植物(wu)原(yuan)花青(qing)素（OPC）測試盒(he)操作(zuo)步驟(zhou)

植物(wu)原(yuan)花青(qing)素（OPC）測試盒(he)操作(zuo)步驟(zhou):

. 標準(zhun)品(pin)的(de)稀釋與(yu)加樣：在酶(mei)標包被板(ban)上(shang)設(she)標準(zhun)品(pin)孔0孔，在di壹、第(di)二(er)孔中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)00μl，然(ran)後在di壹、第(di)二(er)孔中(zhong)加標準(zhun)品(pin)稀釋液50μl，混勻(yun)；然(ran)後從di壹孔、第(di)二(er)孔中(zhong)各取00μl分(fen)別(bie)加(jia)到第三(san)孔和第(di)四(si)孔，再(zai)在第三(san)、第四(si)孔分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀釋液50μl，混勻(yun)；然(ran)後在第三(san)孔和第(di)四(si)孔中(zhong)先(xian)各取50μl棄掉，再各取50μl分(fen)別(bie)加(jia)到第五(wu)、第六(liu)孔中(zhong)，再在第五(wu)、第六(liu)孔中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀釋液50ul，混勻(yun)；混勻(yun)後從第五、第(di)六(liu)孔中(zhong)各取50μl分(fen)別(bie)加(jia)到第七(qi)、第八(ba)孔中(zhong)，再在第七(qi)、第八(ba)孔中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀釋液50μl，混勻(yun)後從第七、第(di)八(ba)孔中(zhong)分(fen)別(bie)取(qu)50μl加(jia)到第九(jiu)、第十(shi)孔中(zhong)，再在第九(jiu)第十(shi)孔分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀釋液50μl，混勻(yun)後從第九第(di)十(shi)孔中(zhong)各取50μl棄掉。（稀釋後各孔加(jia)樣量都為50μl，濃(nong)度分(fen)別(bie)為80 ng/L，20 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，5 ng/L）。

2. 加(jia)樣：分(fen)別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔（空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔不加(jia)樣品及酶(mei)標試劑，其余各步操(cao)作(zuo)相同）、待(dai)測樣品孔。在酶(mei)標包被板(ban)上(shang)待(dai)測樣品孔中(zhong)先(xian)加(jia)樣品稀釋液40μl，然(ran)後再加(jia)待(dai)測樣品0μl（樣品最終稀釋度(du)為5倍(bei)）。加(jia)樣將樣品加於(yu)酶(mei)標板(ban)孔底部(bu)，盡量不觸(chu)及(ji)孔壁，輕輕晃(huang)動混勻(yun)。

3. 溫(wen)育(yu)：用(yong)封(feng)板(ban)膜封板後置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。

4. 配(pei)液：將30（48T的(de)20倍）倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸餾(liu)水30（48T的(de)20倍）倍(bei)稀釋後備用(yong)。

5. 洗(xi)滌(di)：小心揭(jie)掉封板膜(mo)，棄去液體，甩(shuai)幹，每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液，靜置(zhi)30秒(miao)後棄去，如(ru)此(ci)重(zhong)復5次(ci)，拍(pai)幹。

6. 加(jia)酶(mei)：每(mei)孔加(jia)入酶(mei)標試劑50μl，空(kong)白(bai)孔除(chu)外。

7. 溫(wen)育(yu)：操(cao)作(zuo)同3。

8. 洗(xi)滌(di)：操作(zuo)同5。

9. 顯色(se)：每(mei)孔先(xian)加(jia)入(ru)顯色(se)劑A50μl，再加入顯色(se)劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，37℃避光顯色(se)5分(fen)鐘(zhong).

0. 終止：每(mei)孔加(jia)終止液50μl，終止反(fan)應（此(ci)時(shi)藍(lan)色(se)立轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

. 測定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長依(yi)序(xu)測(ce)量各孔的(de)吸光度(du)（OD值(zhi)）。 測定應在加終止液後5分(fen)鐘(zhong)。