鴨環(huan)磷(lin)酸鳥(niao)苷(gan)(cGMP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)樣(yang)本(ben)處理及(ji)要(yao)求:
. 血(xue)清(qing):室(shi)溫血(xue)液(ye)自(zi)然(ran)凝固(gu)0-20分(fen)鐘(zhong),離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing),保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如出(chu)現沈(chen)澱(dian),應再(zai)次(ci)離心。
2. 血(xue)漿:應根(gen)據(ju)標本(ben)的要(yao)求選(xuan)擇(ze)EDTA或檸檬(meng)酸鈉(na)作為抗凝劑(ji),混(hun)合0-20分(fen)鐘(zhong)後,離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing),保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有(you)沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應該再(zai)次(ci)離心。
3. 尿(niao)液:用(yong)無(wu)菌(jun)管收(shou)集,離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing),保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有(you)沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再(zai)次(ci)離心。胸(xiong)腹水(shui)、腦脊液(ye)參(can)照(zhao)實行。
4. 細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing):檢(jian)測分(fen)泌性(xing)的(de)成份(fen)時,用無(wu)菌(jun)管收(shou)集。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)。檢(jian)測細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xi)胞(bao)懸液(ye),細(xi)胞(bao)濃度(du)達(da)到00萬/ml左右(you)。通(tong)過(guo)反復(fu)凍融,以使細(xi)胞(bao)破(po)壞(huai)並(bing)放出(chu)細(xi)胞(bao)內(nei)成(cheng)份。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)。保存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有(you)沈(chen)澱(dian)形成(cheng),應再(zai)次(ci)離心。
5. 組(zu)織(zhi)標本:切(qie)割標(biao)本後,稱取重量(liang)。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS,PH7.4。用液(ye)氮(dan)迅速(su)冷(leng)凍保存(cun)備用。標(biao)本融化(hua)後仍然(ran)保持(chi)2-8℃的(de)溫(wen)度(du)。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS(PH7.4),用手工或勻(yun)漿器(qi)將標本勻(yun)漿充(chong)分(fen)。離心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收(shou)集上(shang)清(qing)。分(fen)裝後壹(yi)份待檢測,其余冷(leng)凍備用。
6. 標(biao)本采集後盡早(zao)進行提取(qu),提取(qu)按(an)相(xiang)關(guan)文獻(xian)進行,提取(qu)後應盡快(kuai)進行實驗。若(ruo)不能馬(ma)上(shang)進行試(shi)驗,可將標本放於(yu)-20℃保存(cun),但(dan)應避(bi)免(mian)反復(fu)凍融.
7. 不(bu)能檢(jian)測(ce)含NaN3的樣(yang)品(pin),因(yin)NaN3抑制辣(la)根(gen)過氧(yang)化(hua)物酶的(de)(HRP)活性(xing)。
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