ELISA試劑盒(he)實(shi)驗土壤(rang)/植物樣本的采集(ji)及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法(fa)

 ELISA試劑盒(he)實(shi)驗土壤(rang)/植物樣本的處(chu)理(li)方(fang)法(fa)
植物標(biao)本的精采集(ji)及(ji)保(bao)存(cun) 
、 稱取(qu)0.g（誤(wu)差(cha)±3%以(yi)內）新鮮(xian)植物組織(zhi)樣本，在液氮中充(chong)分研(yan)磨；
2、 加入(ru)ml的(de)提取(qu)液(ye)（80%甲(jia)醇）, 置於-20度(du)過(guo)夜(ye)；
3、 於4度(du)，8000rpm，離(li)心(xin)小(xiao)時，取(qu)上(shang)清(qing)；
4、 上清(qing)液過(guo)C-8固相(xiang)萃取(qu)柱(zhu)。具體(ti)步(bu)驟是： 80%甲(jia)醇（ml）平衡(heng)柱(zhu)→上樣→收集樣品→移開樣品(pin)後(hou)用(yong)00%甲(jia)醇（5ml）洗柱(zhu)→00%yimi（5ml）洗柱(zhu)→00%甲(jia)醇（5ml）洗柱(zhu)→循環(huan)。過柱(zhu)後(hou)的(de)樣本真空幹(gan)燥或(huo)氮氣吹(chui)幹(gan)，保存(cun)備用；

5、 上樣前(qian)加(jia)入(ru)pH7.4 PBS緩(huan)沖液（ml定容(rong)）。混(hun)勻(yun)後(hou)室(shi)溫(wen)放(fang)置30分鐘，然後(hou)4度(du)離(li)心(xin)（8000rpm，5分(fen)鐘），取(qu)上(shang)清(qing)並暫(zan)時保(bao)存於4度(du)待(dai)用(yong)。

6.植物標(biao)本中相關酶(mei)或(huo)蛋白(bai)的測定：（粗提取(qu)）
、 新鮮(xian)植物組織(zhi)請在液(ye)氮中充(chong)分研(yan)磨；
2、 加入(ru)樣(yang)品(pin)體積9倍的提取(qu)液(ye)（pH 7.4 PBS緩(huan)沖液）,3、 請於4度(du)，8000rpm，離(li)心(xin)30分(fen)鐘，取(qu)上(shang)清(qing)並暫(zan)時保(bao)存於4度(du)待(dai)用(yong)。

土壤(rang)：稱取(qu)g土壤(rang)，加(jia)入(ru)9g的(de)pH7.2-7.4左(zuo)右的(de)PBS，用(yong)手(shou)工將標(biao)本充(chong)分混(hun)勻。2-8℃條(tiao)件離(li)心(xin)20分(fen)鐘左右（2000-3000轉/分(fen)），仔細收(shou)集(ji)上清(qing)。分裝(zhuang)壹份(fen)待(dai)檢(jian)測，其余(yu)冷(leng)凍(dong)備用，保存過(guo)程(cheng)中如有(you)沈(chen)澱形(xing)成，應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。如(ru)果是測分(fen)泌蛋白，直(zhi)接(jie)取(qu)上(shang)清(qing)檢(jian)測，測試細胞內蛋(dan)白(bai)，要(yao)破(po)碎細胞。