α-羥(qiang)丁酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶（α-HBD）檢(jian)測試(shi)劑盒註(zhu)意事(shi)項要點(dian)

α-羥丁酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶(α-HBD)檢(jian)測試(shi)劑盒(速(su)率微板法)註(zhu)意(yi)事項：

，底物請避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)。

2，嚴(yan)格按(an)照說明(ming)書(shu)的操(cao)作(zuo)進行(xing)，試(shi)驗結果判定必(bi)須以(yi)酶標(biao)儀(yi)讀數為(wei)準(zhun).

3，所有樣(yang)品，洗(xi)滌(di)液(ye)和各種(zhong)廢棄(qi)物都應(ying)按傳(chuan)染物處理(li)。

4，本(ben)試(shi)劑不同(tong)批(pi)號(hao)組(zu)分不得(de)混用。

5，為(wei)了(le)您(nin)的安(an)全和健(jian)康(kang)，請(qing)穿(chuan)實(shi)驗服並戴(dai)壹(yi)次(ci)性手(shou)套操(cao)作(zuo)。

α-羥丁酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶(α-HBD)檢(jian)測試(shi)劑盒(速(su)率微板法)操(cao)作(zuo)步驟：

， 編(bian)號(hao)：將(jiang)樣(yang)品(pin)對(dui)應微孔(kong)按序編號(hao)，每(mei)板應設(she)陰(yin)性對(dui)照2 孔(kong)、陽(yang)性對(dui)照2 孔(kong)、空白(bai)對(dui)照孔(kong)（空白(bai)對(dui)照孔(kong)不加樣(yang)品(pin)及酶標(biao)試(shi)劑，其余(yu)各步操(cao)作(zuo)相同(tong)）。

2，加樣(yang)：分別在(zai)陰(yin)、陽(yang)性對(dui)照孔(kong)中加入(ru)陰(yin)性對(dui)照、陽(yang)性對(dui)照 50μl。然(ran)後在(zai)待測樣品(pin)孔(kong)先加樣(yang)品(pin)稀釋液(ye) 40μl，然後再(zai)加待(dai)測樣品(pin) 0μl。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標(biao)板孔(kong)底部(bu)，盡(jin)量(liang)不(bu)觸(chu)及孔(kong)壁，輕輕晃(huang)動(dong)混勻(yun)。

3，溫(wen)育(yu)：用封(feng)板膜封(feng)板後置37℃溫(wen)育(yu)30 分鐘(zhong)。

4，配液(ye)：將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液(ye)加蒸(zheng)餾(liu)水至600ml後備用。

5，洗(xi)滌(di)：小心揭掉封(feng)板膜，棄(qi)去液(ye)體，甩(shuai)幹(gan)，每孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜置 30 秒後(hou)棄(qi)去，如此(ci)重(zhong)復5次(ci)，拍幹(gan)。

6，加酶：每(mei)孔(kong)加入(ru)酶標(biao)試(shi)劑50μl，空白(bai)孔(kong)除外。

7，顯色：每(mei)孔(kong)先加入(ru)顯色劑A 50μl，再(zai)加入(ru)顯色劑B 50μl，輕輕震(zhen)蕩混勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯色5 分鐘(zhong)。

8，終(zhong)止：每(mei)孔(kong)加終(zhong)止液(ye)50μl，終(zhong)止反(fan)應（此(ci)時(shi)藍色立(li)轉黃(huang)色）。

9，測定：以空(kong)白空(kong)調(tiao)零，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序測量各孔(kong)的吸(xi)光(guang)度(du)（OD值(zhi)）。 測定應在(zai)加終(zhong)止液(ye)後5分鐘(zhong)以內進(jin)行(xing)。