科(ke)研(yan)ELISA試劑盒(he)實驗看(kan)似簡(jian)單(dan),其實不然。記得以(yi)前(qian)壹個(ge)同(tong)學*次(ci)做(zuo)ELISA實驗,跟(gen)我說,ELISA實驗簡(jian)直(zhi)太(tai)簡(jian)單(dan)了(le),到第2次在(zai)次做(zuo)ELISA實驗的時(shi)候(hou),他(ta)驚訝了(le),說結(jie)果差別怎麽這(zhe)麽大(da)(同(tong)壹份(fen)標(biao)本(ben)),第三(san)次(ci)的時(shi)候(hou),他(ta)決(jue)定認(ren)真(zhen)的做(zuo)壹次,爭取做到(dao)同(tong)壹份(fen)標(biao)本(ben),這(zhe)次讓(rang)他(ta)感(gan)受(shou)到ELISA並(bing)不(bu)是(shi)那麽簡(jian)單(dan),發(fa)覺(jiao)其實挺難(nan)的。今天的文章中為(wei)大(da)家(jia)講(jiang)述壹些ELISA實驗中的小(xiao)技巧,希望(wang)對(dui)大(da)家(jia)有所幫助(zhu)!
.操(cao)作前(qian)應對(dui)實驗的物(wu)理(li)參(can)數有充(chong)分的了(le)解,如(ru)環(huan)境溫(wen)度(du)(保(bao)持(chi)在(zai)8C~25℃)、反應孵育(yu)溫(wen)度(du)和(he)孵(fu)育(yu)時(shi)間、洗(xi)滌(di)的次(ci)數等(deng),要(yao)先(xian)查(zha)看(kan)水育(yu)箱(xiang)溫(wen)度(du),ELISA試劑盒(he)是(shi)否(fou)符(fu)合(he)要求(qiu)。
2.正確使(shi)用(yong)加(jia)樣器加樣器應垂直加(jia)入標(biao)本(ben)或試劑,避(bi)免刮(gua)擦(ca)包(bao)被(bei)板(ban)底部(bu)。加(jia)樣過(guo)程中避(bi)免液(ye)體外濺(jian),血清殘留(liu)在(zai)反應孔壁上,加(jia)樣器吸頭(tou)要(yao)清洗幹(gan)凈(jing),避(bi)免汙(wu)染(ran),加(jia)樣次序要與說明書(shu)壹致,否(fou)則可(ke)導(dao)致結(jie)果錯誤(wu),實驗重(zhong)復性差。
3.手(shou)工(gong)洗(xi)板(ban)加洗(xi)液(ye)時(shi)沖擊(ji)力不(bu)要太(tai)大(da),洗(xi)滌(di)次數不要(yao)超過(guo)說明書(shu)的洗(xi)滌(di)次數,洗液(ye)在反應孑(jie)L內滯留的時(shi)間不(bu)宜太(tai)長(chang)。不要使(shi)洗(xi)液(ye)在孑(jie)L間(jian)竄流,造成孔問(wen)汙(wu)染(ran),導(dao)致假陰性或假(jia)陽性。
4.要保(bao)證加液(ye)量壹致ELISA試劑盒(he)我(wo)們(men)在(zai)使(shi)用(yong)時(shi)感(gan)覺(jiao)滴(di)瓶加液(ye)不如(ru)加樣器好(hao),滴瓶不易控制(zhi)加(jia)液(ye)量不(bu)準(zhun),造成顯色(se)不統壹,判(pan)斷(duan)錯誤(wu)。
5.顯色(se)液(ye)量不(bu)可(ke)過(guo)多(duo)加樣的工(gong)作環(huan)境不(bu)能(neng)處於(yu)陽光(guang)直射(she)的環(huan)境下,加(jia)顯(xian)色(se)系(xi)統後要避(bi)光反應,顯色(se)液(ye)量不(bu)能(neng)過(guo)多(duo),以(yi)免顯(xian)色(se)過(guo)強。
ELISA試劑盒(he)的影(ying)響因素應選用(yong)質(zhi)量靠(kao)得(de)住的產(chan)品,不(bu)能(neng)圖便(bian)宜,忽(hu)視質(zhi)量保(bao)證。試劑應妥善保(bao)存(cun)於(yu)4℃冰箱(xiang)內,在使用(yong)時(shi)先(xian)平衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen),不(bu)同(tong)批號的試劑組分不宜(yi)交(jiao)叉(cha)使用(yong)。試劑開(kai)啟(qi)後要在壹周(zhou)內用(yong)完(wan),剩余(yu)的試劑下次(ci)用(yong)時(shi)應先(xian)檢(jian)查(zha)是(shi)否(fou)變質(zhi),顯(xian)色(se)劑如(ru)被(bei)汙(wu)染(ran)變色(se)將造成全部(bu)顯(xian)色(se),導(dao)致錯誤(wu)結(jie)果。
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