人(ren)蛋(dan)白(bai)ELISA檢測試劑(ji)盒(he)的(de)這些事項(xiang)要註(zhu)意(yi)

　　使(shi)用人(ren)蛋(dan)白(bai)ELISA檢測試劑(ji)盒(he)進(jin)行試(shi)驗時(shi)，應(ying)分別(bie)以陽性對(dui)照與(yu)陰(yin)性(xing)對照控(kong)制試驗條(tiao)件，待(dai)檢樣品(pin)應作(zuo)壹式(shi)二份(fen)，以(yi)保證實(shi)驗結(jie)果的(de)準確(que)性。有(you)時本(ben)底(di)較(jiao)高，說(shuo)明(ming)有(you)非特異(yi)性反(fan)應(ying)。

　　在ELISA中(zhong)，進(jin)行各(ge)項(xiang)實(shi)驗條(tiao)件的(de)選擇是很重要的，其中(zhong)包(bao)括(kuo)：

　　固相載體的選(xuan)擇：許(xu)多(duo)物質(zhi)可作(zuo)為固相載體，如聚氯(lv)乙(yi)烯、聚苯乙(yi)烯、聚丙(bing)酰胺和(he)纖(xian)維素等。其(qi)形式(shi)可(ke)以是凹(ao)孔(kong)平板、試管、珠(zhu)粒(li)等。目(mu)前常(chang)用的(de)是40孔(kong)聚(ju)苯乙(yi)烯凹孔(kong)板(ban)。不(bu)管(guan)何(he)種載(zai)體，在使(shi)用前(qian)均(jun)可(ke)進(jin)行篩(shai)選(xuan)：用等量(liang)抗原包被，在同壹實(shi)驗條(tiao)件下進(jin)行反(fan)應(ying)，觀察其顯(xian)色反(fan)應(ying)是否(fou)均(jun)壹性，據(ju)此(ci)判(pan)明(ming)其(qi)吸附(fu)性(xing)能(neng)是否(fou)良(liang)好(hao)。

　　包被抗體（或(huo)抗原）的選擇：將抗體（或(huo)抗原）吸附(fu)在固相載體表面時(shi)，要(yao)求純度要好(hao),吸附(fu)時(shi)壹般要(yao)求PH在9.0～9.6之(zhi)間。吸附(fu)溫(wen)度，時間及(ji)其(qi)蛋(dan)白(bai)量(liang)也(ye)有(you)壹定(ding)影響,壹般多(duo)采(cai)用4℃8～24小(xiao)時(shi)。蛋(dan)白(bai)質(zhi)包被的(de)適濃(nong)度需進(jin)行滴(di)定(ding)：即(ji)用不(bu)同的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)濃(nong)度（0.、.0和0μg／ml等）進(jin)行包(bao)被後，在其(qi)它試(shi)驗條(tiao)件相(xiang)同時(shi)，觀察陽性標(biao)本(ben)的(de)OD值(zhi)。選擇OD值(zhi)大(da)而(er)蛋(dan)白(bai)量(liang)少的(de)濃(nong)度。對於(yu)多(duo)數蛋(dan)白(bai)質(zhi)來說(shuo)通(tong)常(chang)為～0μg／ml。

　　除(chu)此(ci)之(zhi)外還要註(zhu)意(yi)以(yi)下事(shi)項(xiang)：

　　.確定(ding)人(ren)蛋(dan)白(bai)ELISA檢測試劑(ji)盒(he)在有(you)效(xiao)期(qi)內；

　　2.仔細(xi)閱讀(du)說(shuo)明(ming)書(shu)；

　　3.按(an)說(shuo)明(ming)書(shu)確定(ding)所有試(shi)劑齊全(quan)（數量(liang)、體積）；

　　4.標(biao)本(ben)制備(bei)要規(gui)範(fan)，每(mei)份(fen)標(biao)本(ben)體積要按(an)2-3個(ge)復孔以上(shang)的量(liang)制備(bei)，盡量(liang)分裝做備(bei)份(fen)。短(duan)期(qi)內無(wu)法實(shi)驗者(zhe)，註(zhu)意(yi)低(di)溫保存；

　　5.根(gen)據(ju)檢測標(biao)本(ben)數(shu)量(liang)確(que)定(ding)所需試(shi)劑的(de)量(liang)；

　　6.準(zhun)備(bei)好(hao)所有實(shi)驗額(e)外(wai)所需物(wu)品(pin)，如試管(guan)、吸頭、移(yi)液(ye)器、離(li)心機等；

　　7.按(an)說(shuo)明(ming)書(shu)將所用試(shi)劑(ji)平(ping)衡(heng)至室溫，配(pei)制所需試(shi)劑。