大鼠(shu)酶聯免疫分析(xi)操(cao)作步驟

大鼠(shu)ZP酶聯免疫分析(xi)操(cao)作步驟:
.標準品的稀(xi)釋：本(ben)試劑盒(he)提(ti)供原倍(bei)標(biao)準品壹支，用戶(hu)可(ke)按照(zhao)下(xia)列圖(tu)表(biao)在(zai)小(xiao)試管中進(jin)行稀(xi)釋。

2.加(jia)樣(yang)：分別設空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加樣(yang)品及酶(mei)標(biao)試劑，其余各(ge)步操作相同）、標準孔(kong)、待測(ce)樣(yang)品孔(kong)。在酶(mei)標包(bao)被(bei)板(ban)上標準品準確加(jia)樣(yang)50μl，待測(ce)樣(yang)品孔(kong)中先(xian)加樣(yang)品稀釋(shi)液40μl，然(ran)後(hou)再加待測(ce)樣(yang)品0μl（樣(yang)品稀釋(shi)度為5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品加於(yu)酶(mei)標板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量(liang)不觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。
3.溫育：用封(feng)板(ban)膜封(feng)板(ban)後置(zhi)37℃溫育30分(fen)鐘。   
4.配(pei)液：將30倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液用蒸餾(liu)水(shui)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備用
5.洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封(feng)板(ban)膜，棄去(qu)液體(ti)，甩幹(gan)，每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌液，靜置(zhi)30秒(miao)後棄去(qu)，如此重復(fu)5次，拍(pai)幹。
6.加(jia)酶：每(mei)孔(kong)加入酶(mei)標(biao)試劑50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。 
7.溫育：操(cao)作(zuo)同3。
8.洗(xi)滌：操(cao)作同5。
9.顯色：每(mei)孔(kong)先(xian)加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混勻，37℃避(bi)光(guang)顯色0分鐘.
0.終(zhong)止：每(mei)孔(kong)加終(zhong)止液50μl，終(zhong)止反(fan)應(ying)（此時(shi)藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色）。
.測定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依序測(ce)量(liang)各(ge)孔(kong)的吸光度（OD值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加終(zhong)止液後5分鐘以(yi)內(nei)進(jin)行(xing)。