TRANCE elisa酶(mei)聯(lian)免(mian)疫試劑(ji)盒(he)PCR反應的特異性決定因(yin)素(su)

TRANCE elisa酶聯(lian)免(mian)疫試劑(ji)盒(he)PCR反應的特異性決定因(yin)素(su)：
.引物(wu)與(yu)模板(ban)DNA特異正(zheng)確的結合(he)。
2.堿(jian)基(ji)配(pei)對原(yuan)則。
3. Tag DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反應的忠(zhong)實性。
4.靶基因(yin)的(de)特異性與(yu)保守(shou)性(xing)。
其中引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)正(zheng)確結合(he)是(shi)關(guan)鍵(jian)。引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)結(jie)合(he)及引物(wu)鏈(lian)的延(yan)伸(shen)是(shi)遵(zun)循(xun)堿(jian)基(ji)配對原(yuan)則的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成(cheng)反應的忠(zhong)實性及 Tag DNA聚合(he)醇耐(nai)高(gao)溫(wen)性(xing),使(shi)反應中模板(ban)與(yu)引物(wu)的(de)結(jie)合(he)(復(fu)性(xing))可(ke)以(yi)在較高(gao)的(de)溫(wen)度下(xia)進行(xing),結(jie)合(he)的(de)特異性大大増(増)加(jia)加(jia),被(bei)擴増(増)的靶基因(yin)片(pian)段也(ye)就能保持很高的(de)正(zheng)確度。再通過(guo)選(xuan)擇(ze)特異性和保(bao)守(shou)性(xing)高的靶基因(yin)區,其特異性程(cheng)度就(jiu)更高。
靈(ling)敏(min)度高(gao)
PCR產(chan)物(wu)的(de)生(sheng)成量(liang)是(shi)以(yi)指數(shu)方(fang)式増(増)加(jia)的(de),能將皮克(ke)(pg=0-29)量(liang)級的起始待測(測)模板(ban)擴(kuo)増(増)到微(wei)克(ug=0-69)水(shui)平。能從00萬(wan)個(ge)細胞中(zhong)檢(jian)出壹(yi)個靶細胞;在病毒的(de)檢(jian)測中,PCR的靈敏(min)度可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑(ban)形成單(dan)位(wei));在細菌(jun)學(xue)中zu小檢出(chu)率為(wei)3個(ge)細菌(jun)。
(3)簡便、快(kuai)速(su)
PCR反應用耐高(gao)溫(wen)的(de) Tag DNA聚(ju)合(he)酶(mei),壹(yi)次(ci)性地(di)將(jiang)反應液加(jia)好後,即在DNA擴(kuo)増(増)液和水(shui)浴鍋(guo)上(shang)進行(xing)變(bian)性(xing)退火(huo)-延(yan)伸(shen)反應,壹般(ban)在2-4小(xiao)時(shi)完成(cheng)擴増(増)反應。擴増(増)產(chan)物(wu)壹(yi)般(ban)用電泳(yong)分析(xi),不(bu)壹(yi)定要(yao)用同位(wei)素(su),無(wu)放射(she)性汙(wu)染(ran)、易(yi)推廣。
(4)對標本的(de)純度要(yao)求低
不(bu)需要(yao)分離(li)病毒或(huo)細菌(jun)及培養(yang)細胞,DNA粗(cu)制(zhi)品及總RNA均可(ke)作(zuo)為(wei)擴(kuo)増(増)模板(ban)。可(ke)直(zhi)接用臨床(chuang)標本如血(xue)液(ye)、體腔(qiang)液、洗(xi)嗽液(ye)、毛(mao)發(fa)、細胞、活PCR技(ji)術(shu)概論(lun)。