ELISA試(shi)劑盒(he)實驗(yan)測(ce)定標(biao)本分(fen)解(jie)

正確實驗(yan)我(wo)們(men)才可(ke)以(yi)得到(dao)有(you)效(xiao)的數(shu)據(ju)，要(yao)是(shi)操(cao)作錯(cuo)誤(wu)不(bu)僅會得到(dao)的(de)數據不(bu)準(zhun)，還浪(lang)費(fei)我(wo)們(men)時(shi)間(jian)。下(xia)面(mian)給(gei)大(da)家(jia)講解(jie)壹(yi)下(xia)ELISA試劑盒(he)實驗(yan)測(ce)定標(biao)本分(fen)解(jie)。

壹(yi)、標(biao)本溶(rong)血

由(you)於(yu)各(ge)種(zhong)人為原因(yin)引(yin)起的(de)標本溶(rong)血，均(jun)可(ke)因(yin)紅(hong)細(xi)胞破(po)壞溶解(jie)時(shi)釋(shi)放(fang)出(chu)大(da)量具有(you)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)活(huo)性的血紅(hong)蛋白(bai)，在(zai)以(yi)辣根(gen)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)為(wei)標記的ELISA測(ce)定中(zhong)，會(hui)導(dao)致非(fei)特(te)異性顯色，幹擾測(ce)定結果。為克服(fu)上述(shu)幹擾作(zuo)用，標本采(cai)集(ji)時(shi)必(bi)須(xu)註意避(bi)免(mian)溶(rong)血。

二(er)、標(biao)本受(shou)細(xi)菌(jun)汙染

因(yin)菌(jun)體中(zhong)可(ke)能含有(you)內(nei)源性辣根(gen)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)，因(yin)此，被(bei)細(xi)菌(jun)汙染的標(biao)本同(tong)溶血標(biao)本壹(yi)樣(yang)，亦可(ke)產(chan)生非(fei)特(te)異性顯色而幹擾測(ce)定結果。

三(san)、標本保存(cun)不當(dang)

在冰箱中保存(cun)過(guo)久的(de)標(biao)本，血清中IgG可(ke)聚合(he)成(cheng)多(duo)聚體、AFP可(ke)形(xing)成(cheng)二(er)聚體，在(zai)間(jian)接法ELISA測(ce)定中(zhong)會(hui)導(dao)致本底(di)過(guo)深、甚(shen)至(zhi)造(zao)成(cheng)假陽性(xing)；標(biao)本放(fang)置時(shi)間(jian)過(guo)長（如(ru)壹(yi)天(tian)以(yi)上），有(you)時(shi)抗原或抗體免(mian)疫(yi)活(huo)性減(jian)弱，亦可(ke)出(chu)現(xian)假陰(yin)性。為(wei)克服(fu)上述(shu)幹擾，ELISA測(ce)定的(de)血清標本宜為新(xin)鮮(xian)采(cai)集(ji)；如(ru)不能立即測(ce)定，5天(tian)內(nei)測(ce)定的(de)血清標本可(ke)存(cun)放(fang)於4℃，周(zhou)後測(ce)定的(de)血清標本應(ying)低溫凍(dong)存(cun)；凍(dong)存(cun)後融(rong)解(jie)的(de)標本，蛋白(bai)質(zhi)局(ju)部濃縮，分(fen)布不(bu)均，應(ying)充(chong)分(fen)混(hun)合(he)後(hou)再(zai)測(ce)定，但(dan)混(hun)勻(yun)時(shi)應(ying)輕(qing)柔(rou)，不可(ke)強烈(lie)振(zhen)蕩。

四(si)、標本凝(ning)集(ji)不(bu)全

在沒有(you)促凝(ning)劑和(he)抗凝劑存(cun)在的(de)情況下，正常(chang)血液采集(ji)後(hou)/2~2h開始凝固，8~24h*凝固。臨(lin)床(chuang)檢驗(yan)工(gong)作中，有(you)時(shi)為(wei)了(le)爭(zheng)取(qu)時(shi)間(jian)快(kuai)速檢測(ce)，常(chang)在血液還未(wei)開始凝固時(shi)即(ji)強行離(li)心分(fen)離血清，此時(shi)的(de)血清中仍(reng)殘(can)留(liu)部分(fen)纖維蛋白(bai)原(yuan)，在ELISA測(ce)定過(guo)程(cheng)中(zhong)可(ke)以(yi)形(xing)成(cheng)肉(rou)眼可(ke)見(jian)的纖維蛋白(bai)塊，易造成(cheng)假陽性(xing)結果；這(zhe)類情(qing)況於次(ci)日(ri)復(fu)查(zha)時(shi)因(yin)血凝(ning)已*，血清中不(bu)再(zai)有(you)纖維蛋白(bai)原(yuan)存(cun)在，故(gu)復(fu)查(zha)結果變(bian)為陰(yin)性。為(wei)避(bi)免(mian)上述(shu)幹擾作(zuo)用，解(jie)決(jue)的辦(ban)法是(shi)血液標本采(cai)集(ji)後(hou)必(bi)須(xu)使其充(chong)分(fen)凝固(gu)後再(zai)分(fen)離血清，或標本采(cai)集(ji)時(shi)用帶分(fen)離膠的(de)或於中加(jia)入適(shi)當的(de)促凝(ning)劑。

五(wu)、標本管(guan)中添(tian)加物(wu)質(zhi)的(de)影(ying)響(xiang)

抗凝劑（如(ru)肝素，EDTA）、酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑（如(ru)NaN3可(ke)抑(yi)制(zhi)ELISA系(xi)統(tong)中(zhong)辣根(gen)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)活(huo)性）及(ji)快(kuai)速分(fen)離血清的分(fen)離膠等(deng)均(jun)對ELISA測(ce)定有(you)壹(yi)定幹擾作(zuo)用。

通過(guo)以(yi)上的(de)分(fen)析和(he)總(zong)結，臨(lin)床(chuang)檢驗(yan)ELISA測(ce)定中(zhong)出(chu)現(xian)假陽性(xing)或假陰(yin)性等(deng)錯(cuo)誤(wu)的(de)結果，排除ELISA試(shi)劑盒(he)因(yin)素和(he)操(cao)作因(yin)素，再(zai)有(you)就(jiu)是(shi)從標本因(yin)素進行分(fen)析，並應采(cai)取相應(ying)措(cuo)施(shi)排除幹擾，從而確保檢測(ce)結果的準(zhun)確性。