丙型(xing)肝(gan)炎病(bing)毒(du)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒使(shi)用(yong)操作(zuo)步驟

丙型(xing)肝(gan)炎病(bing)毒(du)PCR檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒使(shi)用(yong)操作(zuo)步驟：
測定(ding)法(fa)的(de)靈敏度來(lai)自作為(wei)報(bao)告(gao)的(de)酶。酶是壹種有機催化(hua)劑(ji)，很少量的酶即(ji)可誘(you)導大(da)量的(de)催化(hua)反應，產(chan)生可供觀察的(de)顯(xian)色反(fan)應現(xian)象(xiang)。因此該體(ti)系常被稱為(wei)酶(mei)放大(da)體(ti)系。
. 標準品(pin)的稀(xi)釋(shi)：本(ben)試(shi)劑(ji)盒提(ti)供原(yuan)倍(bei)標準品(pin)壹支，用(yong)戶(hu)可按(an)照(zhao)下列圖表(biao)在(zai)小試(shi)管中(zhong)進(jin)行稀(xi)釋(shi)。   24μg/ml    5號(hao)標準品(pin)    50μl的原倍(bei)標準品(pin)加(jia)入(ru)50μl標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)
 2μg/ml    4號(hao)標準品(pin)    50μl的5號(hao)標準品(pin)加(jia)入(ru)50μl標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)
 6μg/ml     3號(hao)標準品(pin)    50μl的4號(hao)標準品(pin)加(jia)入(ru)50μl標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)
 3μg/ml     2號(hao)標準品(pin)    50μl的3號(hao)標準品(pin)加(jia)入(ru)50μl標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)
 .5μg/ml   號(hao)標準品(pin)    50μl的2號(hao)標準品(pin)加(jia)入(ru)50μl標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)
2. 加(jia)樣：分(fen)別(bie)設空白孔、標準孔(kong)、待測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在酶(mei)標包(bao)被板上標準品(pin)準確加(jia)樣50μl，待測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然後(hou)再加(jia)待測(ce)樣(yang)品(pin)0μl（樣(yang)品終(zhong)稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣將樣品加(jia)於(yu)酶(mei)標板孔底(di)部，盡(jin)量(liang)不觸及孔(kong)壁(bi)，輕輕晃動混(hun)勻(yun)。|
3. 溫育(yu)：用(yong)封(feng)板膜封(feng)板後(hou)置37℃溫育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。   
4. 配液：將30倍(bei)濃縮洗滌液用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水30倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備用
5. 洗滌：小心(xin)揭(jie)掉封(feng)板膜，棄(qi)去液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗滌液，靜(jing)置(zhi)30秒後(hou)棄(qi)去，如此重復5次，拍幹(gan)。
6. 加(jia)酶：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)酶標試(shi)劑(ji)50μl，空白孔除(chu)外(wai)。
7. 溫育(yu)：操(cao)作(zuo)同3。
8. 洗滌：操作(zuo)同(tong)5。
9. 顯色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入(ru)顯色劑(ji)A50μl，再加(jia)入(ru)顯色劑(ji)B50μl，輕輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色(se)5分(fen)鐘.
0. 終止(zhi)：每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液50μl，終止(zhi)反應（此時(shi)藍色(se)立(li)轉黃(huang)色(se)）。
. 測(ce)定：以空(kong)白空調零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序測(ce)量(liang)各孔的吸光度（OD值）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加(jia)終止(zhi)液後(hou)5分鐘以(yi)內進(jin)行。

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