國產(chan)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)檢測(ce)型(xing)特(te)異性抗體

國(guo)產(chan)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)基本(ben)方法是將(jiang)已知的(de)抗原(yuan)或抗體吸(xi)附(fu)在(zai)固相(xiang)載體( 聚(ju)苯乙(yi)烯微(wei)量(liang)反應板 )表面，使酶標記的(de)抗原(yuan)-抗體反應在(zai)固相(xiang)表面進(jin)行(xing)，用(yong)洗滌(di)法將液(ye)相中(zhong)的(de)遊離成(cheng)分洗除。
、競(jing)爭(zheng)ELISA試劑盒：此法主(zhu)要用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)小(xiao)分子抗原(yuan)及半(ban)抗原(yuan)，其原(yuan)理類似(si)於(yu)放(fang)射免(mian)疫(yi)測(ce)定(ding)。
其基本(ben)程序為(wei)：
① 抗體包被 → 4℃過夜，洗滌(di)三次、拋(pao)幹
② 加入待檢抗原(yuan)及壹(yi)定(ding)量(liang)的(de)酶標抗原(yuan)（對(dui)照(zhao)孔(kong)僅(jin)加酶(mei)標抗原(yuan)）→ 37℃ 60分鐘(zhong)，洗滌(di)三次、拋(pao)幹
③ 加底物液(ye) → 37℃ 20分鐘(zhong)，加(jia)終(zhong)止(zhi)液
④ 用(yong)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)檢測(ce)儀(yi)測(ce)定(ding)OD值。
   被結合(he)的(de)酶標抗原(yuan)的(de)量由酶(mei)催化(hua)底物反(fan)應產(chan)生有(you)色產(chan)物的(de)量來(lai)確定(ding)，如(ru)果待檢溶(rong)液(ye)中(zhong)抗原(yuan)越多，被結合(he)的(de)標記抗原(yuan)的(de)量就(jiu)越少(shao)，有(you)色產(chan)物就(jiu)減(jian)少(shao)，這(zhe)樣根(gen)據有(you)色產(chan)物的(de)變(bian)化(hua)就可(ke)求(qiu)出(chu)未(wei)知抗原(yuan)的(de)量。此法的(de)優點(dian)在(zai)於(yu)快(kuai)速、特(te)異性高(gao)、且(qie)可用(yong)於(yu)小(xiao)分子抗原(yuan)及半(ban)抗原(yuan)的(de)檢測(ce)；其主(zhu)要不(bu)足(zu)在(zai)於(yu)每(mei)種(zhong)抗原(yuan)都要進(jin)行(xing)酶標記，而且(qie)因為(wei)抗原(yuan)的(de)結構不同，還(hai)需(xu)應用(yong)不(bu)同的(de)結合(he)方法。此外(wai)試驗(yan)中應用(yong)酶(mei)標抗原(yuan)的(de)量較多。
2、阻(zu)斷國(guo)產(chan)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) 
   本法主(zhu)要用(yong)於(yu)。該(gai)方法現已(yi)成(cheng)為豬(zhu)傳(chuan)染性胃(wei)腸(chang)炎（TGE）、豬(zhu)偽(wei)狂犬病(bing)（PR）及(ji)豬(zhu)胸(xiong)膜肺炎（AP）的(de)主(zhu)要檢測(ce)方法。
下(xia)面以AP2型抗體的(de)阻(zu)斷ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)檢測(ce)法為例介(jie)紹其操作程(cheng)序(xu)：
① 00μl AP2型工(gong)作量(liang)抗原(yuan)包被 → 4℃過夜，洗滌(di)三次、拋(pao)幹
② 用(yong)200μl阻(zu)斷緩沖(chong)液(ye)進(jin)行(xing)封閉 → 37℃ 60分鐘(zhong)，洗滌(di)三次、拋(pao)幹
③ 加工(gong)作量(liang):4稀(xi)釋被檢豬(zhu)血(xue)清00μl → 37℃ 60分鐘(zhong)，洗滌(di)三次、拋(pao)幹
④ 加00μl工(gong)作量(liang)兔(tu)抗AP2型(xing)血(xue)清 → 37℃ 30分鐘(zhong)，洗滌(di)三次、拋(pao)幹
⑤ 加00μl工(gong)作量(liang)豬(zhu)抗兔(tu)IgG-HRP → 37℃ 60分鐘(zhong)，洗滌(di)三次、拋(pao)幹
⑥ 加00μl OPD底物液(ye) → 37℃ 20分鐘(zhong)，加(jia)終(zhong)止(zhi)液
⑦ 用(yong)國(guo)產(chan)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)檢測(ce)儀(yi)測(ce)定(ding)OD值。