科(ke)研ELISA試(shi)劑(ji)盒實(shi)驗(yan)土(tu)壤(rang)/植(zhi)物(wu)樣(yang)本(ben)的(de)處理方(fang)法(fa)步驟

 科(ke)研ELISA試(shi)劑(ji)盒實(shi)驗(yan)土(tu)壤(rang)/植(zhi)物(wu)樣(yang)本(ben)的(de)處理方(fang)法(fa)

植(zhi)物(wu)標(biao)本(ben)的(de)精(jing)采(cai)集(ji)及保(bao)存(cun) 

、 稱(cheng)取(qu)0.g（誤(wu)差±3%以內）新鮮(xian)植(zhi)物(wu)組織樣本(ben)，在液(ye)氮中充(chong)分(fen)研磨(mo)；

2、 加(jia)入ml的(de)提(ti)取(qu)液(ye)（80%甲(jia)醇(chun)）, 置於-20度(du)過夜；

3、 於4度(du)，8000rpm，離(li)心(xin)小(xiao)時，取(qu)上(shang)清(qing)；

5、 上(shang)樣前(qian)加入pH7.4 PBS緩(huan)沖(chong)液(ye)（ml定容(rong)）。混勻(yun)後(hou)室(shi)溫(wen)放置(zhi)30分(fen)鐘，然(ran)後(hou)4度(du)離(li)心(xin)（8000rpm，5分(fen)鐘），取(qu)上(shang)清(qing)並(bing)暫時保存(cun)於4度(du)待用(yong)。

實(shi)驗(yan)土(tu)壤(rang)/植(zhi)物(wu)樣(yang)本(ben)的(de)處理方(fang)法(fa)

植(zhi)物(wu)標(biao)本(ben)的(de)精(jing)采(cai)集(ji)及保(bao)存(cun) 
、 稱(cheng)取(qu)0.g（誤(wu)差±3%以內）新鮮(xian)植(zhi)物(wu)組織樣本(ben)，在液(ye)氮中充(chong)分(fen)研磨(mo)；

2、 加(jia)入ml的(de)提(ti)取(qu)液(ye)（80%甲(jia)醇(chun)）, 置於-20度(du)過夜；

3、 於4度(du)，8000rpm，離(li)心(xin)小(xiao)時，取(qu)上(shang)清(qing)；

4、 上(shang)樣前(qian)加入pH7.4 PBS緩(huan)沖(chong)液(ye)（ml定容(rong)）。混勻(yun)後(hou)室(shi)溫(wen)放置(zhi)30分(fen)鐘，然(ran)後(hou)4度(du)離(li)心(xin)（8000rpm，5分(fen)鐘），取(qu)上(shang)清(qing)並(bing)暫時保存(cun)於4度(du)待用(yong)。

5.植(zhi)物(wu)標(biao)本(ben)中(zhong)相(xiang)關(guan)酶(mei)或蛋(dan)白的(de)測定(ding)：（粗(cu)提(ti)取(qu)）

、 新鮮(xian)植(zhi)物(wu)組織請在液(ye)氮中充(chong)分(fen)研磨(mo)；

2、 加(jia)入樣(yang)品(pin)體積(ji)9倍的(de)提(ti)取(qu)液(ye)（pH 7.4 PBS緩(huan)沖(chong)液(ye)）,3、 請於4度(du)，8000rpm，離(li)心(xin)30分(fen)鐘，取(qu)上(shang)清(qing)並(bing)暫時保存(cun)於4度(du)待用(yong)。

土(tu)壤(rang)：稱(cheng)取(qu)g土(tu)壤(rang)，加(jia)入9g的(de)pH7.2-7.4左(zuo)右的(de)PBS，用(yong)手(shou)工將(jiang)標(biao)本(ben)充(chong)分(fen)混勻(yun)。2-8℃條(tiao)件(jian)離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)），仔細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。分(fen)裝(zhuang)壹(yi)份(fen)待檢(jian)測，其(qi)余(yu)冷凍(dong)備用(yong)，保(bao)存過(guo)程(cheng)中如有(you)沈澱(dian)形(xing)成(cheng)，應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。如果是(shi)測分(fen)泌(mi)蛋(dan)白，直(zhi)接取(qu)上(shang)清(qing)檢(jian)測，測試(shi)細胞(bao)內蛋(dan)白，要(yao)破碎(sui)細胞(bao)。

5.植(zhi)物(wu)標(biao)本(ben)中(zhong)相(xiang)關(guan)酶(mei)或蛋(dan)白的(de)測定(ding)：（粗(cu)提(ti)取(qu)）

、 新鮮(xian)植(zhi)物(wu)組織請在液(ye)氮中充(chong)分(fen)研磨(mo)；

2、 加(jia)入樣(yang)品(pin)體積(ji)9倍的(de)提(ti)取(qu)液(ye)（pH 7.4 PBS緩(huan)沖(chong)液(ye)）,3、 請於4度(du)，8000rpm，離(li)心(xin)30分(fen)鐘，取(qu)上(shang)清(qing)並(bing)暫時保存(cun)於4度(du)待用(yong)。

土(tu)壤(rang)：稱(cheng)取(qu)g土(tu)壤(rang)，加(jia)入9g的(de)pH7.2-7.4左(zuo)右的(de)PBS，用(yong)手(shou)工將(jiang)標(biao)本(ben)充(chong)分(fen)混勻(yun)。2-8℃條(tiao)件(jian)離(li)心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)），仔細收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)。分(fen)裝(zhuang)壹(yi)份(fen)待檢(jian)測，其(qi)余(yu)冷凍(dong)備用(yong)，保(bao)存過(guo)程(cheng)中如有(you)沈澱(dian)形(xing)成(cheng)，應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。如果是(shi)測分(fen)泌(mi)蛋(dan)白，直(zhi)接取(qu)上(shang)清(qing)檢(jian)測，測試(shi)細胞(bao)內蛋(dan)白，要(yao)破碎(sui)細胞(bao)。

6、 上清(qing)液(ye)過C-8固(gu)相(xiang)萃(cui)取(qu)柱。具體步(bu)驟是(shi)： 80%甲(jia)醇(chun)（ml）平(ping)衡(heng)柱→上樣(yang)→收(shou)集(ji)樣(yang)品(pin)→移(yi)開(kai)樣品(pin)後(hou)用(yong)00%甲(jia)醇(chun)（5ml）洗柱→00%yimi（5ml）洗柱→00%甲(jia)醇(chun)（5ml）洗柱→循(xun)環。過(guo)柱後(hou)的樣(yang)本(ben)真(zhen)空(kong)幹(gan)燥(zao)或氮氣吹(chui)幹(gan)，保(bao)存備(bei)用(yong)；