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          皮裏(li)陶病毒(du)RT-LAMP試(shi)劑(ji)盒反應五要素(su)

          更新時(shi)間:2021-01-12 點(dian)擊(ji)量(liang):674

          皮裏(li)陶病毒(du)RT-LAMP試(shi)劑(ji)盒反應五要素(su):

          參加PCR反應的物(wu)質主要有五種即引物(wu)、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

          引物(wu): 引物(wu)是(shi)PCR特(te)異性反應的關鍵(jian),PCR 產(chan)物(wu)的特異性取決於(yu)引物(wu)與(yu)模(mo)板DNA互(hu)補(bu)的(de)程度。理(li)論上(shang),只要知(zhi)道(dao)任(ren)何壹段(duan)模板DNA序(xu)列(lie),就能(neng)按(an)其設計(ji)互(hu)補(bu)的(de)寡核(he)苷(gan)酸鏈(lian)做(zuo)引物(wu),利用(yong)PCR就可(ke)將(jiang)模板DNA在(zai)體(ti)外(wai)大(da)量(liang)擴(kuo)增(zeng)。

          設計(ji)引物(wu)應遵循(xun)以(yi)下(xia)原(yuan)則(ze):

          ①引物(wu)長(chang)度(du): 5-30bp,常(chang)用(yong)為20bp左右。

          ②引物(wu)擴(kuo)增(zeng)跨度: 以200-500bp為宜,特(te)定條(tiao)件(jian)下可(ke)擴(kuo)增(zeng)長(chang)至(zhi)0kb的(de)片(pian)段(duan)。

          ③引物(wu)堿基:G+C含(han)量以(yi)40-60%為宜,G+C太少擴(kuo)增(zeng)效果不(bu)佳,G+C過(guo)多易(yi)出(chu)現(xian)非(fei)特(te)異條帶。ATGC好隨機分(fen)布,避(bi)免(mian)5個以(yi)上(shang)的(de)嘌(piao)呤(ling)或(huo)嘧(mi)啶(ding)核(he)苷(gan)酸的(de)成(cheng)串排(pai)列(lie)。 

          ④避(bi)免(mian)引物(wu)內部出(chu)現(xian)二(er)級(ji)結構(gou),避(bi)免(mian)兩(liang)條引物(wu)間互(hu)補(bu),特(te)別(bie)是(shi)3’端的互(hu)補(bu),否(fou)則(ze)會形(xing)成(cheng)引物(wu)二聚(ju)體(ti),產(chan)生(sheng)非(fei)特(te)異的擴(kuo)增(zeng)條帶(dai)。

          ⑤引物(wu)3’端的堿基,特(te)別(bie)是(shi)zui末及倒數(shu)*個堿基,應嚴(yan)格要求配(pei)對,以(yi)避(bi)免(mian)因末端堿基不(bu)配對而導致(zhi)PCR失(shi)敗。 

          ⑥引物(wu)中(zhong)有或能(neng)加上(shang)合(he)適的酶切(qie)位點(dian),被(bei)擴(kuo)增(zeng)的靶(ba)序(xu)列(lie)zui有適宜的(de)酶切(qie)位點(dian),這對酶切(qie)分(fen)析(xi)或分(fen)子克(ke)隆很有好處。

          ⑦引物(wu)的特異性:引物(wu)應與(yu)核(he)酸(suan)序(xu)列(lie)數(shu)據(ju)庫(ku)的(de)其它序(xu)列(lie)無明(ming)顯(xian)同源性。 

          人腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子誘導(dao)基(ji)因6蛋白(bai)(TNFAIP6)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關弱(ruo)雕(diao)亡誘導(dao)因子(TWEAK)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關弱(ruo)雕(diao)亡誘導(dao)因子(TWEAK)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關激(ji)活誘導(dao)因子(TRANCE)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關激(ji)活誘導(dao)因子(TRANCE)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)受(shou)體(ti)3(TRAIL-R3)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)受(shou)體(ti)3(TRAIL-R3)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)受(shou)體(ti)2(TRAIL-R2/DR5)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)受(shou)體(ti)2(TRAIL-R2/DR5)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)4(TRAIL-R4)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)4(TRAIL-R4)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)3(TRAIL-R3)ELISA試(shi)劑(ji)盒
          人(ren)腫(zhong)瘤(liu)壞死(si)因子相關雕(diao)亡誘導(dao)配(pei)體(ti)3(TRAIL-R3)ELISA試(shi)劑(ji)盒

           

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