齒(chi)垢密(mi)螺旋(xuan)體(ti)PCR檢測(ce)試劑盒(he)免(mian)產生非特異(yi)性(xing)條帶(dai)

齒垢密(mi)螺旋(xuan)體(ti)PCR檢測(ce)試劑盒(he)免(mian)產生非特異(yi)性(xing)條帶(dai):

)用(yong)RT陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)檢測(ce)是(shi)否被(bei)基(ji)因組(zu)DNA汙(wu)染。如果RT陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)的PCR結(jie)果也(ye)顯(xian)示(shi)同(tong)樣(yang)條帶(dai)，則(ze)需要(yao)用(yong)DNase I重(zhong)新處理(li)樣(yang)品(pin)。

2)在(zai)PCR反(fan)應中(zhong)，非特異(yi)的起(qi)始擴增(zeng)將導致產(chan)生非特異(yi)性(xing)結(jie)果。在(zai)低(di)於引物(wu)Tm 2至(zhi)5℃的溫(wen)度下(xia)進(jin)行(xing)退火，降低(di)鎂離子或(huo)是目的DNA的量將減少非特異(yi)性(xing)結(jie)果的產(chan)生。

3)由(you)於mRNA剪切(qie)方式的不同(tong)，根(gen)據(ju)選擇(ze)引(yin)物(wu)的不同(tong)將導致產(chan)生不同(tong)的RT-PCR結(jie)果。

4. 產(chan)生彌(mi)散（smear）條帶(dai)

)在(zai)PCR反應體(ti)系中壹(yi)鏈(lian)產(chan)物的含量過高

2)減少引(yin)物(wu)的用(yong)量

3)優化PCR反(fan)應條件/減(jian)少PCR的循環次(ci)數

4)在用(yong)DNase處(chu)理被(bei)DNA汙(wu)染(ran)的RNA樣(yang)品時(shi)，其(qi)產(chan)生的寡(gua)核苷酸片段(duan)會(hui)產生非特異(yi)性(xing)擴增(zeng)，壹(yi)般(ban)會(hui)顯(xian)示(shi)為(wei)彌(mi)散背景(jing)。

5. 產(chan)生大(da)分子量的彌(mi)散條帶(dai)

)大(da)多數情(qing)況下(xia)是由於退火溫(wen)度過(guo)低(di)而導致的非特異(yi)性(xing)的起(qi)始及延伸(shen)產(chan)生的

2)對(dui)於長片段(duan)的PCR，建(jian)議將反應體(ti)系中cDNA的濃(nong)度稀(xi)釋(shi)至(zhi):0（或(huo):00-:200）

6. 在無反(fan)轉(zhuan)錄酶的情(qing)況下(xia)，對照(zhao)RNA獲得擴增(zeng)結(jie)果詳細(xi)解析關(guan)於Elisa試劑盒(he)的儲(chu)存於有(you)效(xiao)期(qi)多久(jiu)