人(ren)VEGFR3elisa檢(jian)測試劑盒樣(yang)本處(chu)理及要求(qiu):
.血清:室溫(wen)血(xue)液(ye)自(zi)然(ran)凝(ning)固0-20分鐘,離(li)心20分鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。
仔(zai)細收(shou)集(ji)上清,保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中如出現(xian)沈澱,應再次離(li)心。
2. 血(xue)漿(jiang):應根據(ju)標本的要求(qiu)選擇(ze)EDTA或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉(na)作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑,混合(he)0-20分鐘後(hou),離(li)心20分鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上清,保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中如有(you)沈澱形(xing)成,應該再次(ci)離(li)心。
3. 尿液(ye):用(yong)無(wu)菌(jun)管(guan)收(shou)集(ji),離(li)心20分鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上清,保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中如有(you)沈澱形(xing)成,應再次離(li)心。胸(xiong)腹(fu)水、腦(nao)脊液(ye)參(can)照(zhao)實行。
4. 細胞(bao)培養(yang)上清:檢(jian)測分泌(mi)性(xing)的成(cheng)份時,用(yong)無(wu)菌(jun)管(guan)收(shou)集(ji)。離(li)心20分鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上清。檢(jian)測細胞(bao)內(nei)的(de)成份時,用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞(bao)懸(xuan)液(ye),細胞(bao)濃(nong)度(du)達(da)到00萬(wan)/ml左(zuo)右。通過(guo)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong),以(yi)使(shi)細胞(bao)破(po)壞(huai)並放出(chu)細胞(bao)內(nei)成(cheng)份。離(li)心20分鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上清。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中如有(you)沈澱形(xing)成,應再次離(li)心。
5. 組織標本:切割標本後(hou),稱(cheng)取重(zhong)量。加(jia)入壹定量的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮(dan)迅速(su)冷凍(dong)保(bao)存(cun)備用(yong)。標本融(rong)化(hua)後(hou)仍(reng)然(ran)保(bao)持(chi)2-8℃的溫度(du)。加(jia)入壹定量的(de)PBS(PH7.4),用(yong)手工(gong)或(huo)勻(yun)漿(jiang)器將標本勻漿(jiang)充(chong)分。離(li)心20分鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細收(shou)集(ji)上清。分裝(zhuang)後(hou)壹份待檢(jian)測,其(qi)余(yu)冷凍(dong)備用(yong)。
6. 標本采(cai)集(ji)後(hou)盡(jin)早(zao)進(jin)行提(ti)取,提(ti)取按(an)相關(guan)文獻(xian)進(jin)行,提(ti)取後(hou)應盡快進行實驗(yan)。若(ruo)不能(neng)馬上進(jin)行試驗(yan),可(ke)將(jiang)標本放於(yu)-20℃保(bao)存(cun),但應避免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong).
7. 不能(neng)檢(jian)測含(han)NaN3的(de)樣(yang)品(pin),因NaN3抑制(zhi)辣(la)根過(guo)氧(yang)化(hua)物酶的(HRP)活性(xing)。
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