當前位(wei)置:首(shou)頁 > 技(ji)術(shu)文章 > 佛手染料法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒陽(yang)性(xing)對照有目的條(tiao)帶幾個(ge)問(wen)題
佛手染料法PCR鑒定(ding)試劑(ji)盒陽(yang)性(xing)對照有目的條(tiao)帶,待測(ce)樣(yang)本無(wu)條帶或條帶弱(ruo)的幾(ji)個(ge)問(wen)題:
、不當儲(chu)存或儲(chu)存引(yin)起(qi)試(shi)劑(ji)活(huo)性(xing)喪(sang)失(shi)。
2、加(jia)入組織(zhi)裂(lie)解(jie)液過(guo)量。
3、樣本裂(lie)解(jie)混合(he)液保(bao)存(cun)不當或保存(cun)時間(jian)過(guo)久,DNA基因(yin)組(zu)已經(jing)降(jiang)解(jie)。
4、模(mo)板加(jia)入量不適(shi)合(he)。
5、PCR循環(huan)數(shu)不足(zu)。
解(jie)決(jue)方法:
、使用新(xin)鮮的試(shi)劑(ji)。
2、增(zeng)大反應(ying)體(ti)系,或減(jian)少(shao)裂(lie)解(jie)液的用量。
3、裂(lie)解(jie)混合(he)液液可在(zai)4℃保(bao)存2-3天(tian),盡量使用新(xin)制(zhi)備的裂(lie)解(jie)液混合(he)液進(jin)行(xing)PCR。
4、在(zai)反應(ying)體(ti)系0-20%範圍內(nei)優(you)化(hua)模(mo)板加(jia)入量。反應(ying)效性(xing)能較(jiao)差時,可以(yi)降模(mo)板濃度調(tiao)節到(dao)低(di)於0%的範(fan)圍(wei)。
5、適(shi)當增(zeng)加(jia)PCR的循(xun)環(huan)數(shu),在(zai)35-40循(xun)環為(wei)佳(jia)。因為(wei)模(mo)板復(fu)雜,壹般PCR反應(ying)要(yao)比(bi)用純(chun)化(hua)的 DNA模(mo)板多(duo)5-0個(ge)循(xun)環(huan)為(wei)佳(jia)。
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