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兔(tu)子(zi)D二(er)聚體(ti)elisa檢測(ce)試劑(ji)盒樣(yang)本(ben)實驗(yan)前(qian)準備:
ELISA試劑(ji)盒液(ye)體(ti)樣(yang)本(ben):包括(kuo)血清(qing)、血漿(jiang)、尿(niao)液(ye)、胸(xiong)腹(fu)水、腦(nao)脊液(ye)、細胞(bao)培(pei)養上清(qing)等(deng)。
()血清(qing)
室(shi)溫(wen)血液(ye)自(zi)然(ran)凝固0-20分鐘(zhong)後,離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收集上清(qing)。保存過(guo)程中(zhong)如有沈澱形成,應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。
(2)血漿(jiang):
應(ying)根據標(biao)本(ben)的(de)要求(qiu)選(xuan)擇EDTA、檸檬酸(suan)鈉(na)或(huo)肝素作為抗凝劑(ji),混合(he)0-20分鐘(zhong)後,離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收集上清(qing)。保存過(guo)程中(zhong)如有沈澱形成,應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。
(3)尿液(ye):
用(yong)無(wu)菌管(guan)收集。離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收集上清(qing)。保存過(guo)程中(zhong)如有沈澱形成,應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。胸腹(fu)水、腦(nao)脊液(ye)參(can)照(zhao)此(ci)實行(xing)。
(4)細胞(bao)培(pei)養上清(qing):
檢測(ce)分泌性(xing)的(de)成份(fen)時(shi),用(yong)無(wu)菌管(guan)收集。離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收集上清(qing)。
(5)培(pei)養細胞(bao)
檢測(ce)細胞(bao)內(nei)的(de)成份(fen)時(shi),用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細胞(bao)懸(xuan)液(ye),細胞(bao)濃(nong)度達到(dao)00萬(wan)/ml左(zuo)右(you)。通過反(fan)復(fu)凍融或(huo)加入(ru)組(zu)織蛋白(bai)萃取(qu)試劑(ji),以使(shi)細胞(bao)破(po)壞並(bing)放出細胞(bao)內(nei)成份。離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收集上清(qing)。保存過(guo)程中(zhong)如有沈澱形成,應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。
(6)組(zu)織標本(ben)
切(qie)割標(biao)本(ben)後,稱取(qu)重(zhong)量。加入(ru)壹定量的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮(dan)迅速冷(leng)凍保存備用(yong)。標(biao)本(ben)融化(hua)後仍(reng)然(ran)保持2-8℃的(de)溫(wen)度。加(jia)入(ru)壹定量的(de)PBS(PH7.4),或(huo)組(zu)織蛋白(bai)萃取(qu)試劑(ji), 用(yong)手工(gong)或(huo)勻漿(jiang)器(qi)將標本(ben)勻漿(jiang)化(hua)。離(li)心(xin)20分鐘(zhong)左右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細收集上清(qing)。分裝(zhuang)後壹份待檢測(ce),其余(yu)冷(leng)凍備用(yong)。
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