牛(niu)膽(dan)酸(suan)elisa檢(jian)測試劑盒(he)實驗使用(yong)步驟

牛膽酸(suan)elisa檢(jian)測試劑盒(he)實驗使用(yong)步驟：
.加(jia)樣(yang)：分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測樣(yang)品孔(kong)。空(kong)白(bai)孔加(jia)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液00μl，余(yu)孔分別(bie)加(jia)標(biao)準(zhun)品或待(dai)測樣(yang)品00μl，註(zhu)意不(bu)要有氣泡(pao)，加(jia)樣(yang)時將(jiang)樣(yang)品加(jia)於(yu)酶標(biao)板底部(bu)，盡量(liang)不觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混(hun)勻(yun)。給酶標(biao)板覆(fu)膜(mo)，37℃孵育(yu)2小時。為(wei)保(bao)證實驗結果(guo)有效(xiao)性(xing)，每次(ci)實驗請(qing)使用(yong)新(xin)的(de)標(biao)準(zhun)品溶液。
2.棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每個(ge)孔(kong)中加(jia)入(ru)Detection Ab工(gong)作液 00μl(在使用(yong)前(qian)5分鐘內(nei)配制)，酶標(biao)板加(jia)上(shang)覆(fu)膜(mo)，37℃溫育(yu)小(xiao)時。
3.棄(qi)去(qu)孔(kong)內(nei)液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，洗(xi)板(ban) 3次(ci)，每(mei)次浸泡(pao)-2分鐘，大約(yue)350μl /每(mei)孔(kong)，甩(shuai)幹(gan)並在吸水紙(zhi)上輕(qing)拍(pai)將(jiang)孔內(nei)液體(ti)拍(pai)幹。
4.每孔(kong)加(jia)HRP Conjugate工(gong)作液(臨(lin)用前(qian)5分鐘內(nei)配制)00μl，加(jia)上(shang)覆(fu)膜(mo)，37℃溫育(yu)小(xiao)時。
5.棄(qi)去(qu)孔(kong)內(nei)液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，洗(xi)板(ban)5次(ci)，方(fang)法同(tong)步驟3。
6.每(mei)孔(kong)加(jia)底物溶液00μl，酶標(biao)板加(jia)上(shang)覆(fu)膜(mo)37℃避光孵育(yu)5分鐘左(zuo)右(you)(根(gen)據實際顯況酌(zhuo)情(qing)縮短(duan)或延(yan)長(chang)，但不(bu)可(ke)超(chao)過30分鐘。當(dang)標(biao)準(zhun)孔(kong)出(chu)現(xian)明(ming)顯梯度(du)時，即可終(zhong)止)。
7.每孔(kong)加(jia)終(zhong)止液50μl，終(zhong)止反應(ying)，此時藍(lan)色立轉(zhuan)黃色。終止液的(de)加(jia)入(ru)順序(xu)應盡量(liang)與底物液的(de)加(jia)入(ru)順序(xu)相同(tong)。
8.立(li)即用酶標(biao)儀在450nm波長(chang)測量(liang)各(ge)孔的(de)光密度(du)(OD值)。應(ying)提前(qian)打(da)開酶標(biao)儀電(dian)源，預(yu)熱(re)儀器(qi)，設(she)置好(hao)檢(jian)測程序。
9.實驗完(wan)畢(bi)後(hou)將(jiang)未用(yong)完(wan)的(de)試(shi)劑按(an)規(gui)定的保(bao)存溫度(du)放(fang)回冰箱保(bao)存至(zhi)有效(xiao)期(qi)結束。