植物Elisa試(shi)劑盒采用(yong)雙(shuang)抗體壹步夾(jia)心法酶(mei)聯免疫吸(xi)附試驗,往預先包被(bei)植物磷(lin)脂(zhi)酸捕獲(huo)抗體的(de)包被(bei)微(wei)孔中,依(yi)次(ci)加(jia)入標(biao)本、標(biao)準(zhun)品、HRP標記(ji)的(de)檢測抗體,經過溫(wen)育(yu)並*洗滌(di)。用(yong)底物TMB顯(xian)色(se),TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶的(de)催化(hua)下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色,並(bing)在(zai)酸的(de)作(zuo)用(yong)下轉化(hua)成(cheng)終(zhong)的(de)黃色(se)。顏色的(de)深淺(qian)和(he)樣品中(zhong)的(de)植物磷(lin)脂(zhi)酸呈正(zheng)相關,用(yong)酶標儀在450nm波長(chang)下(xia)測定(ding)吸(xi)光度(du),計算樣品濃(nong)度。
嚴(yan)格(ge)按照(zhao)規(gui)定(ding)的(de)時間和溫(wen)度(du)進行溫(wen)育(yu)以保證準確(que)結(jie)果(guo)。所有(you)試劑都必須在使(shi)用(yong)前達到室溫(wen)20-25℃。使(shi)用(yong)後立即冷(leng)藏(zang)保存(cun)試(shi)劑。
使(shi)用(yong)植物Elisa試(shi)劑盒時要註(zhu)意(yi)以下(xia)事項(xiang)。
消除(chu)板底(di)殘(can)留(liu)的(de)液(ye)體和手指(zhi)印(yin),否則影響OD值。
洗板(ban)不正(zheng)確(que)可(ke)以導(dao)致(zhi)不(bu)準確(que)的(de)結果(guo)。在加(jia)入底(di)物前(qian)確(que)保盡(jin)量(liang)吸(xi)幹(gan)孔(kong)內(nei)液(ye)體。溫(wen)育(yu)過程中不(bu)要讓(rang)微(wei)孔幹(gan)燥掉。
底(di)物顯(xian)色(se)液(ye)應呈(cheng)無(wu)色(se)或很淺的(de)顏色,已(yi)經變藍的(de)底物(wu)液(ye)不能使(shi)用(yong)。
在儲(chu)存(cun)和(he)溫(wen)育(yu)時避(bi)免強(qiang)光(guang)直接(jie)照(zhao)射。
避(bi)免試(shi)劑和標本的(de)交叉(cha)汙(wu)染以免造(zao)成(cheng)錯(cuo)誤(wu)結果(guo)。
平衡至(zhi)室溫(wen)後(hou)再(zai)打(da)開(kai)密封袋(dai)以防(fang)水滴(di)凝(ning)聚(ju)在冷(leng)板(ban)條上(shang)。
任(ren)何反應(ying)試劑不能接觸(chu)漂(piao)白(bai)溶(rong)劑或漂(piao)白(bai)溶(rong)劑所散(san)發(fa)的(de)強烈(lie)氣(qi)體。任何漂(piao)白(bai)成(cheng)分(fen)都會(hui)破壞(huai)試(shi)劑盒中反應試(shi)劑的(de)生(sheng)物(wu)活(huo)性。
試劑盒從冷(leng)藏(zang)環(huan)境中取(qu)出(chu)應在(zai)室溫(wen)平衡5-30分(fen)鐘後(hou)方(fang)可使(shi)用(yong),酶標包被板開(kai)封後如(ru)未用(yong)完,板條應(ying)裝(zhuang)入密封袋(dai)中(zhong)保存(cun)。
濃(nong)洗滌(di)液(ye)可能會有(you)結晶析出(chu),稀釋時(shi)可(ke)在水浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助(zhu)溶(rong),洗滌(di)時不影響結果(guo),各步加(jia)樣均應(ying)使(shi)用(yong)加(jia)樣器,並(bing)經常(chang)校對其(qi)準確(que)性,以避(bi)免試(shi)驗誤(wu)差。壹(yi)次加(jia)樣時間好控制在(zai)5分(fen)鐘內(nei),如(ru)標(biao)本數(shu)量(liang)多,使(shi)用(yong)排槍(qiang)加(jia)樣。
請每次測定(ding)的(de)同時做(zuo)標準(zhun)曲線,好做復(fu)孔(kong),如(ru)標(biao)本中(zhong)待(dai)測物質(zhi)含(han)量(liang)過(guo)高(gao),樣本OD值(zhi)大於(yu)標準品孔孔(kong)的(de)OD值,請(qing)先(xian)用(yong)樣品稀釋液(ye)稀釋壹(yi)定(ding)倍(bei)數(shu)後再(zai)測定(ding),計算(suan)時(shi)請(qing)後乘(cheng)以總稀釋倍(bei)數(shu)。
封板(ban)膜只限(xian)壹(yi)次(ci)性使(shi)用(yong),以避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。
嚴(yan)格(ge)按照(zhao)說明(ming)書的(de)操作(zuo)進(jin)行(xing),試(shi)驗結果(guo)判(pan)定(ding)必須以酶(mei)標儀讀數(shu)為(wei)準(zhun)。
所有(you)樣品,洗滌(di)液(ye)和各種廢(fei)棄物都應按(an)傳染物處(chu)理。