紮(zha)伊爾(er)埃(ai)博拉(la)病(bing)毒(du)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒使用(yong)方法(fa)

紮(zha)伊爾(er)埃(ai)博拉(la)病(bing)毒(du)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒使用(yong)方法(fa)：

測(ce)定(ding)法(fa)的靈敏度(du)來(lai)自(zi)作為報(bao)告(gao)的酶。*，酶是壹種有機催化劑(ji)，很(hen)少量(liang)的酶即(ji)可(ke)誘(you)導大(da)量的催化反(fan)應(ying)，產生(sheng)可(ke)供(gong)觀察(cha)的顯色反應(ying)現象(xiang)。因此該(gai)體(ti)系常(chang)被(bei)稱為酶(mei)放(fang)大體(ti)系。
. 標(biao)準(zhun)品的稀釋(shi)：本(ben)試(shi)劑(ji)盒提供(gong)原倍標(biao)準(zhun)品壹支，用戶可(ke)按照下列圖表在(zai)小(xiao)試(shi)管(guan)中(zhong)進(jin)行(xing)稀(xi)釋(shi)。   24μg/ml    5號(hao)標(biao)準(zhun)品    50μl的原倍標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)50μl標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)
 2μg/ml    4號(hao)標(biao)準(zhun)品    50μl的5號(hao)標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)50μl標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)
 6μg/ml     3號(hao)標(biao)準(zhun)品    50μl的4號(hao)標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)50μl標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)
 3μg/ml     2號(hao)標(biao)準(zhun)品    50μl的3號(hao)標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)50μl標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)
 .5μg/ml   號(hao)標(biao)準(zhun)品    50μl的2號(hao)標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)50μl標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)
2. 加(jia)樣(yang)：分別設空白(bai)孔(kong)、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在(zai)酶(mei)標(biao)包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標(biao)準(zhun)品準(zhun)確加(jia)樣(yang)50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然(ran)後再加(jia)待(dai)測樣(yang)品(pin)0μl（樣(yang)品(pin)終稀釋(shi)度(du)為5倍）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底(di)部，盡量不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕輕晃動(dong)混勻。|
3. 溫(wen)育(yu)：用封板(ban)膜(mo)封板(ban)後置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。   
4. 配(pei)液：將(jiang)30倍濃縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)用蒸(zheng)餾水(shui)30倍稀釋(shi)後備(bei)用
5. 洗(xi)滌(di)：小(xiao)心揭掉(diao)封板(ban)膜(mo)，棄去液(ye)體(ti)，甩幹(gan)，每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置30秒後棄(qi)去，如(ru)此(ci)重(zhong)復5次，拍幹(gan)。
6. 加酶(mei)：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)酶標(biao)試(shi)劑(ji)50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。
7. 溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同(tong)3。
8. 洗(xi)滌(di)：操(cao)作同(tong)5。
9. 顯(xian)色：每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入(ru)顯色劑A50μl，再加(jia)入(ru)顯色劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩混勻，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色5分鐘.
0. 終止(zhi)：每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應(ying)（此時(shi)藍色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色）。
. 測定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零，450nm波長依(yi)序(xu)測量各孔(kong)的吸光(guang)度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定應(ying)在(zai)加(jia)終止(zhi)液(ye)後5分鐘以(yi)內(nei)進(jin)行(xing)。

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