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各(ge)種ELISA試劑(ji)盒(he)配(pei)置(zhi)方(fang)法匯總(zong)如(ru)下:() ELISA試(shi)驗停止(zhi)液(2) ELISA底物(wu)緩沖(chong)液(3) ELISA試驗(yan)TMB(四(si)甲(jia)基(ji)聯(lian)苯胺(an))運(yun)用(yong)液(4)ELISA試驗(yan)包(bao)被(bei)緩沖(chong)液(5)ELISA試驗(yan)洗刷(shua)緩沖(chong)液(6)ELISA試驗(yan)稀(xi)釋液(7)規(gui)範(fan)品(pin)稀釋液。
() ELISA試驗(yan)停止(zhi)液(2M H2SO4):
蒸餾水78.3ml,逐(zhu)滴(di)參加(jia)濃(nong)硫(liu)酸(suan)(98%)2.7ml。
(2) ELISA底物(wu)緩沖(chong)液(PH5.0磷酸(suan)棗檸檬酸(suan)):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.M 檸檬酸(suan)(9.2克/L) 24.3ml
加(jia)蒸餾水50ml。
(3) ELISA試(shi)驗(yan)包(bao)被(bei)緩沖(chong)液(PH9.6 0.05M碳酸(suan)鹽緩沖(chong)液):
NaHCO3 .59克
NaHCO3 2.93克
加(jia)蒸餾水至000ml。
(4) ELISA試驗TMB(四(si)甲(jia)基(ji)聯(lian)苯胺(an))運(yun)用(yong)液:
TMB(0mg/5ml無(wu)水乙(yi)醇(chun)) 0.5ml
底物(wu)緩沖(chong)液(PH5.5) 0ml
0.75%H2O2 32μl
(5) ELISA試驗(yan)洗刷(shua)緩沖(chong)液(PH7.4 PBS):0.5M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·2H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加(jia)蒸餾水至000ml。
(6)規(gui)範(fan)品(pin)稀釋液:
PBS L配方(fang)pH7.2-7.4.濃(nong)度(du)0.0mol/L:
L酸(suan)二氫鉀(jia)(KH2PO4):0.27g,
L酸(suan)氫二鈉(na)(Na2HPO4):.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
KCl 0.2g,加(jia)去(qu)離(li)子水約(yue)800mL充(chong)分(fen)拌(ban)和(he)溶解,然(ran)後(hou)參加(jia)濃(nong)鹽(yan)酸(suan)或許氫(qing)氧化鈉調pH至7.2-7.4,後(hou)定(ding)容(rong)到L,濃(nong)度(du)為(wei)0mmol/L。
(7) ELISA試驗(yan)稀(xi)釋液:
牛血清白蛋(dan)白(BSA) 0.克
加(jia)洗刷(shua)緩沖(chong)液至00ml
或以羊(yang)血清、兔(tu)血清等血清與洗刷(shua)液配成(cheng)5~0%運(yun)用(yong)。
值(zhi)得壹提(ti)的是有(you)的封(feng)閉(bi)液中含(han)有(you)脫脂(zhi)奶(nai)粉,不(bu)適(shi)合保存(cun)。
為(wei)了保證ELISA試(shi)驗(yan)的準(zhun)確(que)性,試驗操作(zuo)中參加(jia)的緩沖(chong)液和各(ge)組(zu)分壹定(ding)要(yao)準(zhun)確(que),將(jiang)洗刷(shua)液參加(jia)酶(mei)標板(ban)中的時候避(bi)免參加(jia)的試(shi)劑(ji)混(hun)入(ru)別(bie)的壹(yi)個(ge)酶(mei)標孔(kong),謹防(fang)交(jiao)叉汙染。
聯(lian)系方(fang)式
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