植物血(xue)凝(ning)素（PHA ）elisa試(shi)劑(ji)盒(he)操作(zuo)步(bu)驟

植物血(xue)凝(ning)素（PHA ）elisa試(shi)劑(ji)盒(he)操作(zuo)步(bu)驟：

. 標(biao)準(zhun)品的稀釋與(yu)加(jia)樣(yang)：在酶標(biao)包(bao)被(bei)板上設(she)標(biao)準(zhun)品孔0孔，在*、第(di)二(er)孔中(zhong)分別加(jia)標(biao)準(zhun)品00μl，然後(hou)在*、第(di)二(er)孔中(zhong)加(jia)標(biao)準(zhun)品稀釋液50μl，混勻；然後(hou)從(cong)*孔、第(di)二(er)孔中(zhong)各取(qu)00μl分(fen)別(bie)加(jia)到(dao)第(di)三(san)孔和(he)第四(si)孔，再在第(di)三(san)、第(di)四(si)孔分(fen)別加(jia)標(biao)準(zhun)品稀釋液50μl，混勻；然後(hou)在第(di)三(san)孔和(he)第四(si)孔中(zhong)先各取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)，再各取(qu)50μl分(fen)別(bie)加(jia)到(dao)第(di)五、第(di)六(liu)孔中(zhong)，再在第(di)五、第(di)六(liu)孔中(zhong)分別加(jia)標(biao)準(zhun)品稀釋液50ul，混勻；混勻後(hou)從(cong)第五、第(di)六(liu)孔中(zhong)各取(qu)50μl分(fen)別(bie)加(jia)到(dao)第(di)七(qi)、第(di)八(ba)孔中(zhong)，再在第(di)七(qi)、第(di)八(ba)孔中(zhong)分別加(jia)標(biao)準(zhun)品稀釋液50μl，混勻後(hou)從(cong)第七(qi)、第(di)八(ba)孔中(zhong)分別取(qu)50μl加(jia)到(dao)第(di)九(jiu)、第(di)十孔中(zhong)，再在第(di)九(jiu)第(di)十(shi)孔分(fen)別加(jia)標(biao)準(zhun)品稀釋液50μl，混勻後(hou)從(cong)第九第十(shi)孔中(zhong)各取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)。
2. 加(jia)樣(yang)：分別設(she)空(kong)白孔（空(kong)白對(dui)照孔不(bu)加(jia)樣(yang)品及酶標(biao)試(shi)劑(ji)，其(qi)余各步操作(zuo)相(xiang)同）、待測(ce)樣品孔。在酶標(biao)包(bao)被(bei)板上待測(ce)樣品孔中(zhong)先加(jia)樣(yang)品稀釋液40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待測(ce)樣品0μl（樣品zui終稀釋度(du)為5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣品加(jia)於(yu)酶標(biao)板孔底(di)部(bu)，盡量不(bu)觸及(ji)孔壁(bi)，輕輕晃(huang)動(dong)混勻。
3. 溫(wen)育(yu)：用(yong)封板膜(mo)封(feng)板後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。
4. 配液：將(jiang)30（48T的20倍(bei)）倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液用(yong)蒸餾(liu)水(shui)30（48T的20倍(bei)）倍(bei)稀釋後(hou)備(bei)用。
5. 洗滌：小心揭掉(diao)封(feng)板膜(mo)，棄(qi)去液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每孔加(jia)滿洗滌液，靜置(zhi)30秒後(hou)棄(qi)去，如此重(zhong)復(fu)5次，拍(pai)幹(gan)。 6. 加(jia)酶：每孔加(jia)入(ru)酶標(biao)試(shi)劑(ji)50μl，空(kong)白孔除(chu)外(wai)。
7. 溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同(tong)3。
8. 洗(xi)滌：操作(zuo)同(tong)5。
9. 顯(xian)色(se)：每孔先(xian)加(jia)入(ru)顯色(se)劑A50μl，再加(jia)入(ru)顯色(se)劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混勻，37℃避光(guang)顯(xian)色(se)5分(fen)鐘(zhong).
0. 終止(zhi)：每孔加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反應（此(ci)時(shi)藍色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

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