當前(qian)位置(zhi):首頁 > 技(ji)術(shu)文章(zhang) > 野兔(tu)熱(Tul)核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)對外源(yuan)性幹擾因素進(jin)行簡(jian)要說明
野(ye)兔熱(Tul)核(he)酸(suan)檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)對外源(yuan)性幹擾因素進(jin)行簡(jian)要說明:
()標(biao)本(ben)溶(rong)血(xue) 要註意(yi)避免出現嚴(yan)重溶(rong)血(xue)。血(xue)紅蛋白(bai)中(zhong)含有血(xue)紅素基團,其(qi)具(ju)有(you)類(lei)過(guo)氧化物的(de)活性,因此(ci),在(zai)以(yi)辣根過(guo)氧化物酶(mei)(horseradish peroxidase,HRP)為標(biao)記酶(mei)的(de)ELISA測(ce)定中,如(ru)果血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)中血(xue)紅蛋白(bai)濃度(du)較(jiao)高(gao),則其(qi)就很(hen)容(rong)易在(zai)溫育過(guo)程中(zhong)吸(xi)附(fu)於(yu)固(gu)相,從(cong)而與後面(mian)加入的(de)底(di)物(wu)反應顯色(se)。
(2)標(biao)本(ben)被(bei)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran) 標(biao)本(ben)的(de)采集及血(xue)清(qing)分離(li)要(yao)註意(yi)盡(jin)量避免細菌汙染(ran)。細菌(jun)菌體中除(chu)可(ke)能(neng)含有內(nei)源(yuan)酶(mei)對測(ce)定產生(sheng)非特異性(xing)幹(gan)擾外,還可(ke)能(neng)對抗(kang)原(yuan)抗(kang)體等(deng)蛋(dan)白(bai)產生(sheng)分解(jie)作用(yong)。另外(wai)標(biao)本(ben)在保(bao)存(cun)中出(chu)現渾(hun)濁或絮狀(zhuang)物時(shi),應離(li)心沈澱(dian)後取上清(qing)檢測(ce)。
(3)標(biao)本(ben)貯存(cun)時(shi)間(jian)過(guo)長 標(biao)本(ben)在低(di)溫下保存(cun)時(shi)間(jian)過(guo)長,IgG可(ke)聚(ju)合成(cheng)多(duo)聚(ju)體(ti),在間(jian)接法(fa)ELISA測(ce)定中會導致(zhi)本(ben)底加深(shen)、甚至出現假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果。通(tong)常(chang)情況下血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)可(ke)在(zai)2~8℃下保存(cun)l周,冷凍保(bao)存(cun)時(shi)間(jian)會更(geng)長,但對(dui)於(yu)抗(kang)體或(huo)抗(kang)原(yuan)含量低(di)的(de)標(biao)本(ben)而言,則可(ke)能(neng)會因(yin)抗(kang)體掉(diao)價(jia)、抗(kang)原(yuan)分解(jie)而出(chu)現假(jia)陰性結(jie)果。
(4)ELISA試(shi)劑(ji)盒標(biao)本(ben)凝固(gu)不(bu)全 血(xue)液通(tong)常(chang)在(zai)采集後半(ban)小時(shi)後開始(shi)凝(ning)固(gu),8~24h*凝(ning)固(gu)。如(ru)果在(zai)血(xue)液未(wei)凝(ning)固(gu)時(shi)即(ji)離(li)心分離(li)血(xue)清(qing),則可(ke)因(yin)纖維蛋(dan)白(bai)原(yuan)非特異吸(xi)附(fu)於(yu)微(wei)孔而造成(cheng)假(jia)陽性結(jie)果。為(wei)了縮短(duan)標(biao)本(ben)處(chu)理時(shi)間(jian),可(ke)以(yi)在離(li)心前(qian)將(jiang)血(xue)液標(biao)本(ben)置於(yu)溫箱中(zhong)溫育或(huo)者采用(yong)帶分離(li)膠(jiao)的(de)或(huo)於(yu)中(zhong)加入適(shi)當的(de)促(cu)凝(ning)劑(ji)以加速(su)血(xue)清(qing)的(de)分離(li)。
(5)冷(leng)凍保(bao)存(cun)標(biao)本(ben)避免反復凍融(rong) 標(biao)本(ben)的(de)反復凍融(rong)會因(yin)其(qi)所(suo)產生(sheng)的(de)機械剪切力(li)對標(biao)本(ben)中的(de)蛋(dan)白(bai)等(deng)分子(zi)產生(sheng)破壞(huai)作用(yong),使抗(kang)體效價跌(die)落(luo)從(cong)而引(yin)起(qi)假(jia)陰性結(jie)果,ELISA試(shi)劑(ji)盒所(suo)以(yi)測(ce)抗(kang)體的(de)血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)如(ru)需(xu)保(bao)存(cun)作多(duo)次(ci)檢測(ce),宜(yi)少(shao)量(liang)分裝(zhuang)凍存(cun)。此(ci)外(wai),標(biao)本(ben)在凍存(cun)時(shi)會因(yin)蛋白(bai)質(zhi)局部濃縮,分布(bu)不(bu)均,因(yin)此(ci)重(zhong)新融(rong)解(jie)的(de)標(biao)本(ben)必(bi)須混勻,但不(bu)要(yao)進(jin)行劇烈振蕩(dang),反復顛(dian)倒即(ji)可(ke)。
掃(sao)碼(ma)加微(wei)信(xin)
移動端(duan)瀏覽