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小(xiao)鼠抗(kang)-胞襯(chen)蛋白(bai)抗體(ti)iggigaelisa試(shi)劑盒(he)樣(yang)本實(shi)驗(yan)前(qian)準(zhun)備:
ELISA試(shi)劑盒(he)液(ye)體(ti)樣本:包括血清、血漿、尿液(ye)、胸(xiong)腹水(shui)、腦(nao)脊液(ye)、細胞培(pei)養(yang)上(shang)清等。
血清
室(shi)溫血液(ye)自(zi)然凝(ning)固(gu)0-20分鐘後,離心(xin)20分鐘左(zuo)右2000-3000轉(zhuan)/分。仔細收集(ji)上(shang)清。保存(cun)過程中(zhong)如有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng),應再次(ci)離心(xin)。
2血漿:
應根(gen)據標本(ben)的要(yao)求(qiu)選擇(ze)EDTA、檸檬酸(suan)鈉或(huo)肝素(su)作為(wei)抗凝(ning)劑,混(hun)合0-20分鐘後,離心(xin)20分鐘左(zuo)右2000-3000轉(zhuan)/分。仔細收集(ji)上(shang)清。保存(cun)過程中(zhong)如有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng),應再次(ci)離心(xin)。
3尿(niao)液(ye):
用(yong)無(wu)菌(jun)管(guan)收集(ji)。離心(xin)20分鐘左(zuo)右2000-3000轉(zhuan)/分。仔細收集(ji)上(shang)清。保存(cun)過程中(zhong)如有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng),應再次(ci)離心(xin)。胸(xiong)腹(fu)水(shui)、腦(nao)脊液(ye)參(can)照此實(shi)行。
4細胞培(pei)養(yang)上(shang)清:
檢(jian)測(ce)分泌性(xing)的成(cheng)份時(shi),用(yong)無(wu)菌(jun)管(guan)收集(ji)。離心(xin)20分鐘左(zuo)右2000-3000轉(zhuan)/分。仔細收集(ji)上(shang)清。
5培(pei)養(yang)細胞
檢(jian)測(ce)細胞內(nei)的成(cheng)份時(shi),用(yong)PBSPH7.2-7.4稀釋(shi)細胞懸(xuan)液(ye),細胞濃(nong)度(du)達(da)到(dao)00萬/ml左(zuo)右。通過反復(fu)凍(dong)融或加入組(zu)織蛋白(bai)萃取(qu)試(shi)劑,以使(shi)細胞破(po)壞(huai)並(bing)放(fang)出(chu)細胞內(nei)成(cheng)份。離心(xin)20分鐘左(zuo)右2000-3000轉(zhuan)/分。仔細收集(ji)上(shang)清。保存(cun)過程中(zhong)如有(you)沈(chen)澱(dian)形(xing)成(cheng),應再次(ci)離心(xin)。
6組(zu)織標本(ben)
切(qie)割標本(ben)後,稱(cheng)取(qu)重(zhong)量(liang)。加(jia)入(ru)壹(yi)定量(liang)的PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮(dan)迅(xun)速冷凍(dong)保存(cun)備(bei)用(yong)。標本(ben)融(rong)化後仍(reng)然(ran)保持2-8℃的溫度(du)。加(jia)入(ru)壹(yi)定量(liang)的PBSPH7.4,或組(zu)織蛋白(bai)萃取(qu)試(shi)劑, 用(yong)手(shou)工(gong)或(huo)勻(yun)漿器將標本(ben)勻(yun)漿化。離心(xin)20分鐘左(zuo)右2000-3000轉(zhuan)/分。仔細收集(ji)上(shang)清。分裝後壹(yi)份待(dai)檢(jian)測(ce),其(qi)余冷凍(dong)備用(yong)。
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