人半乳糖凝(ning)集(ji)素(su)Elisa試劑盒操(cao)作(zuo)程序(xu)總(zong)結(jie)

ELISA試(shi)劑盒價格試劑盒組(zu)成
30 倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液(ye) 20ml× 瓶 7 終(zhong)止(zhi)液(ye) 6ml× 瓶
2 酶(mei)標試劑 6ml× 瓶 8 標準(zhun)品（60pg/ml） 0.5ml× 瓶
3 酶(mei)標包被板(ban) 2 孔(kong)×8 條 9 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液 .5ml× 瓶
4 樣品稀(xi)釋(shi)液 6ml× 瓶 0 說(shuo)明(ming)書 份(fen)
5 顯(xian)色劑A 液 6ml× 瓶 封板(ban)膜(mo) 2 張
6 顯(xian)色劑B 液 6ml×/瓶 2 密(mi)封袋 個(ge)
人半乳糖凝(ning)集(ji)素(su)Elisa試劑盒標本要(yao)求
．標本采集後(hou)盡(jin)早進(jin)行提(ti)取，提(ti)取按(an)相關(guan)文(wen)獻(xian)進(jin)行，提(ti)取後(hou)應盡(jin)快(kuai)進(jin)行實(shi)驗(yan)。若不(bu)能
馬上(shang)進(jin)行試(shi)驗(yan)，可將標本放於(yu)-20℃保存，但應避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融
2．不(bu)能(neng)檢(jian)測含(han)NaN3 的(de)樣品，因NaN3 抑制(zhi)辣(la)根(gen)過氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)（HRP）活性。
ELISA試劑盒價格操(cao)作(zuo)步驟
. 標準(zhun)品的稀(xi)釋(shi)：本試劑盒提(ti)供原(yuan)倍(bei)標準(zhun)品壹支(zhi)，用(yong)戶(hu)可(ke)按(an)照下(xia)列(lie)圖(tu)表(biao)在小(xiao)試管(guan)中(zhong)進(jin)行稀(xi)
釋(shi)。
80pg/ml 5 號標準(zhun)品 50μl 的原(yuan)倍(bei)標準(zhun)品加入50μl 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液
40pg/ml 4 號標準(zhun)品 50μl 的5 號標準(zhun)品加入50μl 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液
20pg/ml 3 號標準(zhun)品 50μl 的4 號標準(zhun)品加入50μl 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液
0pg/ml 2 號標準(zhun)品 50μl 的3 號標準(zhun)品加入50μl 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液
5.0pg/ml 號標準(zhun)品 50μl 的2 號標準(zhun)品加入50μl 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液
2. 加樣(yang)：分別設空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對照(zhao)孔(kong)不(bu)加(jia)樣(yang)品及(ji)酶(mei)標試劑，其(qi)余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作(zuo)相同）、標準(zhun)孔(kong)、
待(dai)測樣(yang)品孔(kong)。在(zai)酶(mei)標包被板(ban)上(shang)標準(zhun)品準(zhun)確加樣(yang)50μl，待(dai)測樣(yang)品孔(kong)中(zhong)先加樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液40μl，
然後(hou)再加(jia)待(dai)測樣(yang)品0μl（樣品zui終(zhong)稀(xi)釋(shi)度為5 倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣品加於(yu)酶(mei)標板孔(kong)底(di)部(bu)，盡(jin)
量不觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕輕晃動(dong)混勻。
3. 溫(wen)育：用(yong)封(feng)板(ban)膜封(feng)板後(hou)置37℃溫(wen)育30 分鐘(zhong)。
4. 配(pei)液(ye)：將30 倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾水30 倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備用(yong)
5. 洗(xi)滌(di)：小(xiao)心揭(jie)掉封板(ban)膜，棄去液體，甩(shuai)幹(gan)，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜置30 秒(miao)後(hou)棄去，如此(ci)
重復(fu)5 次(ci)，拍(pai)幹(gan)。
6. 加(jia)酶(mei)：每孔(kong)加(jia)入酶(mei)標試劑50μl，空白(bai)孔(kong)除外(wai)。
7. 溫(wen)育：操(cao)作(zuo)同3。
8. 洗(xi)滌(di)：操(cao)作(zuo)同5。
9. 顯(xian)色：每孔(kong)先加入顯(xian)色劑A50μl，再加(jia)入顯(xian)色劑B50μl，輕輕震蕩(dang)混勻，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色
5 分(fen)鐘(zhong).
0. 終(zhong)止(zhi)：每孔(kong)加(jia)終(zhong)止(zhi)液(ye)50μl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)（此(ci)時(shi)藍(lan)色(se)立轉黃(huang)色）。
. 測定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空調零，450nm 波(bo)長(chang)依(yi)序(xu)測量(liang)各(ge)孔(kong)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)（OD 值）。 測定(ding)應在加終(zhong)止(zhi)
液(ye)後(hou)5 分鐘(zhong)以(yi)內進(jin)行。
人半乳糖凝(ning)集(ji)素(su)Elisa試劑盒計算(suan)
以(yi)標準(zhun)物(wu)的濃度(du)為(wei)橫坐(zuo)標，OD 值為(wei)縱(zong)坐標，在坐標紙上(shang)繪出(chu)標準(zhun)曲線(xian)，根(gen)據(ju)樣品的
OD 值由(you)標準(zhun)曲線(xian)查(zha)出(chu)相應(ying)的(de)濃度(du)；再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數；或(huo)用(yong)標準(zhun)物(wu)的濃度(du)與(yu)OD 值計算(suan)出(chu)標
準(zhun)曲線(xian)的(de)直(zhi)線(xian)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)式(shi)，將樣品的OD 值代入方(fang)程(cheng)式(shi)，計算(suan)出(chu)樣品濃度，再乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數，
即(ji)為(wei)樣品的實際濃度(du)。
人半乳糖凝(ning)集(ji)素(su)Elisa試劑盒註意(yi)事項(xiang)
．試劑盒從冷(leng)藏(zang)環(huan)境中(zhong)取出(chu)應在(zai)室(shi)溫(wen)平衡5-30 分鐘後(hou)方(fang)可(ke)使(shi)用(yong)，酶(mei)標包被板(ban)開(kai)封(feng)後(hou)如未(wei)
用(yong)完(wan)，板(ban)條應裝(zhuang)入密(mi)封袋中保存。
2．濃洗(xi)滌(di)液(ye)可(ke)能(neng)會有結(jie)晶(jing)析出(chu)，稀(xi)釋(shi)時(shi)可(ke)在(zai)水浴中(zhong)加溫(wen)助溶(rong)，洗(xi)滌(di)時(shi)不(bu)影(ying)響結(jie)果(guo)。
3．各(ge)步(bu)加(jia)樣(yang)均(jun)應(ying)使(shi)用(yong)加(jia)樣(yang)器，並(bing)經(jing)常(chang)校(xiao)對其(qi)準(zhun)確性，以(yi)避(bi)免試(shi)驗(yan)誤差。壹次加(jia)樣時(shi)間(jian)
控(kong)制(zhi)在5 分鐘內，如標本數量(liang)多，使用(yong)排槍(qiang)加(jia)樣(yang)。
4． 請(qing)每次測定(ding)的同時(shi)做標準(zhun)曲線(xian)，做復(fu)孔(kong)。如標本中待(dai)測物(wu)質(zhi)含(han)量(liang)過高（樣(yang)本OD 值
大於(yu)標準(zhun)品孔(kong)*孔(kong)的(de)OD 值），請(qing)先用(yong)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)壹定(ding)倍(bei)數（n 倍(bei)）後(hou)再測定(ding)，計
算(suan)時(shi)請(qing)zui後(hou)乘(cheng)以(yi)總(zong)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數（×n×5）。
5． 封(feng)板(ban)膜只限壹次性使用(yong)，以(yi)避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙染。
6．底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存。
7．嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明(ming)書的(de)操(cao)作(zuo)進(jin)行，試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)判(pan)定(ding)必須(xu)以(yi)酶(mei)標儀讀(du)數為(wei)準(zhun).
8．所有樣品，洗(xi)滌(di)液(ye)和各(ge)種(zhong)廢(fei)棄物(wu)都應按(an)傳(chuan)染物(wu)處理。
9．ELISA試劑盒價格本試劑不同(tong)批(pi)號組(zu)分不得混用(yong)。