當(dang)前(qian)位(wei)置(zhi):首頁 > 技(ji)術文(wen)章(zhang) > 豬基(ji)質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白酶9(MMP-9)ELISA檢(jian)測試劑(ji)盒(he)技(ji)術原(yuan)理
豬基(ji)質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白酶9(MMP-9)ELISA檢(jian)測試劑(ji)盒(he)說明書(shu)技(ji)術原(yuan)理:
.抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)的(de)固相化及(ji)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)的(de)酶標(biao)記(ji)。
2.結(jie)合在固相載(zai)體(ti)表面的(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)仍(reng)保持(chi)其免(mian)疫(yi)學活性。
3.酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)既(ji)保留(liu)其免(mian)疫(yi)學活性,又保留(liu)酶(mei)的(de)活性。
4.受(shou)檢(jian)標(biao)本(ben)與(yu)固相載(zai)體(ti)表面的(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti)起(qi)反應(ying)。再(zai)加(jia)入(ru)酶標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)原(yuan)或抗(kang)體(ti),也通(tong)過反應(ying)而(er)結(jie)合在固相載(zai)體(ti)上(shang)。
5.此(ci)時(shi)固相上(shang)的(de)酶量(liang)與(yu)標(biao)本(ben)中受(shou)檢(jian)物質(zhi)的(de)量呈(cheng)壹定的(de)比(bi)例。
6.加(jia)入(ru)酶反應(ying)的(de)底物(wu)後,底物(wu)被(bei)酶催(cui)化(hua)成為(wei)有色(se)產物,產物的(de)量與(yu)標(biao)本(ben)中受(shou)檢(jian)物質(zhi)的(de)量直(zhi)接相關(guan),故(gu)可(ke)根(gen)據(ju)呈色(se)的(de)深淺進行定性或(huo)定量分析。測(ce)定方(fang)法具(ju)有很(hen)高(gao)的(de)敏感(gan)度(du)(pg-ng/ml水(shui)平),並且(qie)重復(fu)性好(hao)。以免(mian)疫(yi)學反應(ying)為(wei)基(ji)礎(chu),將抗(kang)原(yuan)、抗(kang)體(ti)的(de)特異性反應(ying)與(yu)酶對底物(wu)的(de)催(cui)化(hua)作用(yong)相結(jie)合起來的(de)壹種(zhong)敏感(gan)性很(hen)高(gao)的(de)試驗(yan)技(ji)術。
豬基(ji)質(zhi)金屬(shu)蛋(dan)白酶9(MMP-9)ELISA檢(jian)測試劑(ji)盒(he)組織結(jie)構:
.血清:操(cao)作過程(cheng)中避(bi)免(mian)任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)。使(shi)用不(bu)含(han)熱原和(he)內毒素的(de)試管(guan)。收(shou)集血液後(hou),000×g離心35分鐘將血紅細(xi)胞(bao)迅(xun)速小心地分離。
2.血漿(jiang):EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽(yan)、肝(gan)素血漿(jiang)可(ke)用(yong)於檢(jian)測。000×g離心60分鐘去(qu)除顆(ke)粒(li)。
3.細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液:000×g離心32分鐘去(qu)除顆(ke)粒(li)和(he)聚合物。
4.組織勻漿(jiang):將組織加(jia)入(ru)適量生理鹽水(shui)搗碎(sui)。000×g離心33分鐘,取(qu)上(shang)清(qing)液。
5.保存(cun):如(ru)果(guo)樣(yang)品(pin)不(bu)立即使用(yong),應(ying)將其分成小部分-70℃保存(cun),避(bi)免(mian)反復(fu)冷凍(dong)。盡(jin)可(ke)能(neng)的(de)不(bu)要使(shi)用(yong)溶血或高(gao)血脂血。如(ru)果(guo)血清中大量顆粒(li),檢(jian)測前(qian)先(xian)離心或過濾。不(bu)要在(zai)37℃或(huo)更(geng)高(gao)的(de)溫度(du)加(jia)熱解(jie)凍(dong)。應(ying)在(zai)室溫下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保樣(yang)品(pin)均勻地充(chong)分解(jie)凍(dong)。
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