RANKL elisa酶聯免(mian)疫試劑盒(he)間(jian)接法步驟

RANKL elisa酶聯免(mian)疫試劑盒(he)間(jian)接法步驟：
() 抗原包(bao)被：用包被液將(jiang)PEDV抗原作(zuo)∶5稀(xi)釋包被反應(ying)板(ban)，每(mei)孔00μl，同(tong)時(shi)設陰性(xing)細胞培養物對(dui)照(zhao)孔(kong)，置(zhi)4℃過夜。
(2) 洗(xi)滌(di)：用洗滌(di)液(ye)洗(xi)滌(di)2次，每(mei)次2min，瀝幹。
(3) 加入(ru)被檢(jian)血(xue)清(qing)：用保(bao)溫(wen)液將(jiang)被檢(jian)血(xue)清(qing)作(zuo)∶00稀(xi)釋，加入反應(ying)板(ban)相(xiang)鄰(lin)的兩個(ge)孔(kong)中，每(mei)孔00μl。同(tong)時(shi)作(zuo)陰(yin)、陽性(xing)標準血(xue)清(qing)對(dui)照(zhao)，置(zhi)37℃孵(fu)育(yu)h。
(4) 洗(xi)滌(di)3次：方法同(tong)上。
(5) 加入(ru)酶結(jie)合物：用保(bao)溫(wen)液將(jiang)酶結(jie)合物作(zuo)∶4 000稀(xi)釋，加入反應(ying)孔(kong)中(zhong)，每(mei)孔00μl，置(zhi)37℃孵(fu)育(yu)h。
(6) 洗(xi)滌(di)3次：方法同(tong)上。
(7) 加入(ru)底(di)物：每(mei)孔00μl，置(zhi)室溫(wen)暗盒(he)內(nei)顯(xian)色20min。
(8) 加(jia)入(ru)終(zhong)止液：每(mei)孔50μl，靜(jing)置5min。
(9) 測(ce)定(ding)OD值：用檢(jian)測(ce)儀，於(yu)492nm波長(chang)，按(an)儀(yi)器使(shi)用及制定(ding)標準要求(qiu)調節儀器，測(ce)定(ding)各反應(ying)孔(kong)的OD值，記(ji)錄結果。

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