圍(wei)，則棄去，而(er)已(yi)另兩個(ge)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)重(zhong)新(xin)計(ji)算NCX；如有(you)兩個(ge)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)A值超(chao)出(chu)以上(shang)範圍(wei)，則該(gai)次實驗(yan)無(wu)效。
陽(yang)性(xing)判定(ding)值按(an)下式計(ji)算(suan)：    
陽(yang)性(xing)判定(ding)值=NCX+0.05 標(biao)本A值＞陽(yang)性(xing)判定(ding)值的(de)為(wei)陽(yang)性(xing)，小(xiao)於(yu)陽(yang)性(xing)判定(ding)值的(de)為(wei)陰性(xing)。應(ying)註(zhu)意(yi)的(de)是(shi)，式中(zhong)0.05為(wei)該(gai)試(shi)劑(ji)盒的(de)常(chang)數(shu)，只(zhi)適(shi)合於該(gai)特(te)定(ding)條件下(xia)，國(guo)產ELISA試(shi)劑(ji)盒而(er)不(bu)是(shi)對(dui)各(ge)種試(shi)劑(ji)均(jun)可(ke)通用。