科(ke)研(yan)ELISA試劑盒實(shi)驗背(bei)景深全(quan)部(bu)呈有(you)色原(yuan)因及解決(jue)方案(an)

科(ke)研(yan)ELISA試劑盒實(shi)驗中(zhong)，背景深，全(quan)部(bu)呈有(you)色（通常的Elisa背(bei)景(jing)值OD<0.2）

根(gen)據技術分(fen)析(xi)，可能(neng)存在(zai)的原(yuan)因有(you)壹(yi)下幾(ji)條：

、樣品稀釋(shi)液汙(wu)染(ran)

  解(jie)決(jue)辦法(fa)：棄去稀(xi)釋(shi)液(ye)，重(zhong)新配置(zhi)

2、吸頭重(zhong)復(fu)使用(yong)，未(wei)洗(xi)凈或(huo)消(xiao)毒不*

  解決(jue)辦法(fa)：吸頭盡可能(neng)壹(yi)次(ci)性使用(yong)

3、不正確的孵(fu)育(yu)時(shi)間，溫度（尤其是底(di)物孵(fu)育(yu)的時(shi)間）

  解決(jue)辦法(fa)：zui為(wei)常用(yong)的溫(wen)育(yu)溫(wen)度(du)有(you)37℃和室(shi)溫(wen)，其次(ci)是43℃和2～8℃。*按(an)照說明(ming)書(shu)要(yao)求

4、偶聯抗(kang)體(ti)（streptavidin-HRP）濃度(du)過(guo)高(gao)

  解(jie)決(jue)辦法(fa)：按(an)照說明(ming)書(shu)調整到(dao)合(he)適(shi)的濃(nong)度(du)

5、ELISA板子(zi)不正確的貯(zhu)存

  解(jie)決(jue)辦法(fa)：酶(mei)標(biao)板(ban)貯(zhu)存於(yu)2-8 ℃；使用(yong)結(jie)合力(li)低點(dian)的Elisa板(ban)

6、實(shi)驗過(guo)程(cheng)中(zhong)洗滌不充(chong)分(fen)，洗後未(wei)拍(pai)幹(gan)，樣(yang)品中(zhong)其它(ta)成分殘留或(huo)酶(mei)標(biao)記(ji)物殘(can)留

  解(jie)決(jue)辦法(fa)：洗(xi)液準(zhun)確配制；充(chong)分(fen)洗滌，靜置(zhi)5秒(miao)，*拍幹。加樣或加酶拍板的濾紙(zhi)應(ying)棄去不用(yong)，不要(yao)反(fan)復(fu)使用(yong)，否(fou)則(ze)易(yi)造(zao)成汙染。

7、底(di)物汙(wu)染(ran)，未(wei)避光保(bao)存(cun)，出(chu)現(xian)顏色

解決(jue)辦法(fa)：棄去底(di)物，重(zhong)新配置(zhi)

8、沒有正(zheng)確封(feng)閉(bi)

  解決(jue)辦法(fa)：在(zai)標(biao)準(zhun)品稀釋(shi)液中(zhong)加入(ru)動(dong)物(wu)蛋白(bai)或(huo)延長(chang)封(feng)閉(bi)時間

9、樣本溶(rong)血嚴(yan)重(zhong)

  解決(jue)辦法(fa)：建議使用(yong)非(fei)溶(rong)血或輕微(wei)溶(rong)血樣本(ben)，嚴(yan)重(zhong)溶(rong)血樣本(ben)會(hui)導(dao)致(zhi)背景(jing)偏高。